国家自然科学基金(81272663)
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
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- 人胰腺癌编码SUFU蛋白的新剪接体
- 2013年
- 目的分析人胰腺癌组织和细胞中Hedgehog信号通路主要成员SUFU蛋白的剪接体。方法用反转录和3’cDNA末端快速扩增（3’RACE）法扩增suppresseroffused（SUFU）片段，测序发现一个新的外显子，应用RT—PCR方法扩增全长含新外显子的SUFU（nSUFU）。采用脂质体法将nSUFU及SUFU转染SWl990细胞，应用蛋白质印迹法检测SWl990细胞及胰腺癌组织新剪接体编码的蛋白质的表达。结果通过3’RACE法的第二轮巢式PCR扩增产物约600bp，经测序并将其序列与NCBI网站Blast序列对比分析发现，在SUFUmRNAisoforml（NM_016169．3）的第10外显子和第11外显子之间插入了一个长为126bp的新外显子。通过对SWl990细胞的验证，包含新外显子的完整的新剪接体片段长约1400bp。转染nSUFU的SWl990细胞强表达nSUFU蛋白，胰腺癌组织既表达SUFU蛋白，又表达nSUFU蛋白。结论人类胰腺癌组织和细胞中存在一种新的可以编码SUFU蛋白的剪接体。
- 徐清满晓华高军李兆申龚燕芳吴红玉金晶
- 关键词：胰腺肿瘤HEDGEHOG信号通路剪接体SUFU
- Hippo-YAP信号通路活化参与二甲双胍抑制胰腺癌细胞生长的作用被引量：5
- 2016年
- 目的观察二甲双胍对人胰腺癌PANC1细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响，探讨其与Hippo-YAP信号通路活化的关系。方法应用5、10、20、40 mmol/L的二甲双胍分别处理人胰腺癌PANC1细胞24、48、60、72 h，以不加二甲双胍处理的细胞作为对照。采用CCK-8法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡，实时荧光定量PCR法检测细胞YAP mRNA表达，蛋白质印迹法检测细胞YAP1、磷酸化YAP1（p-YAP1）蛋白表达。结果二甲双胍呈剂量依赖性抑制PANC1细胞的增殖，各组间差异均有统计学意义（P值均〈0.01）。二甲双胍抑制PANC1细胞增殖的IC50值为20 mmol/L。用20 mmol/L二甲双胍处理细胞48 h后细胞的G1期、S期细胞百分比及YAP1 mRNA表达量、p-YAP1蛋白表达量分别为（77.12±1.22）%、（9.13±0.73）%、4.17±0.37、0.67±0.01；对照组分别为（60.75±1.53）%、（26.97±1.18）%、1.03±0.11、0.17±0.01，两组间的差异均有统计学意义（P值均〈0.01）。对照组与二甲双胍处理组细胞的凋亡率分别为（5.65±1.19）%、（9.83±1.36）%，YAP1蛋白表达量分别为0.42±0.00、0.41±0.00，两组的差异均无统计学意义（P值均﹥0.05）。结论二甲双胍可显著抑制人胰腺癌PANC1细胞的增殖，使细胞周期阻滞在G0/G1期，其机制可能与Hippo-YAP信号通路活化有关。
- 李映璇高绥之苏松徐茂锦高军诸娴金晶吴洪玉
- 关键词：胰腺肿瘤二甲双胍信号通路
- 炎性因子对人胰腺癌PaTu8988细胞NF-KB及Hedgehog通路成员表达的影响被引量：5
- 2015年
- 目的探讨肿瘤坏死因子仅（TNF-α）和白介素lp（IL-1β）对人胰腺癌PaTu8988细胞核因子KB（NF-KB）及Hedgehog（HH）通路成员Shh、SMO、Glil、SuFu基因表达的影响。方法分别应用TNF-α和IL-1β刺激人胰腺癌PaTu8988细胞48h，以未处理细胞作为对照组。采用实时定量RT-PER和蛋白质印迹法检测各组细胞NF-KB及Shh、SMO、Glil、SuFu的mRNA和蛋白表达，采用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡。结果TNF-α刺激组、IL-18刺激组、对照组PaTu8988细胞的NF-KBmRNA表达量分另0为9．92±0．78、7．74±0．32、1．01±0．08；GlilmRNA为7．25±0．45、5．74±0．33、1．00±0．06；ShhmRNA为3．60±0．36、4．33±0．45、1．00±0．04；SMOmRNA为1．03±0．15、1．07±0．16、1．01±0．06；SuFumRNA为0．88±0．14、0．96±0．13、1．01±0．05。其中TNF-α刺激组、IL-1β刺激组的NF-KB、Glil、ShhmRNA表达量均较对照组显著增加，差异有统计学意义（P值〈0．05或〈0．01）。两刺激组的NF-KB、Glil、Shh蛋白表达量也较对照组增高，差异具有统计学意义（P值均〈0．05）。TNF-α刺激组、IL-1β刺激组、对照组PaTu8988细胞凋亡率分别为（17．40±2．87）％、（11．05±1．34）％、（49．90±2．96）％，TNF-α刺激组、IL-1β刺激组的细胞凋亡率均较对照组显著减少，差异有统计学意义（P值均〈0．01）。结论TNF-α和IL-1β可激活PaTu8988细胞的NF-KB和HH信号通路的Shh、Glil基因的表达，减少细胞的凋亡。
- 王玉琼丁佳寅诸娴吴红玉金晶满晓华高军李兆申
- 关键词：胰腺肿瘤信号传导NF-KB
- 胰腺癌中Hedgehog通路与其他通路间相互作用的研究进展被引量：2
- 2015年
- Hedgehog(HH)通路不仅在胰腺发育过程中起重要作用,而且在胰腺导管细胞癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)发生、发展过程中也出现异常活化。其转录因子Glis蛋白家族的活化,尤其是Gli1的活化可启动下游基因表达,主要起到促进癌细胞增殖、迁移、侵袭等作用。HH通路可以和包括核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、K-RAS、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、Wnt通路、转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)、丝裂原活化蛋白激酶3K10(mitogen-activated protein kinase kinase kinase 10,MAP3K10)和P53等在内的信号通路因子,通过不尽相同的机制相互作用,共同促进胰腺癌的发生和发展。本文就近年来对胰腺癌中的Hedgehog通路及其与其他通路相互作用的研究进展进行综述。
- 王玉琼高军李兆申
- 关键词：胰腺癌HEDGEHOG通路
- 胰腺癌免疫治疗进展
- 2017年
- 胰腺癌是一种预后极差的恶性肿瘤，每年全球有超过20万人死于该病，5年生存率仅为5％。免疫疗法能唤起胰腺癌患者机体的抗肿瘤免疫反应，起到治疗的效果，很有可能成为治疗胰腺癌的最佳手段。本文对胰腺癌的免疫调节剂治疗、疫苗治疗和过继免疫治疗的进展进行综述。
- 高军李平杨柳青王凯旋史军李兆申
- 关键词：过继免疫治疗胰腺癌患者抗肿瘤免疫反应免疫调节剂疫苗治疗
