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降钙素基因相关肽衍生物的优化表达及纯化: 2010年; 目的优化重组降钙素基因相关肽衍生物(CGRP-VY)蛋白的表达体系,并利用亲和层析获得高纯度的重组蛋白。方法在前期研究的基础上,将构建的pET-32a(+)-rhCGRP-VY在大肠埃希菌中表达,分别对时间、温度和IPTG的浓度进行优化。采用Ni-NTA亲和层析柱分离纯化可溶性蛋白,YLN凝胶影像分析系统和Bradford法检测纯化蛋白的纯度与含量。结果重组蛋白的最佳表达条件为诱导时间4h、诱导温度37℃、IPTG浓度0.75mmol/L,重组蛋白的最高表达量占菌体总蛋白的70%～80%,高效表达的CGRP-VY融合蛋白大部分可溶,纯化后蛋白纯度可达90%以上,蛋白浓度约为0.09mg/ml。结论成功优化了蛋白表达条件,并用亲和层析法纯化出大量可溶性TrxA-rhCGRP-VY。; 肖莉杰林平陈文姜颖刘紫君于晓光; 关键词：VY 纯化

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黑龙江省教育厅资助项目(11521097)