国家自然科学基金(81372225)
- 作品数：5 被引量：24H指数：3
- 相关作者：温伟红杨安钢郑国旭魏铭席文锦更多>>
- 相关机构：第四军医大学第四军医大学西京医院第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 抗人肿瘤内皮标志物1 ( TEM1)抗体的表达及活性鉴定被引量：1
- 2020年
- 目的构建抗人肿瘤内皮标志物1(TEM1)全抗体IgG78的真核表达载体,进行表达纯化后鉴定其生物学活性。方法利用PCR分别从单链抗体ScFv78中扩增TEM1抗体的轻、重链可变区基因,并克隆入带有小鼠抗体恒定区的真核表达载体Bichim-L,瞬时转染HEK293F细胞,表达产物用蛋白G亲和层析柱进行纯化,所得蛋白用SDS-PAGE和Western blot法进行鉴定,采用流式细胞术和活细胞ELISA检测该抗体与TEM1阳性细胞的结合特异性及亲和力。结果成功构建了TEM1全抗体IgG78的真核表达载体,并在HEK293F细胞中表达。SDS-PAGE和Western blot法证实目的蛋白符合预期大小,流式细胞术及细胞ELISA结果显示该抗体可特异性结合TEM1阳性肿瘤细胞,且有较高的亲和力。结论成功获得了一株具有良好结合特异性和较高亲和力的TEM1抗体。
- 张玲玲吴介恒韩东晖杨发郑国旭席文锦郭张燕杨安钢秦卫军温伟红
- 关键词：抗体真核表达
- 泛素样含PHD和环指域蛋白1(UHRF1)的功能及其参与肿瘤发生发展机制的研究进展被引量：8
- 2017年
- 泛素样含PHD和环指域蛋白1(UHRF1)是UHRF家族的重要成员。生理情况下,UHRF1参与调节淋巴细胞的发育和功能,并在维持子细胞的甲基化状态、细胞生长以及维持基因组稳定等方面也发挥重要作用。UHRF1在多种肿瘤中呈高表达,且其表达与患者的临床病理特征及不良预后密切相关。UHRF1可通过表观遗传学机制对多种肿瘤抑制基因的表达调控而实现对肿瘤细胞的生长、侵袭转移、氧化应激及DNA损伤修复等特性的调节。鉴于UHRF1在肿瘤中的特异性高表达及对细胞生长的重要作用,UHRF1有望作为抗肿瘤治疗的有效靶点。
- 魏飞龙焦点郑国旭魏铭王磊杨安钢温伟红
- 关键词：肿瘤
- 下调环指蛋白2的表达促进U87脑胶质瘤细胞凋亡并增强其放射敏感性被引量：8
- 2014年
- 目的在U87脑胶质瘤细胞中下调环指蛋白2(RNF2)的表达,观察对U87细胞生长及放射敏感性的影响。方法用含有针对RNF2基因小发夹RNA(shRNA)的表达载体转染U87细胞,利用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法分别在mRNA及蛋白水平验证RNF2的表达下调,用MTT法检测细胞增殖,用annexin V-FITC/PI标记结合流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期情况;经X射线照射后,用流式细胞术检测对照细胞和RNF2表达下调细胞的凋亡情况。结果 2条针对RNF2的shRNA均可有效抑制U87细胞中RNF2的表达。RNF2表达下调后,U87细胞的增殖受到显著抑制,S期细胞明显减少(shRNA-NC:27.31±1.35;shRNF2-1:16.72±2.90;shRNF2-3:10.35±1.33),G1期细胞显著增加(shRNA-NC:56.13±1.80;shRNF2-1:76.32±3.11;shRNF2-3:80.45±2.83),同时出现细胞凋亡。经X线照射后,RNF2下调的细胞凋亡率明显增加(shRNA-NC:20.88±0.64;shRNF2-1:39.69±0.57;shRNF2-3:47.82±0.45)。结论下调RNF2表达可明显抑制细胞生长,并增强U87细胞对放射的敏感性。
- 周春辉杨帆席文锦魏铭郑国旭王微杨安钢张剑宁温伟红
- 关键词：胶质瘤RNA干扰
- CAR-T细胞治疗用于实体瘤的研究进展被引量：5
- 2017年
- 嵌合抗原受体(CAR)修饰的T细胞,即CAR-T细胞治疗策略是一种非常热门的免疫治疗策略,它可特异性识别肿瘤抗原,进而发挥特异性的杀伤作用.因此靶向性好,杀伤力强,并且T细胞的有效活化和增殖不依赖于MHC分子,是一种高效的免疫杀伤策略.目前,CAR-T细胞治疗正在从实验室逐渐走向临床.其在淋巴瘤治疗中效果良好,为血液肿瘤提供了治愈的希望.在实体瘤中,由于肿瘤微环境的复杂性,CAR-T细胞的治疗效果尚不理想,但是近年来在实体瘤方面也取得了不错的进展.本文就CAR-T治疗策略在实体瘤方面的研究进展进行综述.
- 葛玉凤韩东晖吴介恒杨发谢品秦卫军杨安钢温伟红
- 关键词：免疫治疗实体瘤
- 过表达前列腺特异性膜抗原和荧光素酶的PC3稳定细胞系的建立及成瘤性鉴定被引量：2
- 2017年
- 目的利用慢病毒感染的方法建立能稳定表达前列腺特异性膜抗原(PSMA)和荧光素酶的PSMA^+-PC3细胞系,并将其接种到裸鼠皮下检测其成瘤能力。方法包装表达PSMA的慢病毒和表达荧光素酶的慢病毒,将其感染PC3细胞后,用嘌呤霉素进行筛选,建立能够稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA^+ -PC3细胞和仅表达荧光素酶的PSMA--PC3细胞;利用流式细胞术检测PSMA的表达情况。将PSMA^+ -PC3和PSMA^- -PC3细胞接种于裸鼠皮下建立荷瘤模型,利用生物发光成像法观察其在体内的成瘤情况,利用免疫组织化学染色法检测PSMA^+ -PC3和PSMA^- -PC3肿瘤组织中PSMA的表达情况。结果成功建立了能够稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA^+ -PC3细胞和仅表达荧光素酶的PSMA^- -PC3细胞,流式细胞术检测证实PSMA^+ -PC3细胞上PSMA呈阳性表达,小动物活体成像结果显示PSMA^+ -PC3和PSMA^- -PC3细胞均可有效成瘤,免疫组织化学染色检测证实PSMA^+ -PC3肿瘤上PSMA的表达为阳性。结论成功建立了能稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA^+ -PC3细胞系,并在裸鼠体内证实其可有效成瘤,为靶向PSMA的研究提供了有用的细胞和动物模型。
- 张玲玲吴介恒韩东晖史圣甲杨发谢品席文锦郭张燕秦卫军杨安钢温伟红
- 关键词：PSMA
