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国家重点基础研究发展计划(2005CB523005): 作品数：22 被引量：84H指数：5; 相关作者：高玉伟杨松涛夏咸柱侯小强陈化兰更多>>; 相关机构：军事医学科学院吉林大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>

Anti-tumor Immune Response Mediated by Newcastle Disease Virus HN Gene被引量：1: 2011年; Hemagglutinin-neuramidinase(HN) is one of the most important surface structure proteins of the Newcastle disease virus(NDV). HN not only mediates receptor recognition but also possesses neuraminidase(NA) activity, which gives it the ability to cleave a component of those receptors, NAcneu. Previous studies have demonstrated that HN has interesting anti-neoplastic and immune-stimulating properties in mammalian species, including humans. To explore the application of the HN gene in cancer gene therapy, we constructed a Lewis lung carcinoma(LLC) solid tumor model using C57BL/6 mice. Mice were injected intratumorally with the recombinant adenovirus expressing HN gene(Ad-HN), and the effect of HN was explored by natural killer cell activity assay, cytotoxic lymphocyte activity assay, T cell subtype evaluation, and Th1/Th2 cytokines analysis. The results demonstrate that HN not only can elicit clonal expansion of both CD4+ and CD8+ T cell populations and cytotoxic T lymphocyte(CTL) and killer cell response, but also skews the immune response toward Th1. Thus, vaccination with Ad-HN may be a potential strategy for cancer gene therapy.; PENG Li-pingLI XiaoSUN Li-liWEN Zhong-meiLIU YanGAO PengHUANG Hai-yanPIAO Bing-guoJIN JingJ1N Ning-yi; 关键词：细胞免疫反应基因介导细胞毒性T淋巴细胞肿瘤基因治疗

H1N2亚型猪流感病毒A/Swine/Guangdong/1/06分离鉴定和对猪致病性研究被引量：3: 2009年; 2006年5月从广东某大型猪场采集具有流感症状保育猪鼻拭子共98份,无菌常规处理猪鼻拭子后接种MDCK细胞,分离到4株流感病毒。用血凝抑制和PCR方法鉴定均为H1N2亚型。挑选其中一株A/Swine/Guangdong/1/06(H1N2),进行全基因组测序,并与GenBank中相关序列进行比较。核苷酸同源性分析表明:A/Swine/Guangdong/1/06(H1N2)与A/Swine/Guangxi/13/06不同基因之间同源性为96.6%～98.1%。以106EID50的剂量,将H1N2病毒鼻腔感染35日龄仔猪,结果表明H1N2亚型流感病毒可以感染猪上呼吸道,但不表现临床症状。本研究结果对于揭示H1N2亚型猪流感流行规律和病毒的致病机理具有一定的意义。; 许传田樊树芳杨焕良乔传玲陈艳辛晓光陈化兰

H5N1禽流感病毒感染孕鼠的研究: 2009年; 目的用H5N1禽流感病毒感染昆明孕鼠,检测病毒在感染孕鼠各组织脏器中的复制及分布情况,并证明病毒能否通过孕鼠的胎盘垂直传染给胎鼠。方法用虎源H5N1亚型禽流感病毒滴鼻感染妊娠10-12 d的昆明孕鼠,观察孕鼠感染后的临床症状。接种病毒后第3、4、5、6和7 d分别处死3只孕鼠,取孕鼠的肺、脑、脾、肾、子宫、胎盘及胎鼠,利用RT-PCR、Real-time PCR和病毒分离方法检测各组织中的病毒核酸和病毒滴度,并进行病理组织学与免疫组织化学检测。结果昆明孕鼠接种病毒后第3 d,即可在肺、脑、脾、肾、子宫及胎盘组织中检测出H5N1禽流感病毒核酸,并从子宫、胎盘分离出H5N1禽流感病毒;感染后第6 d,从胎鼠体内检测到病毒核酸并分离出H5N1禽流感病毒。结论H5N1亚型禽流感病毒可以感染孕鼠,在孕鼠子宫和胎盘复制,感染后期可通过胎盘屏障传给胎鼠。; 侯小强高玉伟王承宇杨松涛王铁成夏咸柱; 关键词：H5N1禽流感病毒胎鼠

