山东省教育厅科技计划(J08LH66)
- 作品数：1 被引量：6H指数：1
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- RNA干扰沉默AKT基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖与凋亡影响研究被引量：6
- 2013年
- 目的:通过小分子干扰RNA(siRNA)技术沉默卵巢癌SKOV3细胞中PI3K/AKT信号通路关键基因蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)基因的表达,探讨其对卵巢癌细胞增殖与凋亡的影响。方法:人卵巢癌SKOV3细胞体外培养,随机分为对照组、空白载体组和siRNA干扰组,siRNA干扰组通过脂质体介导AKT siRNA转染SKOV3细胞。荧光定量PCR法检测AKT在干扰前后AKT mRNA的表达,免疫荧光细胞化学法检测PI3K、AKT与PCNA蛋白在各组中的表达,MTT法检测细胞增殖抑制情况,流式细胞仪AnnexinⅤ/PI法检测细胞凋亡率的变化。结果:siRNA干扰组AKT mRNA的表达量为(0.325±0.04)明显抑制,并显著低于对照组,q=58.96,P<0.001;免疫荧光细胞化学结果示,siRNA干扰组的AKT、PCNA蛋白的荧光强度较对照组与空白载体组明显降低,而PI3K蛋白在3组间差异无统计学意义,P=0.637;流式细胞仪AnnexinⅤ/PI法检测结果示,siRNA干扰组细胞凋亡率高达(79.52±2.31)%,较对照组(27.35±2.01)%与空白载体组(28.64±1.96)%明显升高,约是空白载体组(q=60.880,P<0.001)与对照组(q=58.553,P<0.001)的3倍,差异有统计学意义。结论:AKT siRNA可干扰AKT基因的表达,抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,促进其凋亡,有望成为治疗卵巢癌的新方法。
- 胡明英王晓莉毕学辉刘晓文
- 关键词：小分子干扰RNA蛋白激酶B
