国家自然科学基金(30300450)
- 作品数：7 被引量：56H指数：5
- 相关作者：梅其炳刘莉王志鹏刘新友朱全红更多>>
- 相关机构：第四军医大学山东农业大学南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 区分马立克氏病病毒疫苗株CVI988与其他毒株的PCR方法的建立及应用被引量：7
- 2007年
- 利用马立克氏病病毒(MDV)疫苗毒CVI988株pp38基因上游启动子区域连续5个碱基的缺失(5′-AGCCG-3′),设计2对特异性引物,建立了能区分MDVCVI988株和MDV其他毒株的PCR诊断方法。该方法对8株MDV毒株(弱毒疫苗株CVI988和814,强毒参考株GA,超强毒参考株RB1B、Md5和Md11,特超强毒参考株648A及1个中国野毒株J-E)的PCR鉴定结果均与预期吻合。以16只疑为MDV感染鸡的脏器组织核酸提取物为模板,用所建立的PCR方法,能从其中7只鸡样品中扩增出特异性条带,其检测结果与细胞分离培养和单克隆抗体的检测结果一致。试验证实,本研究所建立的PCR诊断方法具有良好的特异性和敏感性。
- 丁家波姜世金朱鸿飞崔治中
- 关键词：马立克氏病病毒
- 大黄多糖治疗结肠炎的机制研究
- 1.背景炎症性肠病(inflammation bowel disease,IBD)包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克隆氏病(Crohn’ s disease,CD),以肠道炎症的反复发作、...
- 刘莉梅其炳刘林娜王志鹏刘振国
- 关键词：炎症性肠病大黄多糖极化TH1细胞TH2细胞
- 文献传递
- 唐古特大黄多糖对过氧化氢诱导的肠上皮细胞凋亡的保护作用及其可能机制被引量：7
- 2010年
- 目的探讨唐古特大黄多糖(Rheum tanguticumpoly-saccharide,RTP)组分1(RTP1)对过氧化氢(H2O2)诱导的肠上皮细胞IEC-6凋亡的保护作用及其可能的机制。方法以不同浓度的RTP1(10、30、100 mg.L-1)预处理体外培养的IEC-6细胞后,加入H2O2诱导IEC-6细胞凋亡,MTT法检测细胞活力,激光共聚焦显微镜荧光染色法检测细胞内活性氧的产生,DNA琼脂糖凝胶电泳、吖啶橙染色及流式细胞仪检测细胞凋亡的发生,Western blot测定Caspase-3酶活性。结果 100μmol.L-1H2O2处理细胞2 h明显降低细胞存活率并诱导细胞凋亡,凋亡率为31.3%,细胞内活性氧水平及Caspase-3的活性明显升高,不同浓度(10、30、100 mg.L-1)RTP1预处理细胞24 h,可明显提高细胞存活率,有效抑制DNAladder的发生,流式细胞仪检测凋亡率(30、100 mg.L-1)分别降低至24.4%和21.5%,Caspase-3酶活性降低,并呈现一定的剂量依赖性。结论 RTP1可明显抑制H2O2诱导的IEC-6细胞凋亡,其细胞保护作用可能与降低细胞内活性氧水平和抑制Caspase-3活性相关。
- 刘琳娜张峰梅其炳张琰刘新友
- 关键词：唐古特大黄多糖IEC-6细胞活性氧半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
- 唐古特大黄多糖对小鼠溃疡性结肠炎细胞因子的影响被引量：13
- 2006年
- 目的:观察唐古特大黄多糖(rheum tanguticumpolysaccharides,RTP)对小鼠溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis,UC)的疗效并探讨其可能存在的机制。方法:应用三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠制备小鼠溃疡性结肠炎模型。实验设正常对照组、模型对照组、RTP治疗组(100、200、400 mg.kg-1)。观察各组实验小鼠体质量变化及组织病理学改变,采用酶联免疫吸附法检测细胞因子(IL-8、IL-10、TNFα-、IL-4)的含量。结果:中、高剂量的RTP能够缓解小鼠体质量的减轻,减少腹泻及便血的发生;并且能够显著改善小鼠结肠组织损伤及病理学改变。溃疡性结肠炎模型组TNFα-、IL-8的表达较正常对照组显著增高,而IL-10、IL-4的表达明显降低(P<0.05);高剂量RTP治疗组的TNFα-、IL-8表达明显低于溃疡性结肠炎模型组,IL-10、IL-4的表达显著高于模型组(P<0.01)。结论:RTP对TNBS诱导的小鼠溃疡性结肠炎具有良好治疗作用,其机制可能与上调抗炎细胞因子(IL-10、IL-4)及下调促炎细胞因子有关。
- 张蓉王志鹏刘莉梅其炳
- 关键词：唐古特大黄多糖溃疡性结肠炎2,4,6-三硝基苯磺酸
- 大鼠肺泡、腹腔巨噬细胞甘露糖受体与配体的亲和力比较被引量：5
- 2005年
- 目的:探讨来源于不同组织肺泡、腹腔巨噬细胞甘露糖受体(macrophagemannosereceptor,MMR)与配体的亲和力差异。方法:采用支气管肺泡灌洗和腹腔冲洗法获得肺泡和腹腔巨噬细胞(macrophage,Mφ),经纯化、鉴定后与异硫氰酸荧光标记的甘露糖基化牛血清白蛋白(MFITCBSA)孵育20min,分别加入D甘露糖、D半乳糖、EDTA,采用荧光显微镜和流式细胞仪检测甘露糖受体(mannosereceptor,MR)与配体的结合情况。结果:Mφ上存在MR,MR与配体的结合属于Ca2+依赖性,其结合可被D甘露糖、EDTA抑制,而不受D半乳糖的抑制;腹腔MMR与配体的亲和力高于肺泡MMR。结论:腹腔MMR与配体的亲和力高于肺泡MMR。
- 吕正光刘莉梅其炳曹尉王志鹏刘新友余璐
- 关键词：巨噬细胞甘露糖受体配体多糖
- 马立克氏病病毒pp38基因产物对其上游双向启动子活性的增强作用
- 为了研究鸡马立克氏病病毒(MDV)pp38基因和1．8-kb mRNA 转录子基因间一双向启动子的活性。本研究以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,构建了启动子以 pp38方向转录的重组质粒 pP(pp38)-EG...
