广西壮族自治区科学研究与技术开发计划(11107008-3)
- 作品数：8 被引量：27H指数：3
- 相关作者：韦宇拓杜丽琴滕昆牛福星黄日波更多>>
- 相关机构：广西大学广西科学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西研究生教育创新计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 一株新型产淀粉酶中度嗜热菌的分离鉴定及酶学性质研究
- 2011年
- 用稀释分离法从广西象州温泉筛选分离到一株可水解淀粉的中度嗜热细菌GXS1,该菌株革兰氏染色为阳性,端生芽孢,细胞呈杆状,最适生长温度为60℃～65℃,最适生长pH为6.0～7.0。结合生理生化特征和16S rDNA序列分析,初步鉴定该菌株为Geobacillus sp.GXS1。对该菌所产高温淀粉酶的性质研究表明:酶的最适反应温度为80℃,在40℃～60℃范围内稳定,70℃保温30 min仍保留77%残余酶活,最适pH为7.0,稳定pH范围为4.0～10.0。产物经HPLC分析证明,该酶能水解淀粉产生麦芽三糖、麦芽糖和葡萄糖的混合物,对α-环糊精、β-环糊精不起作用。
- 王治宾薛蓓杜丽琴庞宗文黄日波韦宇拓
- 关键词：嗜热菌GEOBACILLUS酶学性质
- 绿色糖单孢菌高产麦芽糖α-淀粉酶基因的克隆表达及酶学性质被引量：2
- 2013年
- 为开发新型淀粉酶,鉴定了来自绿色糖单孢菌(Saccharomonospora viridis)在Genbank中注释为糖苷酶(Glycosidase)的一个ORF,研究表明该ORF编码一种α-淀粉酶.重组酶酶学性质的研究表明以可溶性淀粉为底物反应的最适pH为6.6,在pH 5.6-8.6有80%以上的相对活力,最适温度为60℃,比活力为319.49 U/mg.它与可溶性淀粉、六糖、五糖、四糖、三糖反应,经HPLC检测产物均为麦芽三糖、麦芽糖和葡萄糖的混合物.重组酶与20%的可溶性淀粉反应,产物含有高达67.15%的麦芽糖,还原糖的转化率约为75%,加入普鲁兰酶后,麦芽糖含量增加到69.7%,还原糖转化率约为91%,不能与麦芽糖、α-环糊精、β-环糊精和普鲁兰糖反应.
- 汪小波李美蓉李雪黄坚丽黄英杜丽琴黄日波韦宇拓
- 关键词：Α-淀粉酶克隆表达麦芽糖酶学性质
- 枯草芽孢杆菌突变株IA857高效转化方法的研究被引量：1
- 2014年
- 【目的】研究比较枯草芽孢杆菌突变株IA857高效转化的最优方法。【方法】以质粒pHCMC04(大小为8089bp)转化突变型枯草芽孢杆菌IA857,分别用电转化法、原生质体法、电击法诱导的原生质体法、Spizizen低盐环境感受态转化法(简称S法)、低盐环境形成饥饿感受态法及其改良方案在其它突变菌株的试验方法(简称C法)进行实验,通过比较优化得出最优转化方法。【结果】采用S法转化枯草芽孢杆菌突变株IA857,质粒加入量为70ng时,转化后直接摇床培养1h转化率最高达到1.2×104 CFU/μg DNA,可以满足枯草芽孢杆菌高效转化的要求。【结论】得出了枯草芽孢杆菌突变株IA857最优转化方法并提出转化枯草芽孢杆菌的基本框架。
- 牛福星于晶晶汤宏赤刘金平滕昆韦宇拓
- 关键词：枯草芽孢杆菌电击法感受态
- 嗜盐淀粉酶产生菌的筛选鉴定及其酶学性质研究被引量：2
- 2014年
- [目的]筛选分离新的嗜盐淀粉酶产生菌，并对其进行酶学性质研究。[方法]从广西大学奶牛厂的奶牛粪便土壤中分离得到一株能产耐盐淀粉酶的菌株，利用16S rRNA 序列对比进行鉴定，经破胞提取胞内总蛋白测定嗜盐淀粉酶酶学性质。[结果]经16S rRNA 初步鉴定该菌株为阴沟肠杆菌属（Enterobacter cloacae ）。该菌株是非嗜盐菌株，却能产生一种胞内嗜盐淀粉酶。酶学性质研究表明该酶在 NaCl 终浓度为4mol/L 时，酶活力最强，当盐浓度为5．5mol/L 时，仍能保持最高酶活的60％；以 MOPS-NaCl 配制的1％可溶性淀粉溶液为底物时，其最适反应温度为50℃，最适 pH 值为6．5，pH 值在4．5～8．5时均能保持60％以上的相对活力；在35～45℃的温度范围内显示较好的稳定性，相对酶活保持在80％以上，但当温度达到50℃时，酶活力急剧下降；Ca2＋浓度对酶活力几乎没有影响；EDTA 浓度在10～140mmol/L 时酶活力变化不大，大于140mmol/L 之后，酶活力逐渐下降。[结论]该菌株是在非嗜盐菌株中发现的具有嗜盐淀粉酶基因的菌株，其嗜盐淀粉酶在高盐环境下具有很高的酶活力。