不同H5N1亚型禽流感病毒在豚鼠体内的复制和传播能力评估被引量：3: 2010年; 本研究以豚鼠作为哺乳动物模型,评价了6株H5N1亚型禽流感病毒(AIV)的复制和水平传播能力。经滴鼻接种后,检测到6株病毒中有5株病毒在豚鼠上呼吸道和下呼吸道复制,病毒滴度为0.8LogEID50/mL～3.5LogEID50/mL(或g),豚鼠在感染后第2d至第10d可排出病毒。另外一株病毒A/duck/GX/22/02则仅能在豚鼠的下呼吸道低水平复制。在传播实验中,6株病毒中只有A/duck/GX/35/01能够在豚鼠间水平传播。上述研究结果表明,豚鼠适用于作为高致病性AIV哺乳动物水平传播的模型,而且H5N1亚型AIV在哺乳动物间的水平传播能力不同。本研究为进一步研究AIV在哺乳动物间水平传播的分子机制奠定了良好的基础。; 张莹高玉伟邓国华姜永萍樊树芳钟功勋关云涛陈化兰; 关键词：禽流感病毒 H5N1亚型

新型乳糖苯氮芥衍生物抑制肝癌细胞活性的研究被引量：2: 2008年; 利用乙酰基保护的乳糖三氯乙酰亚胺酯作为糖基的供体,对硝基苯酚作为糖基的受体,合成了一种新型的乳糖苯氮芥衍生物,采用MTT、流式细胞术分析法探讨了其对肝癌7721细胞的生长抑制及其诱导凋亡的作用机制.结果表明,新合成的乳糖苯氮芥衍生物对正常细胞毒性较小,对7721细胞有明显的细胞毒性,能明显抑制肝癌细胞的生长;同时通过流式细胞术显示,诱导细胞凋亡是其抗肿瘤作用的主要机制之一.; 刘铁梅李密阳李殿秋张丽萍吴燕华谢风; 关键词：靶向性治疗氮芥

荧光定量RT-PCR方法检测感染小鼠不同组织中的H5N1禽流感病毒被引量：5: 2008年; 目的测定H5N1禽流感病毒感染小鼠各脏器组织中的病毒核酸含量,了解病毒复制与疾病进程的关系,为H5N1禽流感病毒致病机理与防治研究提供技术支持。方法利用建立的荧光定量RT-PCR法对H5N1禽流感病毒感染BALB/c小鼠的不同脏器组织中病毒核酸进行定量检测,观察H5N1禽流感病毒在不同组织中的复制情况。结果利用荧光定量RT-PCR法可从H5N1禽流感病毒感染小鼠后第3d的肺脏、脑、脾脏、肾脏和肝脏组织中检测到不同含量的病毒核酸;而在感染后4d的肺脏、脑和脾脏等组织中的病毒核酸含量开始下降;在感染后第6d,H5N1禽流感病毒核酸在肺脏和脑组织中大量存在外,其余组织中均有少量病毒核酸。结论H5N1流感病毒感染小鼠肺脏和脑组织中病毒核酸含量较高,说明病毒主要在小鼠的肺脏和脑组织中复制。由于荧光定量RT-PCR法可对感染小鼠不同脏器组织中的病毒核酸进行准确定量,可为H5N1禽流感病毒所致疾病的早期诊断、流行病学和致病机理研究提供技术支持。; 侯小强高玉伟夏咸柱王承宇杨松涛; 关键词：H5N1禽流感病毒病毒复制荧光定量RT-PCR

