国家科技支撑计划(2006BAD06A10)
- 作品数：22 被引量：60H指数：5
- 相关作者：常惠芸高闪电邵军军独军政林彤更多>>
- 相关机构：中国农业科学院兰州兽医研究所中国兽医药品监察所甘肃农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪瘟病毒阴性和阳性血清(细胞中和试验)参考品的制备被引量：1
- 2013年
- 为制备和标定猪瘟病毒(CFSV)阴性和阳性血清细胞中和试验参考品,本实验制备了CSFV阴性、弱阳性和强阳性血清,通过过滤、分装、冻干、熔封,获得一组候选物。按常规方法进行各项指标的检测,并在国内6个实验室对其细胞中和效价进行了协作标定和定值。结果显示:这组候选物物理性状、无菌检验、安全检验、支原体检验、真空度测定均合格;剩余水分小于3%;特异性检验结果均为口蹄疫病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、牛病毒性腹泻/粘膜病毒抗体阴性;残余CFSV免疫荧光和套式RT-PCR核酸检测结果均为阴性;均匀性检验结果表明,各组测定数据的均值与方差无显著差异(p>0.05);在-20℃的保存有效期约为16.8年。协作标定定值的细胞中和效价分别为:阴性(200905-1)、1∶100.98±0.13(200905-2)、1∶103.31±0.35(200905-3)。该候选物可以作为参考品。
- 戴志红蒋卉关孚时孙海燕李翠张秀英徐璐王琴刘景利王杰徐珊珊赵丹彤石宝兰关永梅张慧芳刘长辉何侠侯军高云飞王在时
- 关键词：猪瘟病毒血清均匀性
- 硫酸乙酰肝素受体介导的病毒感染作用被引量：7
- 2008年
- 赵建勇独军政高闪电丛国正林彤邵军军伏小平常惠芸
- 关键词：硫酸乙酰肝素病毒受体受体介导SULFATE糖蛋白受体特异性结合
- 细胞传感器检测技术研究进展被引量：2
- 2010年
- 细胞传感器以细胞作为敏感元件来研究信号识别、传导和指示的过程,可以用于细胞的信息功能及目的物质的检测,具有快速、敏感和特异的特点,已被广泛用于食品安全、农药残留、环境污染、病原微生物及生物安全检测等方面。笔者主要介绍了细胞传感器在病原体和毒素检测中的最新研究进展,分别叙述了现有的各类细胞传感器的元件构成和作用原理,并展望了细胞传感器未来研究和应用方面的发展方向。
- 杨双马军武
- 关键词：细胞传感器病原体毒素细胞受体细胞病变
- 环介导等温基因扩增技术及其在病毒检测中的应用被引量：13
- 2008年
- 环介导等温扩增是一门新兴的分子生物学检测技术,因其具有特异性高、敏感性高、简单、快捷及不需要昂贵的仪器设备等特点,受到了生物医学研究者的高度关注。目前,该方法已经被广泛应用于各种病原微生物检测。简要综述了环介导等温扩增技术的原理、特点,及其在病毒检测中的应用。
- 周广青常惠芸邵军军
- 关键词：环介导等温扩增技术病毒检测
- 猪瘟活疫苗(种毒)鉴别检验阳性血清制备被引量：1
- 2010年
- 为制备猪瘟活疫苗(种毒)鉴别检验阳性血清,本实验将4头非免疫健康猪进行猪瘟活疫苗基础免疫和猪瘟石门强毒株反复强化免疫后,采血分离血清,过滤、分装、冻干、熔封,获得4批产品,并进行了检验和验证。结果显示:物理性状、无菌检验、安全检验、均一性检验、支原体检验、真空度测定均合格;剩余水分均小于4%;特异性检验表明,口蹄疫病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、牛病毒性腹泻/粘膜病病毒抗体均为阴性;残余猪瘟病毒免疫荧光和套式RT-PCR核酸检测结果均为阴性;兔体中和效价分别为1∶800、1∶800、1∶800和1∶1 600;对猪瘟兔化弱毒种毒和5种猪瘟活疫苗的验证结果均良好。该4批血清可以用于猪瘟活疫苗(种毒)鉴别检验。
- 戴志红关孚时蒋卉孙海燕李翠赵丹彤关永梅石宝兰张慧芳张瑞婷张立春邓永江波孟画诗王在时
- 关键词：猪瘟疫苗抗血清
- O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法的建立被引量：9
- 2008年
- 本研究建立了O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法,确立了O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法检测O型口蹄疫血清阴阳性判定标准:抗体效价大于或等于1∶32时判为O型口蹄疫抗体阳性;1∶16～1∶32时判为O型口蹄疫抗体可疑。检测131份阴性血清、口蹄疫亚洲1型阳性血清和A型阳性血清,固相竞争ELISA方法和液相阻断ELISA方法的特异性分别是95.5%,84.7%。固相竞争ELISA方法检测口蹄疫亚洲1型、口蹄疫A型阳性血清时,无交叉反应,O型口蹄疫病毒感染牛、免疫牛和感染猪血清的阳性检出率均为100%,免疫猪检出率为86.7%。
