福建省科技创新平台建设项目(2009J1004)
- 作品数：9 被引量：27H指数：4
- 相关作者：沈建箴王少元谢水玲陈璐付海英更多>>
- 相关机构：福建医科大学福建省人民医院福建省立医院更多>>
- 发文基金：福建省科技创新平台建设项目福建省重大科技项目福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PI_3K/Akt与血液恶性肿瘤关系的研究进展被引量：4
- 2010年
- 在肿瘤的发生发展中,细胞的凋亡受抑在细胞生存中起着主要的作用。磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路与肿瘤发生发展中的许多细胞生物学过程存在着密切联系,这些生物学过程包括:细胞凋亡、转录及细胞周期的调控等。因此,探讨PI3K/Akt作用的分子机制并揭示其与肿瘤的关系将为抗肿瘤药物的研究提供新靶点。
- 黄青王少元
- 关键词：磷脂酰肌醇3激酶蛋白激酶B肿瘤
- 赖解旋酶恒温基因扩增技术的研究进展被引量：2
- 2010年
- 随着分子生物学研究领域的发展,赖解旋酶恒温基因扩增技术(HDA)作为一种简便、快速、高效的体外恒温基因扩增技术出现。HDA依靠解旋酶解开双链DNA、结合蛋白维持单链DNA状态、DNA聚合酶催化靶片段的扩增。可以用于微生物基因组DNA、病原菌DNA、质粒DNA和cDNA等的扩增,该法具有广阔的实用前景。
- 陈璐沈建箴
- 关键词：DNA解旋酶
- 基因转染技术及其在白血病研究中的应用被引量：4
- 2010年
- 随着人类基因组计划的完成,分子生物学研究进入后基因组时代,基因转染技术也成为重要的实验手段,被广泛应用于基因功能研究及基因治疗。基因转染的方法包括化学法、物理法、生物法,它们各有优缺点。现主要概述基因转染的基本方法及其在白血病基因功能研究及基因治疗中的应用。
- 叶美玲王少元
- 关键词：基因功能基因治疗基因转染白血病
- 纤维连接蛋白N端肝素结合域多肽的制备及其对DIC大鼠的治疗作用被引量：1
- 2010年
- 本研究利用酵母表达系统制备纤维连接蛋白(fibronectin,FN)N端肝素结合域多肽,检测多肽的生物学活性,进行多肽治疗DIC大鼠的实验研究。利用PCR技术从FNcDNA中扩增FN N端肝素结合域序列,将获得的目的基因片段克隆至T载体,筛选后转移至酵母表达pAo815SM载体进行选择,再构建重组酵母表达pPIC9K载体,线性化重组载体并转染GS115酵母细胞,在GS115酵母细胞表达目的多肽。发酵液经80%硫酸胺沉淀,沉淀物过S-100柱分离纯化,纯化物再经过SP柱纯化,测定多肽结合肝素等生物学活性。股静脉注射内毒素脂多糖(LPS)50mg/kg建立大鼠DIC模型。建立的DICSD大鼠40只,随机分2组,每组20只,一组为rhFNHN-29多肽治疗组,另一组为生理盐水对照组。治疗组分别于注射LPS前半小时、注射后2小时、4小时尾静脉注射rhFNHN-29多肽(10mg/kg);生理盐水对照组注射等体积生理盐水。另设正常对照组SD大鼠20只,注射等体积生理盐水作为正常对照组。各组大鼠于股静脉注射LPS后6小时,对侧股静脉抽血测血常规,分离血浆检测血浆TNFa和凝血象。于注射LPS后72小时处死大鼠,取肝、肾、脾、肺、心、脑组织进行病理组织学检查。结果表明:成功地在酵母表达系中表达了目的多肽,其表达量达到30mg/L,所表达的多肽具有结合肝素活性。在多肽抗DIC作用的动物实验中发现多肽治疗组的血浆TNFa水平、血常规指标、凝血象和病理组织学的改变都较生理盐水对照组更接近正常对照组。结论:成功地制备了rhFNHN-29多肽,这种多肽能在一定程度上预防和治疗DIC。
- 邹起练郭江睿陈小芳黄美娟吴勇陈元仲
- 关键词：纤维连接蛋白酵母表达系统弥漫性血管内凝血
- 黄芩苷对CA46细胞裸鼠异种移植瘤的作用及机制被引量：3
- 2012年
- 目的:研究黄芩苷抗CA46细胞裸鼠异种移植瘤的作用并探讨其机制。方法:构建CA46细胞裸鼠异种移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为5组:阴性对照组、15 mg/kg黄芩苷组、30 mg/kg黄芩苷组、60 mg/kg黄芩苷组和4 mg/kg依托泊甙(VP-16)阳性对照组。采用腹腔注射方式给药,12 d后处死部分裸鼠,对剥取的瘤块称重计算抑瘤率,并进行透射电镜、病理学和Western blotting检测;观察各组未处死的裸鼠直至全部死亡,研究黄芩苷对荷瘤裸鼠生存时间的影响。结果:黄芩苷明显抑制了CA46细胞裸鼠异种移植瘤的生长,引起肿瘤细胞的凋亡、坏死以及p-Akt、NF-κB、mTOR和p-mTOR蛋白表达的下调;随着黄芩苷剂量的增加,黄芩苷治疗组荷瘤裸鼠的生存时间明显延长。结论:黄芩苷可抑制CA46细胞裸鼠异种移植瘤的生长,诱导肿瘤细胞的凋亡,并延长荷瘤裸鼠的生存时间,其机制可能与下调PI3K/Akt/NF-κB和PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。