H5N1亚型禽流感病毒对鸭的致病性研究被引量：5: 2010年; 为评估H5N1亚型禽流感病毒(AIV)在实验室环境下对鸭的致病力,本研究以无特殊病原(SPF)鸭为模型,对我国近年分离的7株病毒进行了致病力分析。结果发现其中4株病毒对鸭致死率为100%,2株病毒对鸭的致死率分别为60%和80%,另外1株病毒,A/goose/Hubei/51/05(GS/HB/51/05),对鸭无致病力。本研究还发现,与高致病力毒株一样,GS/HB/51/05也可在鸭体内呈全身性复制,并且可通过喉头和泻殖腔向外排泄。我们推测GS/HB/51/05可能是中国南方出现的其他对鸭呈高致病力的H5N1病毒的祖先,对这些病毒的系统研究,可揭示H5N1亚型AIV对鸭的致病力遗传机制。; 许静宋家升苏胜杰李雁冰施建忠陈化兰; 关键词：禽流感病毒 H5N1亚型

长春地区人与猪戊型肝炎病毒分子流行病学及部分基因序列分析被引量：12: 2006年; 目的分析长春地区猪和人群流行的戊型肝炎病毒的系统进化关系。方法参照文献设计引物．对长春地区猪和人群流行的8株HEV（其中3株来源于人，5株来源于猪）进行RT-PCR，并将RT-PCR产物克隆到PMD18-T载体。筛选阳性重组质粒测序，测序结果采用Clustal X v．1．8进行多重比对分析，并与基因1～4型HEV代表株的核苷酸及氨基酸进行同源性比较。绘制遗传进化树。结果本研究获得的8株HEV核苷酸同源性在91．2％～99．1％。推导氨基酸同源性在97．4％～100％之间；基因1～4型内各株序列间同源性分别为：87．9％～100％,100％，85．9％～96．6％。84．8％～100％。结论研究表明获得的长春各株病毒均属基因4型。由进化关系看长春地区猪HEV与人HEV可能由同一毒株进化而来。; 孙中锋金宁一朱光泽屈勇刚李红文金扩世田明尧; 关键词：戊型肝炎病毒系统进化分析同源性

小鼠细胞因子实时定量PCR检测方法的建立及应用被引量：3: 2009年; 采用荧光SYBR GreenⅠ建立小鼠细胞因子mRNA实时定量PCR的检测方法；并利用建立的实时定量PCR的检测方法对感染H5N1禽流感病毒的BALB／c小鼠不同时间采集的肺脏组织中几种重要致炎细胞因子及趋化因子mRNA表达水平进行了检测。对H5N1禽流感病毒感染的BALB／c小鼠肺脏细胞因子的检测具有高度的特异性，检测的灵敏度为10^1～10^2拷贝数。H5N1禽流感病毒感染BALB／c小鼠后，小鼠肺脏中IL-1β、IL-6、TNFα、MIG、IP-10、RANTES、MIF和HMGB1细胞因子mRNA表达水平与对照组小鼠相比均有明显差异。建立的实时定量PCR能在基因转录水平敏感和特异地反应细胞因子的表达水平，该技术在基础和临床免疫研究中，具有良好的应用价值。; 张亮亮侯小强高玉伟杨松涛夏咸柱张敏; 关键词：小鼠细胞因子实时定量PCR

我国部分地区鹿、牛群中戊型肝炎病毒血清流行病学调查被引量：7: 2006年; 目的调查我国部分地区鹿和牛群戊型肝炎病毒(HEV)感染情况。方法采集我国某地区13个鹿场780份鹿血,2个散养鹿群18份血和长春地区牛血80份,分离血清。应用抗HEV抗体酶联免疫试剂盒(双抗原夹心法)对血清样品进行抗HEV抗体检测。用χ2检验分析不同养殖场鹿血清HEV抗体水平。结果798份鹿血清抗HEV抗体阳性率为43.61%。13个集约化养殖鹿场中有5个鹿场的血清样品抗体呈阳性,阳性率分别为48.02%、47.25%、60.69%、41.94%、40.91%;其余8个鹿场的血清样品均为阴性。两个散养鹿群的抗体阳性率分别为40.00%和46.15%。80份牛血清样品的抗体阳性率为20%。结论我国鹿群尤其是散养鹿群普遍存在HEV感染。牛群也存在较高的HEV感染率。; 李红文金宁一屈勇刚朱光泽孙中锋王全凯; 关键词：戊型肝炎病毒血清流行病学

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