国家自然科学基金(30772358)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 细胞信号转导抑制因子在宫内发育迟缓大鼠骨骼肌细胞中的表达及意义被引量：2
- 2011年
- 目的研究宫内发育迟缓(IUGR)大鼠骨骼肌细胞中细胞信号转导抑制因子(SOCS)及胰岛素信号通路重要分子胰岛素受体底物-1(IRS-1)的表达变化。探讨其在IUGR大鼠成年后胰岛素抵抗发生中的机制及意义。方法用孕期限制饮食法建立大鼠IUGR模型,原代培养大鼠骨骼肌细胞,采用Real time PCR和Western blot检测0周和12周龄IUGR子鼠骨骼肌细胞中SOCS-1、SOCS-3及IRS-1的mRNA和蛋白表达。采用SPSS17.0软件进行统计学分析。结果与对照组相比,0周和12周龄IUGR组子鼠中骨骼肌细胞中SOCS-1、SOCS-3的mRNA和蛋白表达水平均增加(Pa<0.05),而IRS-1的mRNA和蛋白表达水平均下降(Pa<0.05)。IRS-1mRNA与SOCS-1 mRNA、SOCS-3 mRNA表达水平均呈负相关(r=-0.832、-0.789,Pa<0.01)。结论 IUGR大鼠子代骨骼肌细胞SOCS-1、SOCS-3表达增加,通过负性调节使得IRS-1表达降低,可能是骨骼肌胰岛素抵抗和成年代谢综合征发生的机制之一,提示SOCS-1和SOCS-3可以作为2型糖尿病和其他胰岛素抵抗的治疗靶点。
- 廖立红郑锐丹王成斌应艳琴罗小平
- 关键词：宫内生长受限胰岛素受体底物-1胰岛素抵抗
- 细胞信号转导抑制因子3特异性shRNA的构建及鉴定
- 2011年
- 目的构建针对大鼠细胞信号转导抑制因子3(SOCS-3)基因的短发夹RNA(shRNA)表达载体,选取最有效shRNA模板序列。方法设计并合成编码的shRNA的2条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆至pGPU6/GFP/Neo中构建重组表达载体,转化DH5α菌株,进行序列测定;转染至骨骼肌细胞中。Real-time PCR和Western blot检测各组SOCS-3的表达情况。结果测序证实重组质粒构建成功。4对shRNA模板序列对SOCS-3的表达抑制与空白及阴性对照相比差异均有统计学意义(均P<0.05),且以SOCS-3-shRNA a干预效果较好。结论 SOCS-3特异性shRNA重组表达载体构建成功,能有效抑制大鼠骨骼肌细胞SOCS-3的表达,为后续研究及代谢综合征的基因治疗奠定了基础。
- 廖立红郑锐丹王成斌应艳琴罗小平
- 关键词：短发夹RNARNA干扰