- 覃晓丽李剑龙吴昊杜丽琴韦宇拓
- 关键词：阴沟肠杆菌酶学性质
- 蜡样芽胞杆菌GXBC-3三个普鲁兰酶基因的表达及其酶学特性被引量：4
- 2012年
- 探索获得优良的新型普鲁兰酶基因,丰富普鲁兰酶理论,对实现普鲁兰酶国产化具有重要意义。分析GenBank数据库中蜡样芽胞杆菌假定Ⅰ型、Ⅱ型普鲁兰酶基因序列,从实验室保藏的蜡样芽胞杆菌Bacilluscereus GXBC-3中克隆得到3个普鲁兰酶基因pulA、pulB、pulC,并分别导入大肠杆菌进行胞内诱导表达。纯化重组酶酶学性质研究表明重组酶PulA能水解α-l,6-和α-l,4-糖苷键,为Ⅱ型普鲁兰酶,以普鲁兰糖为底物时,最适反应温度及pH分别为40℃和6.5,比活力为32.89 U/mg;以可溶性淀粉为底物时,最适反应温度及pH分别为50℃和7.0,比活力为25.71 U/mg。重组酶PulB和PulC二者均只能水解α-l,6-糖苷键,为I型普鲁兰酶,以普鲁兰糖为底物时,其最适反应温度及pH分别为45℃、7.0和45℃、6.5,比活力分别为228.54 U/mg和229.65 U/mg。
- 李美蓉汪小波黄英黄坚丽梁甲元黄日波杜丽琴韦宇拓
- 关键词：普鲁兰酶克隆表达酶学特性
- 地衣芽胞杆菌麦芽糖α-淀粉酶产麦芽糖特性研究
- 2013年
- 为了开发新的生产麦芽糖浆的淀粉酶,在大肠杆菌中表达了一个地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)麦芽糖α-淀粉酶,并对该酶产麦芽糖的特性进行研究。结果显示,重组酶分子大小为65kDa,以淀粉为底物的最适温度为45℃,最适pH值为6.5。以浓度为20%的可溶性淀粉为底物,加入106U/g淀粉的地衣芽胞杆菌麦芽糖α-淀粉酶,反应48h,采用HPLC检测产物,产物中只有葡萄糖和麦芽糖,其中麦芽糖含量为52.21%,还原糖得率为72.1%;当加入1U/g淀粉的普鲁兰酶协同作用进行反应时,产物中麦芽糖的含量增加到57.16%,还原糖得率增加到92.5%。该酶在麦芽糖浆的工业生产上有较大的潜在应用价值。
- 刘金平于晶晶牛福星滕昆覃晓丽韦宇拓
- 关键词：麦芽糖克隆表达
- 脂肪酶活力测定中终止反应方法的比较分析被引量：7
- 2014年
- 【目的】寻找一种准确有效的脂肪酶活力测定中的终止反应方法,以进行脂肪酶酶学性质研究。【方法】比较分析前人研究脂肪酶常用的终止方法(无水乙醇法、EDTA法、三氯乙酸法、碳酸钠法、沸水浴法)对酶活力的抑制效果和吸光值的稳定性。【结果】无水乙醇法对酶活的抑制率为97.56%,终止反应后5min内净吸光值减少5%;EDTA法对酶活抑制率为32.94%,终止反应后10min内净吸光值增加5%;三氯乙酸法对酶活的抑制率为99.46%,终止反应后10min内净吸光值增加了0.47%;碳酸钠法对酶活抑制率为76.44%,终止反应后10min内净吸光值增加了0.53%;沸水浴法对酶活抑制率为99.51%,终止反应后10min内净吸光值减少0.77%,但沸水浴会导致剩余底物的大量分解。【结论】三氯乙酸法是一种准确有效的终止脂肪酶活力测定反应的方法,可用于脂肪酶酶学性质的研究。
- 滕昆张吉福牛福星杜丽琴韦宇拓
- 关键词：脂肪酶酶活测定
- 脂肪酶的分子结构及应用研究进展被引量：13
- 2014年
- 脂肪酶能催化水解、酸解、醇解、氨解、转酯以及酯化合成等反应,广泛应用于食品工业、造纸业、洗涤工业、医药领域以及相关的行业和领域中。本文概述了目前脂肪酶在分子结构、催化类型和机制、基因克隆来源及其应用领域等方面的研究进展。
- 韦宇拓滕昆
- 关键词：脂肪酶酯酶分子结构
