国家自然科学基金(30772373)
- 作品数：9 被引量：27H指数：2
- 相关作者：康前雁李雪颖杜青卫杨林声王理论更多>>
- 相关机构：西安交通大学医学院第一附属医院西安交通大学延安大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省社会发展科技攻关项目西安市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 急性视网膜缺血再灌注损伤后大鼠视网膜副凋亡和自噬的发生被引量：6
- 2018年
- 目的探讨大鼠急性视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)后不同时间点视网膜中副凋亡及自噬的发生。方法将30只健康成年SD雄性大鼠随机分为RIRI组及正常对照组。利用高眼压前房灌注法建立SD大鼠急性RIRI动物模型。正常对照组不做任何处理。急性RIRI后1 d、3 d、7 d、28 d各时间点取各组大鼠的视网膜组织,利用透射电子显微镜(transmission electron microscopy,TEM)检测视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)副凋亡及自噬的发生;利用免疫荧光染色法检测视网膜微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)的表达。结果急性RIRI后1 d持续至28 d,TEM可见RGCs细胞质空泡数量较正常对照组增高。急性RIRI后1 d持续至28 d,TEM可见RGCs细胞质中自噬体数量增加。正常对照组RGCs的细胞质中自噬体每50μm2平均为0.79个,急性RIRI后7 d自噬体的平均数量达到高峰,每50μm2平均为2.29个,与正常对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光法检测发现,与正常对照组相比,急性RIRI后1 d开始,RGCs的细胞质中LC3表达增加,并在整个实验期间持续高表达,正常对照组RGCs层的LC3阳性细胞百分比为15.90%,急性RIRI后1 d、28 d时LC3阳性细胞百分比分别为46.95%和52.30%,与正常对照组相比差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。结论急性RIRI后RGCs涉及副凋亡和自噬的激活,各种类型的程序性细胞死亡可作为单一细胞死亡的形式或多种细胞死亡形式共存,参与急性RIRI视网膜损伤。
- 魏婷高珊程翘楚崔丽珺康前雁
- 关键词：自噬视网膜缺血再灌注损伤视网膜神经节细胞
- 视网膜缺血再灌注损伤后视网膜神经节细胞pax6的表达变化与意义被引量：1
- 2012年
- 目的探索视网膜缺血再灌注损伤后视网膜神经节细胞pax6的表达变化及意义。设计实验研究。研究对象缺血再灌注损伤大鼠视网膜。方法成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠30只,随机选取5只作为空白对照组,其余25只为视网膜缺血再灌注损伤组,采用升高右眼眼压的方法制作视网膜缺血再灌注损伤模型。视网膜缺血再灌注后1、2、4、6、8周分5组,每组5只,不同时间点取右眼行免疫荧光染色,观察视网膜神经节细胞中pax6表达情况。主要指标pax6的表达。结果视网膜缺血再灌注损伤后随着时间推移视网膜各层逐渐出现pax6表达阳性的细胞,对照组视网膜神经节细胞pax6表达阳性率为(1.28±1.41)%,损伤后1、2、4、6、8周分别为(0.99±1.23)%、(14.45±2.72)%、(50.88±4.73)%、(71.00±4.72)%、(78.80±4.62)%(F=1.350,P<0.0001)。各组与对照组两两比较,缺血后1周视网膜神经节细胞pax6表达阳性率差异无统计学意义(P=0.835),缺血再灌注损伤2、4、6、8周视网膜神经节细胞pax6表达阳性率均明显升高(P均<0.0001)。结论视网膜缺血再灌注损伤后视网膜各层均出现pax6表达阳性细胞,视网膜缺血再灌注损伤能诱导视网膜内源性干细胞激活。
- 李雪颖康前雁
- 关键词：视网膜缺血再灌注损伤PAX6干细胞
- 大鼠视网膜缺血-再灌注损伤后视觉传导通路中神经丝蛋白200的表达
- 2013年
