河北省自然科学基金(H2013201128)
- 作品数：6 被引量：12H指数：3
- 相关作者：刘中成张艳芬刘利鹏王南南解瑶更多>>
- 相关机构：河北大学河北凯盛医药科技有限公司更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- hFcεRIα/RBL-2H3细胞株的构建与评价被引量：3
- 2015年
- 目的构建稳定表达人FcεRIα(h FcεRIα)亚基的RBL-2H3细胞株。方法利用RT-PCR技术克隆h FcεRIα基因,构建真核表达载体p CI-neo-h FcεRIα。脂质体介导法转染RBL-2H3细胞,G418筛选获得稳定转染细胞株。利用RT-PCR、Western blot及免疫荧光法鉴定转染结果。结果通过对脂质体介导转染体系进行优化,转染效率可高达75.38%。经Western blot、免疫荧光及RT-PCR鉴定,h FcεRIα基因在RBL-2H3细胞内成功表达。结论成功构建h FcεRIα/RBL-2H3细胞模型,为深入研究Ig E与FcεRI作用机制及相关药物开发提供了实验基础。
- 王南南刘中成张艳芬刘玉欣崔哲陈瑶
- 关键词：IGERBL-2H3细胞脂质体转染
- 核酸适配子在小分子检测中的应用
- 2015年
- 核酸适配子是利用配体指数级富集系统进化技术从单链寡核苷酸文库中筛选出的与靶物质有高亲和力和特异性的寡核苷酸,它已成为小分子化合物研究的有效工具,在分析化学领域逐渐成为人们研究的热点。当前已筛选了许多小分子物质特异性适配子,并基于适配子开发了一系列小分子物质检测系统。本文主要对SELEX筛选流程、小分子物质核酸适配子筛选特征与方法以及以核酸适配子为基础开发的电化学法、荧光法、胶体金比色法、酶联适配子免疫法等在小分子物质检测中的应用进行了综述。
- 张艳芬解瑶王南南赵丽建刘利鹏刘中成
- 核酸适配子在IgE检测中的应用被引量：1
- 2013年
- 核酸适配子是一类经SELEX技术筛选出来的寡聚核苷酸,其功能与单克隆抗体类似但在诸多方面明显优于抗体,可用于测定靶物质含量等。免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)是介导过敏反应的关键因子,IgE定量检测是临床诊断过敏性疾病的重要指标。该文主要综述了核酸适配子在IgE检测中的应用。
- 刘中成赵丽君张艳芬解瑶时海浪
- 关键词：IGE
- 适于标记核酸适配子胶体金的制备及性能被引量：4
- 2014年
- 为了获得适于标记寡核苷酸适配子的胶体金,对制备工艺条件进行了优化：20 mL 0.1 g/L氯金酸溶液中添加10 g/L柠檬酸三钠500 μL,pH=3.0,初始沸腾时间小于4 min,加入还原剂后反应时间为6 min.通过紫外可见光谱扫描和透射电镜对其性能进行鉴定,获得了分散均匀、直径15～20 nm的胶体金颗粒,可准确标记核酸适配子,且将胶体金标记的链霉素适配子与半抗原小分子链霉素进行反应,可对链霉素进行定性和半定量检测,满足利用胶体金标记适配子检测靶物质的需要.
- 解瑶刘中成张艳芬赵丽健刘利鹏
- 关键词：胶体金
- Cε3-Cε4结合肽筛选及鉴定
- 2014年
- 为了获得免疫球蛋白E(IgE)特异性结合肽,采用固相筛选法,以Cε3-Cε4为靶蛋白,利用噬菌体随机多肽展示技术进行筛选,4轮筛选后,经ELISA鉴定获得19个阳性单克隆噬菌体,阳性率达38%,测序并翻译后共获得11个结合肽.竞争抑制性实验证明P7,P13,P20与Cε3-Cε4蛋白的结合能力较强,细胞水平分析表明:结合肽P7,P20可阻止IgE与其受体结合.本研究将为进一步探索IgE结合肽生物学功能奠定基础,并为设计治疗变态反应性疾病的小分子药物提供参考.
- 张艳芬刘利鹏赵立健时海浪刘中成
- 基于胶体金检测核酸适配子与蛋白相互作用的新方法被引量：4
- 2015年
- 基于核酸适配子对靶蛋白的高特异性及胶体金比色法的高度灵敏性,建立了一种分析核酸适配子与靶蛋白亲和力以及简便快速检测蛋白质的新方法.核酸适配子保护的胶体金在高盐条件下可保持稳定,靶蛋白与胶体金竞争结合适配子,使胶体金发生聚沉,呈现颜色变化,可通过检测A520值分析适配子与靶蛋白的亲和力以及蛋白浓度.通过对适配子浓度、靶蛋白浓度、共孵育时间、竞争反应时间和氯化钠浓度等关键因素进行优化,确定了最佳检测条件.
- 刘中成赵丽健刘利鹏张艳芬王南南陈瑶王向欢
- 关键词：靶蛋白胶体金
