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磁珠富集法与小片段克隆法筛选鲤微卫星的比较研究被引量：75: 2005年; 用2种方法克隆黑龙江鲤(Cyprinus(Cyprinus)carpiohaematopterus)的微卫星序列。这2种方法分别是:①经典的小片段DNA克隆库,用末端标记的[γ-32]ATP的CA重复序列为探针筛选;②将酶切获得的小片段DNA用结合有磁珠的并连接有15个CA重复序列的生物素进行富集,获得的含有CA重复的DNA片段并经过两次PCR扩增再克隆的方法获得富集微卫星片段的克隆库。从前一个方法的克隆库中筛选2000个菌落,获得阳性克隆45个,有22个含有微卫星,完美型的占63 6%,非完美型的占22 7%,混合型的占13 7%,重复次数超过10的有9个,占40 9%;从方法②的克隆库中筛选2600个菌落,获得阳性克隆1300个,测序其中的390个克隆,微卫星314个,完美型的占79 0%;非完美型的占14 3%;混合型的占6 7%,重复次数超过10的有293个,占93 3%。结果表明,用生物素结合磁珠富集法克隆微卫星效率高,成本低,所获微卫星质量高,是一种值得推荐的微卫星制备方法。; 孙效文贾智英魏东旺鲁翠云梁利群; 关键词：磁珠富集微卫星

转生长激素基因鲤的快速生长效应及传代被引量：14: 2002年; 报道了转生长激素基因鲤阳性群体的建立和"超级鲤"的获得。给出了"超级鲤"和对照组连续4年的生长实验结果及"超级鲤"子代连续3年的生长对照的体重数据。结果显示,外源生长激素基因对受体鲤具有快速生长效应,但具有这种超速生长作用的个体在转基因鲤群体中占极少数。此效应能传递给子代,子代中快速生长个体的比例大大高于转基因实验群体。; 孙效文梁利群闫学春曹顶臣; 关键词：传代生长激素基因转基因基因工程育种

鳙鱼微卫星分子标记的筛选被引量：54: 2005年; 采用常规方法从鳙鱼(Aristichthysnobilis)血液中提取基因组DNA,经限制性内切酶Sau3AI酶切后,选取250～750bp大小的片段构建鳙鱼基因组文库。采用人工合成的重复序列(CA)15、(AG)12、(AAG)8用同位素标记作为探针,通过原位杂交筛选基因组文库,获得鳙鱼的微卫星序列。进一步用引物设计软件PrimerPremier5 0设计引物。通过杂交获得99个阳性克隆,经测序筛选出82个微卫星序列,设计引物65对。; 鲁翠云孙效文梁利群; 关键词：鳙鱼微卫星分子标记

几种鱼类的受精卵注射外源基因后孵化率的比较研究被引量：1: 2003年; 用显微注射方法,将融合基因(鲤MT启动子基因与大麻哈鱼生长激素基因)分别导入虹鳟Oncorhynchusmykiss、鲤Cyprinus(cyprinus)carpiohaematopterus和鲫Carassiusauratusgibelio的受精卵中,注射外源基因后受精卵的孵化率分别平均为6 4%、34 0%和35 70%,按孵出的鱼苗数计算成活率,分别研究了各实验中注射后3种鱼受精卵孵化率的差异及影响因素。经t值检验,鲤与鲫注射后的孵化率无显著差异,而与虹鳟受精卵的孵化率比较有显著差异,说明显微注射在这几种鱼受精卵上的转基因孵化效果明显不同。; 闫学春孙效文梁利群曹顶臣; 关键词：鱼类受精卵显微注射孵化率融合基因外源基因

金属硫蛋白基因对转基因鲤及实验动物体内重金属累积的影响被引量：7: 2005年; 金属硫蛋白(metallothiontine,简称MT),又称重金属结合蛋白,是一种低分子量富含半胱氨酸的金属结合蛋白.锌、铜、镉等多种金属元素均可在体外或体内诱导组织MT大量合成[1].已有研究表明,MT在微量元素代谢、重金属富集、环境污染的清除等方面起重要作用[2,3],因此,选择恰当的启动子是保证外源基因在转基因鱼中成功表达的最重要因素.; 闫学春孙效文梁利群曹顶臣; 关键词：金属硫蛋白基因实验动物重金属累积

鲤鲫杂交(♀)×鲫(♂)回交子代的形态特征研究被引量：7: 2006年; 利用雌性鲤鲫杂交与雄性鲫鱼回交,制备了鲤鲫杂交回交子代鱼,并对其1龄鱼的形态特征和内部器官结构进行了测定。其主要性状为：回交子代的背鳍条Ⅲ,15～18；臀鳍条Ⅲ,4～6；侧线鳞27～36；侧线上鳞和侧线下鳞同为5～6；鳃耙28～33；体长为体高的(2.35±0.11)倍,为头长的(3.33±0.13)倍,为尾柄长的(6.36±0.54)倍；头长为眼径的(4.54±0.20)倍；为眼间距的(1.74±0.07)倍；为尾柄高的(1.96±0.10)倍；尾柄长为尾柄高的(0.90±0.28)倍；体高为头高的(1.59±0.09)倍。结果表明,该回交子代鱼在可数和可量性状上都有个别性状产生变易,但大多数性状相对比较稳定。; 闫学春孙效文梁利群曹顶臣; 关键词：回交子代

转基因鲤营养成分与对食用动物影响的研究被引量：1: 2007年; 从转基因鲤的食用安全角度出发,研究了转基因鲤与正常鲤的营养成分和细菌致突变实验及对食用动物的影响。研究结果表明,转基因鲤与正常鲤肌肉中粗蛋白质含量分别为17.52%和17.45%、粗脂肪含量分别为2.55%和2.83%、灰分分别为1.29%和1.23%、水分分别为78.85%和78.27%,氨基酸总量分别为16.54%和16.77%,经统计分析,二者均无显著差别;其抗病能力虽稍弱于正常鲤鱼,经t值检验,无显著差别。而用转生长激素基因鲤作为食物,食用它的动物的各组织的重金属含量经过检测与对照组动物也没有显著差异(P>0.05),说明外源基因的插入没有引起作为食物的蛋白质、脂肪、氨基酸等组成的变化。; 闫学春孙效文梁利群曹顶臣; 关键词：营养成分食用动物

鲤鱼的遗传连锁图谱(初报)被引量：166: 2000年; 建立了鲤鱼的遗传连锁图谱。图谱有RAPD分子标记 56个 ,鲤鱼的SSLP标记 2 6个 ,鲫鱼SSLP标记19个 ,斑马鱼的SSLP分子标记 70个 ,鲤鱼基因标记 91个 ,共有标记 2 6 2个 ;图谱有 50个连锁组 ,连锁图给出鲤鱼的基因组大小在; 孙效文梁利群; 关键词：鲤鱼遗传连锁图谱分子标记

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国家高技术研究发展计划(863-101-05-02-01)