- 背景神经丝蛋白200（NF200）是特异性分布于神经元轴突内，维持神经元形态、反映其功能、检测轴突再生状况的一个间接指标。NF200是否参与了视网膜缺血-再灌注损伤（RIRI）后整个视觉传导通路的异常变化有待进一步研究。目的研究RIRI后各时间点大鼠视觉传导通路中视网膜、外侧膝状体、上丘脑及视皮质等部位NF200的表达。方法应用随机数字表法将40只SD大鼠随机分为RIRI1、2、3、4、6、8周组，伪手术组和正常对照组，每组5只大鼠。RIRI组采用前房灌注生理盐水法制作RIRI模型，以右眼为损伤眼；伪手术组仅行前房穿刺而不灌注生理盐水。于RIRI后1、2、3、4、6、8周处死大鼠，摘除大鼠眼球，并取外侧膝状体、上丘脑及视皮质组织制备冰冻切片，采用免疫组织化学法检测NF200在上述大鼠各部位神经元及轴突中的表达。结果大鼠RIRI1、2、3、4、6、8周组、伪手术组和正常对照组损伤眼视网膜神经节细胞（RGCs）层NF200的表达量（A值）总体比较差异有统计学意义（F=78．855，P=0．000），其中RIRI1周组NF200表达较正常对照组明显减少，差异有统计学意义（t=36．563，P〈0．01）。RIRI1周后可见损伤眼对侧外侧膝状体NF200的表达较正常对照组明显减少，差异有统计学意义（t=6．483，P〈0．01），而损伤4周、6周后对侧外侧膝状体NF200的表达较正常对照组明显增加，差异有统计学意义（t=2．904、4．313，P〈0．01）。RIRI1周可见损伤眼对侧上丘脑NF200的表达较正常对照组明显减少，差异有统计学意义（t=2．966，P〈0．05），2周对侧上丘脑NF200的表达较正常对照组明显增加，差异有统计学意义（t=7．397，P〈0．01）。RIRI2、3、4周后双侧视皮质NF200的表达较正常对照组明显增加，差异均有统计学意义（对侧：t=18．728、18．213、15．088，P〈0．01；同侧：t=8．690、5．704、
- 魏婷康前雁李雪颖
- 关键词：视网膜缺血-再灌注损伤
- 缺氧培养下大鼠视网膜祖细胞与脑神经干细胞内钙离子浓度差异的研究（英文）
- 2013年
- 目的:比较缺氧培养条件下新生大鼠视网膜祖细胞(retinal progenitor cells,RPCs)与脑神经干细胞(neural stemcells,NSCs)钙离子浓度的差异。方法:分离新生大鼠RPCs及大脑皮质NSCs,进行无血清体外培养;采用荧光免疫细胞化学的方法进行干细胞鉴定;缺氧培养后,光镜观察细胞形态,采用钙离子荧光探针结合激光共聚焦显微镜测定细胞内钙离子荧光强度。结果:缺氧培养后,大脑皮质NSCs较早出现肿胀、伸出突起等变化,随缺氧时间延长,两种细胞内钙离子荧光强度逐渐增强,缺氧12h后RPCs内钙离子荧光强度小于脑皮质NSCs(P<0.05),差异具有统计学意义。结论:缺氧培养12hRPCs内钙离子浓度低于大脑皮质NSCs。
- 高珊康前雁李雪颖罗禹
- 关键词：脑神经干细胞缺氧钙离子浓度
- miR-204通过下调Bcl-2表达抑制人视网膜母细胞瘤细胞生长被引量：2
- 2016年
- 目的:探讨miR-204在人视网膜母细胞瘤中的表达、临床意义及其分子机制。方法:实时定量PCR检测miR-204在视网膜母细胞瘤及瘤旁组织中的表达并分析其与临床病理特征的关系。检测miR-204在视网膜母细胞瘤细胞系中的表达,并用miR-204模拟物转染Y79细胞,MTT及流式细胞仪检测Y79细胞的增殖、凋亡情况,RT-PCR、Western blot法检测Bcl-2 mRNA、蛋白的表达。结果:miR-204在视网膜母细胞瘤组织中的表达水平显著低于对应瘤旁组织。miR-204低表达与神经浸润、分化程度密切相关。miR-204可显著抑制Y79细胞的增殖并促进其凋亡,下调Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平。结论:miR-204在人视网膜母细胞瘤组织中表达下调,并与临床病理相关,miR-204抑制Y79细胞增殖、促进凋亡的作用可能与下调Bcl-2有关。
- 杨林声王理论杜青卫
- 关键词：视网膜母细胞瘤增殖凋亡BCL-2
- 辛伐他汀延缓大鼠视网膜衰老的作用和机制被引量：1
- 2017年
- 目的:研究辛伐他汀延缓大鼠生理性视网膜衰老的作用和可能机制。方法:3月龄健康无眼疾SD大鼠40只,按随机数字表法将大鼠分为辛伐他汀组和对照组,每组20只。在相同条件下饲养至9月龄后开始给予干预,辛伐他汀组大鼠用5mg/(kg·d)辛伐他汀灌胃,对照组大鼠用等容量生理盐水灌胃,均饲养至17月龄。采用HE染色检测两组大鼠视网膜厚度;采用免疫组织化学染色检测视网膜神经感觉层和色素上皮层氧化应激相关蛋白Cu-Zn-SOD、NOX2和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:视网膜HE染色显示:与对照组相比,辛伐他汀组神经感觉层排列整齐,细胞形态差异不大,细胞未见明显丢失,色素上皮层结构紧密;神经感觉层及色素上皮层的厚度增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学结果显示:与对照组相比,辛伐他汀组超氧化物歧化酶Cu-Zn-SOD的表达增强,过氧化物酶NOX2的表达减弱;凋亡相关蛋白Bcl-2的表达减弱,Bax的表达增强,Bcl-2/Bax的比值较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:辛伐他汀可通过减轻氧化应激反应、增加细胞凋亡等机制延缓生理性大鼠视网膜的衰老。