- 林密马军武祁淑芸冯霞张峰殷宏
- 关键词：口蹄疫抗体效价血清
- 口蹄疫病毒单链抗体基因的构建及其推导蛋白三维结构的分子模拟
- 2009年
- 用口蹄疫病毒(FMDV)Asia1/JS/China/2005株灭活抗原免疫家兔,从兔脾细胞中提取RNA作为模板,通过PCR及重叠PCR方法构建出FMDV的单链抗体基因。测序结果显示,序列中有重链可变区(VH)及轻链可变区(VL)基因,经Blast比较,发现VH、VL的相似性最高分别可达81.0%和93.0%,且在序列中有连接VH及VL的柔性接头(Gly4Ser)3。用EXPASY软件包预测了推导蛋白的特性。运用Swiss-pdb viewer软件的SWISS-Model处理器对构建的单链抗体基因推导的蛋白序列进行了三维结构的分子模拟。拉马钱德兰图证明,所模拟的单链抗体的三维结构较为合理。
- 刘涛周广青马军武林密祁淑芸冯霞马明仁
- 关键词：口蹄疫病毒单链抗体分子模拟
- 双峰驼口蹄疫病毒受体β6亚基基因的分子特征被引量：1
- 2007年
- 病毒受体是病毒宿主范围和组织嗜性的一个决定因素。研究表明,4种整联蛋白αvβ1、αvβ3、αvβ6、αvβ8能够介导口蹄疫病毒感染偶蹄动物,且αvβ6是主要的口蹄疫病毒受体。首次从健康双峰驼肺组织中克隆到了β6亚基基因并进行了比较分析。结果显示,双峰驼β6基因的编码区含有2367个核苷酸,编码788个氨基酸残基,其中信号肽由26个氨基酸组成;胞外域由681个氨基酸组成,含有8个潜在的糖基化位点(NXT/NXS)和58个半胱氨酸(Cys)残基;跨膜区由29个氨基酸组成(708～736aa);胞浆域由52个氨基酸组成,含有一个NPLY核心基序和一个潜在的糖基化位点(NVT),该基因在GenBank中的登录号为EF613220。双峰驼β6基因与牛、猪、羊、人、小鼠、挪威大鼠β6基因的核苷酸序列同源性分别为91.1%、91.8%、90.6%、90.5%、83.7%、84.1%,推导的氨基酸序列同源性分别为94.3%、93.4%、93.4%、93.7%、88.7%、88.6%。偶蹄动物(双峰驼、牛、羊、猪)的β6基因同源性较高,在遗传进化树上同属于一个亚群,表明β6亚基可能与口蹄疫病毒的宿主范围有关。
- 独军政常惠芸高闪电王景锋邵军军丛国正林彤才学鹏谢庆阁
- 关键词：口蹄疫病毒受体分子特征
- 商品疫苗对FMDVO／YNGM／97株的免疫效果评价
- 2008年
- 利用血清学方法对我国流行毒株O/YNGM/97进行鉴定,并对其生物学特性和免疫学特性进行了研究。结果显示,该流行毒株为O型口蹄疫病毒(FMDV),其对乳鼠和BHK21细胞的适应性比较好,致病性较强,LD50和TCID50分别为10-6.33/0.2 mL和10-4.75/0.05 mL。VP1基因序列的比较结果显示,O/YNGM/97株与国外FMDV参考毒株O/TAI/1/92的同源性为91.4%,与国内疫苗毒株OZ/93、OA/58和OY/80的同源性分别为79.2%、83.6%和78.9%。用商品疫苗OZ株、OY株口蹄疫O型灭活疫苗和牛羊口蹄疫O-Asia1型双价灭活疫苗免疫的小鼠均可产生较高的免疫抗体,并对流行毒株O/YNGM/97的攻击具有较好的保护性。说明,使用现有商品疫苗完全可以预防该毒株在我国的流行。
- 王占伟刘力宽陈笑娟余四九王永录方玉珍潘丽蒋守田张维德杜进鑫张淑刚张中旺李正丰张昱吕建亮
- 关键词：口蹄疫疫苗流行毒株免疫抗体BALB/C小鼠
- 兔体中和试验用猪瘟病毒阴、阳性血清国家参考品的研制
- 2013年
- 为制备和标定兔体中和试验用猪瘟病毒阴、阳性血清国家参考品,本试验制备了猪瘟病毒阴性、弱阳性和强阳性血清,通过过滤、分装、冻干、熔封,获得3亚批候选物,并进行了检验、协作标定和定值。结果显示:物理性状、无菌检验、安全检验、支原体检验、真空度测定、均匀性检验和保存有效期试验均合格;剩余水分均小于4%;特异性检验结果均为口蹄疫、伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征、猪细小病毒病、牛病毒性腹泻/粘膜病抗体阴性,并且弱阳性和强阳性血清能中和猪瘟兔化弱毒而阴性血清不能中和;残余猪瘟病毒免疫荧光和套式RT-PCR核酸检测结果均为阴性;经协作标定定值,其兔体中和效价分别为:阴性、1∶100.928±0.103、1∶102.928±0.103,表明该候选物可以作为国家参考品。
- 戴志红蒋卉关孚时孙海燕李翠张秀英张瑞婷张立春王在时
- 关键词：猪瘟病毒血清国家参考品