- 黄毅胡建达郑静李静魏天南郑志红陈英玉
- 关键词：黄芩苷CA46细胞裸鼠异种移植瘤PI3K/AKT信号通路
- Hippo信号通路核心元件MST1在急性白血病患者中的表达及意义被引量：1
- 2012年
- 本研究旨在探讨Hippo信号通路核心元件MST1基因在急性白血病患者中的表达情况及其与白血病发生、发展的关系。采用实时定量PCR检测50例初治急性白血病患者、33例正常人、23例完全缓解缓解患者及12例难治/复发患者的MST1基因的表达情况,采用Western blot进一步验证其蛋白的表达水平,结合临床资料对患者的预后因素进行分析。结果表明,与正常人相比,急性白血病初治患者MST1基因的表达水平明显减低(P<0.05),完全缓解前后差异有统计学意义(P<0.05),难治/复发患者与初治患者MST1基因表达水平无明显差异(P>0.05),完全缓解患者与正常人MST1表达水平无明显差异(P>0.05)。结论:MST1基因的低表达与急性白血病的发病及预后相关。
- 谢水玲沈建箴付海英吴淡森王小婷曹登敏
- 关键词：急性白血病
- Hippo通路在肿瘤发生中的研究进展被引量：6
- 2012年
- Hippo信号通路是近年来在果蝇属中研究发现的,它由核心成分、上游及下游成分组成,是一条非常保守的参与调控器官大小及细胞周期和凋亡调节的通路,此信号通路由多种抑癌基因及一种候选癌基因组成。研究表明,此通路的不能激活或异常表达在动物试验中参与多种疾病的发生,进而发现其与人类多种肿瘤的发生密切相关,主要与其抑癌基因的低表达相关。
- 谢水玲沈建箴
- 关键词：细胞周期肿瘤
- 纤维连接蛋白C端肝素结合域多肽在毕赤酵母中的表达、纯化及鉴定被引量：2
- 2012年
- 为在毕赤酵母中表达纤维连接蛋白C端肝素结合域(Fibronectin C-terminal heparin-binding domainFNCHBD)多肽并研究其功能,通过PCR技术扩增FNCHBD目的基因,将目的基因与T载体连接,经测序正确后,插入pAo815SM酵母表达载体增加基因拷贝数,然后酶切克隆入酵母表达载pPIC9K;将重组质粒Sal I酶切线性化后转化毕赤酵母菌株,筛选工程菌,经甲醇诱导表达,用SDS-PAGE检测发酵上清液,表明有重组蛋白FNCHBD多肽的高表达,表达产物通过离心、超滤、离子交换层析纯化,纯化产物通过SDS-PAGE、Western blotting印迹、质谱及肝素亲和层沉析对表达产物进行鉴定。结果表明利用酵母工程菌成功表达和纯化了FNCHBD多肽,多肽的分子量接近32 kDa,纯化产物的纯度可达95%以上,能被FN多克隆抗体特异识别且具有多肽肝素结合活性,为后续结构及功能的研究奠定基础。
- 陈小芳陈显凌邹起练吴勇陈元仲
- 关键词：纤维连接蛋白毕赤酵母表达纯化
- 分泌型卷曲相关蛋白基因启动子甲基化状态检测在急性白血病中的意义被引量：4
- 2010年
- 目的 探讨分泌型卷曲相关蛋白（SFRP）家族基因启动子异常甲基化状态与急性白血病（AL）发生发展的关系.方法 采用甲基化特异性PCR（MSP）检测AL患者、AL细胞系和正常人外周血单个核细胞中SFBP（1、2、4、5）基因启动子区的甲基化状态.结果 正常人单个核细胞中不存在SFRP基因的甲基化.AL患者中,SFRP1、2、4、5基因甲基化总发生率分别为35.6%（31/87）、25.3%（22/87）、12.6%（11/87）、17.2%（15/87）,其中在急性髓系白血病（AML）患者中的甲基化率分别为33.9%（20/59）、23.7%（14/59）、6.8%（4/59）、10.2%（6/59）,在急性淋巴细胞白血病（ALL）患者中的甲基化率分别为39.3%（11/28）、28.6%（8/28）、25.0%（7/28）、32.1%（9/28）.SFRP1、2、5基因在HL60、NB4、Molt-4和Jurkat细胞系中均呈完全甲基化状态,SFRP4在NB4、Molt-4和Jurkat细胞系中呈完全甲基化状态,在HL60细胞系中则呈部分甲基化状态.结论 在AL患者及细胞系中,SFRP（1、2、4、5）基因已出现高频率甲基化.推测SFRP基因的异常甲基化模式与AL的发生密切相关,其可能成为诊断和监测AL的基因标志物.
- 徐成波沈建箴沈松菲付海英朱艺芳陈璐
- 关键词：白血病甲基化