- 朱江施叶雯康前雁
- 关键词：辛伐他汀氧化应激凋亡衰老
- 糖尿病患者血清VEGF浓度与糖化血红蛋白及糖尿病病程相关性研究被引量：13
- 2010年
- 目的:探讨糖尿病患者血清VEGF浓度变化与糖尿病患者糖化血红蛋白及糖尿病病程的关系。方法:符合本研究条件的糖尿病患者86例,采用双抗体夹心ELISA法检测血清VEGF浓度,HbA1c色谱分光光度计法测定糖化血红蛋白(HbA1c)水平,血糖(BS)取末梢指血检测空腹血糖(FBS)、餐后2h血糖(P2BS),记录糖尿病病程。结果:血清VEGF浓度与HbA1c和病程呈正相关性且具有显著性统计学意义(P<0.01),与空腹血糖、餐后2h血糖相关性无统计学意义。结论:糖尿病患者血清VEGF浓度与HbA1c和病程呈正相关性。
- 康前雁杨玉张秀丽李雪颖
- 关键词：糖尿病血清VEGF糖尿病病程
- 大鼠急性高眼压后视网膜神经节细胞自噬和副凋亡的发生被引量：2
- 2018年
- 目的:观察急性高眼压后不同时间点大鼠视网膜神经节细胞中自噬及副凋亡的发生,并探讨其机制。方法:将50只健康成年SD雄性大鼠随机分为正常对照组、急性IOP损伤3d,1、4、8wk组。利用高眼压(elevated intraocular pressure,IOP)前房灌注法建立SD大鼠急性IOP损伤模型,取各组大鼠的视网膜组织,采用免疫荧光染色法检测视网膜微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)的表达;利用透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)检测视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)细胞质中自噬体及胞质空泡的产生,验证自噬及副凋亡的发生。结果:透射电镜观察可见大鼠RGCs细胞质中包裹着电子致密物的双层或多层膜的自噬泡,正常对照组、急性IOP损伤后3d,1、4、8wk组,RGCs细胞质中每50μm^2自噬泡数量分别为0.79±0.43、2.14±0.36、2.29±0.47、1.57±0.51、1.21±0.43个,急性IOP损伤后各组大鼠RGCs内每50μm^2自噬泡数量均较正常对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。正常对照组视网膜神经节细胞层(ganglion cell layer,GCL)仅见少量LC3阳性表达,LC3阳性细胞百分比15.90%。急性IOP损伤后3d,1、4、8wk组大鼠GCL中LC3阳性细胞百分比均较正常对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。急性IOP损伤后3d,1、4、8wk组大鼠每200μm内RGCs数量较正常对照组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。急性IOP后3d持续至8wk透射电镜观察可见大量由线粒体和/或内质网肿胀形成的细胞质空泡。结论:急性IOP损伤后RGCs涉及自噬和副凋亡的激活,各种类型的程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD)可作为单一细胞死亡的形式或多种细胞死亡形式共存,参与急性IOP后视网膜神经节细胞的损伤。
- 魏婷高珊马波高宁康前雁
- 关键词：自噬急性高眼压视网膜神经节细胞
- miR-218通过下调Bmi-1表达抑制人视网膜母细胞瘤细胞生长被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨miR-218在人视网膜母细胞瘤中的表达、临床意义及其分子机制。方法:实时定量PCR检测miR-218在视网膜母细胞瘤及瘤旁组织中的表达,并分析其与临床病理特征的关系。检测miR-218在视网膜母细胞瘤细胞系中的表达,并用miR-218模拟物转染Y79细胞,MTT及流式细胞仪检测Y79细胞的增殖、凋亡情况,RT-PCR和Western-blot法检测Bmi-1 mRNA及蛋白的表达。结果:miR-218在视网膜母细胞瘤组织中的表达水平显著低于对应瘤旁组织;miR-218低表达与神经浸润、分化程度密切相关;miR-218可显著抑制Y79细胞的增殖并促进其凋亡,并下调Bmi-1的mRNA及蛋白表达水平。结论:miR-218在人视网膜母细胞瘤组织中表达下调,并与临床病理相关,miR-218抑制Y79细胞增殖、促进凋亡的作用可能与下调Bmi-1有关。
- 杨林声王理论杜青卫
- 关键词：MIR-218视网膜母细胞瘤增殖凋亡BMI-1