- 丁家波崔治中姜世金Sanjay Reddy
- 关键词：马立克氏病病毒PP38基因双向启动子
- 文献传递
- 分子印迹聚合物在中药研究中的应用被引量：16
- 2008年
- 分子印迹聚合物(MIP)是一种在空间结构和结合位点上与模板分子完全匹配的高分子聚合物,该聚合物留有模板分子的"印迹",因此对模板分子具有专一的选择性结合能力。对MIP的原理、制备、特点及其在中药有效成分的分离、有效组分群的分离、活性成分的筛选、复杂样品的处理以及目标分子的分析等方面的应用进行综述。
- 朱全红冯建涌罗佳波
- 关键词：分子印迹技术中药
- 马立克氏病病毒pp38基因产物对其上游双向启动子活性的增强作用被引量：2
- 2005年
- 为了研究鸡马立克氏病病毒(MDV)pp38基因和1．8 kb mRNA转录子基因间一双向启动子的活性,本研究以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,构建了启动子以pp38方向转录的重组质粒pP(pp38)-EGFP和以1．8 kb方向转录的重组质粒pP(1．8-kb)-EGFP．将这二个重组质粒分别转染鸡胚成纤维细胞(CEF)、MDV rMd5克隆株感染的CEF(rMd5-CEF)以及pp38基因缺失的MDV rMd5Δpp38克隆株感染的CEF(rMd5Δpp38-CEF),结果只有在转染rMD5-CEF样品中才能检测到EGFP的表达；将上述二个EGFP重组质粒分别与能表达pp38的重组质粒pcDNA-pp38共转染CEF和rMd5Δpp38-CEF,在CEF中仍检测不到EGFP的表达,而在rMd5Δpp38-CEF形成的空斑周围,能检测到EGFP的表达．结果提示pp38是该双向启动子发挥作用的必要条件,但该启动子活性的发挥仍需除pp38以外的其他因子的共同作用．将pcDNA-pp38质粒和pp24表达质粒pcDNA-pp24,以及EGFP表达质粒共转染无MDV感染的CEF时,能检测到EGFP的表达．核酸阻滞试验表明,pp38必须和pp24共表达时,才能和启动子结合,表现出阻滞现象．说明pp38和pp24可能以聚合体形式与启动子结合并增强启动子的转录活性．还证明了该双向启动子在1．8 kb mRNA转录子方向的启动活性显著高于pp38基因方向．
- 丁家波崔治中姜世金Sanjay Reddy
- 关键词：马立克氏病病毒PP38基因KB双向启动子
- 己烯雌酚对2、4、6-三硝基苯磺酸/乙醇诱导的大鼠结肠炎的影响被引量：6
- 2006年
- 目的:观察己烯雌酚对2、4、6-三硝基苯磺酸(trinitrobenzene sulfonic,TNBS)/乙醇诱导的大鼠结肠炎的双向调节作用。方法:TNBS诱导大鼠结肠炎模型,肌肉注射己烯雌酚(50、100、150、200μg.kg-1),每天1次,共7 d。给药结束后,乙醚麻醉大鼠,打开腹腔,截取8 cm结肠,称重,画取溃疡面积,取病变组织以作HE染色,分离肠粘膜待测MPO活性;并取胸腺、脾脏称量。结果:50μg.kg-1己烯雌酚对结肠炎无明显治疗作用,反而引起肠道粘连和腹膜炎,加重炎症;100μg.kg-1的己烯雌酚对结肠炎具明显疗效;150和200μg.kg-1己烯雌酚能明显改善结肠炎各项指标,但大鼠全身状态差,死亡率增高。结论:适当剂量的己烯雌酚对结肠炎具有治疗作用,小剂量的己烯雌酚能够加重结肠炎的发生。
- 金艳刘莉王庆伟王志鹏李宇华冯娟梅其炳
- 关键词：己烯雌酚结肠炎细胞因子自身免疫
