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国家自然科学基金(30700768)

作品数:5 被引量:10H指数:1
相关作者:郑少玲杨亦荣陈必成蔡勇夏鹏更多>>
相关机构:温州医学院附属第一医院华中科技大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金浙江省公益性技术应用研究计划项目浙江省自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 5篇医药卫生

主题

  • 1篇移植皮肤
  • 1篇移植肾
  • 1篇移植肾功能
  • 1篇移植肾功能延...
  • 1篇移植肾功能延...
  • 1篇移植受者
  • 1篇移植物
  • 1篇移植物存活
  • 1篇引物
  • 1篇植皮
  • 1篇杀伤
  • 1篇肾功能
  • 1篇肾功能延迟恢...
  • 1篇肾移植
  • 1篇受者
  • 1篇体内注射
  • 1篇体液免疫
  • 1篇内注射
  • 1篇皮肤移植
  • 1篇注射

机构

  • 3篇温州医学院附...
  • 1篇华中科技大学

作者

  • 3篇陈必成
  • 3篇杨亦荣
  • 3篇郑少玲
  • 2篇夏鹏
  • 2篇蔡勇
  • 1篇肖龙仁
  • 1篇郭晖
  • 1篇郑建建
  • 1篇陈文伟
  • 1篇陈琰
  • 1篇昌盛
  • 1篇王斯璐
  • 1篇白永恒
  • 1篇杨云秀
  • 1篇倪晓洁
  • 1篇徐自强
  • 1篇王瑾珺

传媒

  • 2篇中华器官移植...
  • 1篇中华泌尿外科...
  • 1篇中华检验医学...
  • 1篇Journa...

年份

  • 2篇2011
  • 1篇2010
  • 2篇2009
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
改良通用茎环引物筛查和定量检测微小RNA方法的建立被引量:9
2011年
目的 建立可同时筛选和定量检测成熟型miR的荧光定量PCR方法.方法 改良通用茎环引物,在其茎环尾端引入8个随机碱基片段,用于成熟型miR逆转录,以建立SYBR Green PCR筛选和定量检测miR的方法(简称“改良通用茎环引物miR法”).同时,采用10倍梯度稀释的miR-155标准品cDNA(1~109拷贝/μl)评价其灵敏度;采用熔解曲线评价其检测miR-155的特异性;通过对2×105、2×106、2×107拷贝/μl的miR-155标准品cDNA分别进行批内20次重复实验,以其循环阈值(Ct)的变异系数(CV)评价其精密度;并与传统茎环法进行比较,计算实验所用时间和引物成本.然后,采用改良通用茎环引物miR法对植物血凝素(PHA)刺激培养0、16、24、48、72 h的人外周血T淋巴细胞内miR进行筛选(87个靶miR,经PubMed检索可能与免疫功能相关),并用以进行miR定量检测分析.结果 建立的改良通用茎环引物法的最低检测限为103拷贝/μl的miR-155 cDNA标准品;熔解曲线于80℃呈单峰,证实为针对miR-155的特异性扩增;其批内重复实验的精密度为CV<2.5%.优化后的通用引物方法与传统方法相比较,节约引物约75%(1 917 bp比7 851 bp),节省逆转录时间约120min(85 min比205 min).用改良通用茎环引物法筛选T淋巴细胞中87个miR,85个miR在PHA刺激前、后的Ct无变化,而miR-150和miR-155表达量在T淋巴细胞激活前后分别发生超过10倍下降(72 h)和8倍的升高(48 h),且差异有统计学意义(Z=-2.023,P=0.043;Z=-2.032,P=0.042).结论 建立的改良通用茎环引物miR法具有快速、重复性好、灵敏、节约引物用量和实验时间的优点,可用于T淋巴细胞的miR筛查和定量检测.
陈必成王斯璐白永恒杨云秀蔡勇夏鹏郑少玲杨亦荣
关键词:微小RNAST淋巴细胞聚合酶链反应
体内注射白细胞介素10和转化生长因子质粒延长小鼠移植皮肤存活时间
2009年
目的探讨体内注射白细胞介素10(IL-10)和转化生长因子β1(TGF-β1)质粒对小鼠移植皮肤存活时间的影响。方法构建含IL-10和TGF-β1基因的质粒,以Balb/c小鼠为受者、Balb/c小鼠与C57BL/6小鼠杂交的F1代小鼠为供者,行皮片移植。移植当天,经尾静脉分别给受者快速注射不含基因的空白质粒(空白组)、含IL-10基因质粒(IL-10组)、含TGF-β1基因质粒(TGF-β1组)以及含IL_10和TGF-β1双基因的质粒(联合组),以后每2天注射1次,20μg/次,共注射6次,观察移植皮肤存活时间。另取Balb/c小鼠,在输注C57BL/6小鼠脾细胞后,按前述分组及方法接受质粒快速注射,注射5次后,分离其脾细胞,以流式细胞仪检测脾细胞中CD4^+CD25^+T淋巴细胞含量。结果移植皮片存活时间,空白组为(13.50±1.04)d,IL-10组为(13.83±1.16)d,TGF-β1组为(15.33±1.50)d,联合组为(21.33±3.20)d,联合组移植皮片存活时间明显长于其他3组(P〈0.01)。脾细胞中CD4^+CD25^+T淋巴细胞的含量,空白组为(6.58±1.86)%,IL-10组为(10.52±1.13)%,TGF-β1组为(14.44±0.42)%,联合组为(14.25±1.24)%,TGF-~I组和联合组的CD4’CD25’T淋巴细胞含量明显高于空白组和IL-10组(P〈0.01)。结论体内注射IL-10和TGF-β1质粒可延长小鼠移植皮肤存活时间,并能提高CD4^+CD25^+T淋巴细胞含量。
夏鹏杨亦荣陈文伟郑少玲蔡勇肖龙仁陈必成
关键词:白细胞介素10皮肤移植移植物存活
移植肾功能延迟恢复与供者谷胱甘肽硫转移酶多态性的研究被引量:1
2009年
目的探讨影响移植肾功能延迟恢复(DGF)的相关因素。方法收集肾移植受者150例临床资料,其中24例发生DGF,对可能影响DGF发生的各项指标进行统计学分析。提取移植肾供者172例和健康体检者157例外周血中基因组DNA,应用多重PCR和特异性引物多态PCR技术检测谷胱甘肽硫转移酶(GST)基因多态性,比较DGF和无DGF组供者GST基因多态性的差异。结果受者DGF组和非DGF组性别(x^2=0.028,P=0.867)、PRA(X^2=1.564,P=0.211)及透析类型(X^2=0.585,P=0.444)之间比较差异无统计学意义(P〉0.05);单因素线性回归分析提示术后第2个24h尿量、第1和第2个24h人量与T1,2(SCr)间存在线性关系(P〈0.05),Cox风险比例回归模型提示术后第2个24h尿量可判断受者移植肾功能的恢复情况(RR=1.002,P=0.001)。DGF组供者GsTM1基因型缺失频率为86.4%,与未发生DGF组的62.7%、健康对照组的47.8%比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论受者术后第2个24h尿量对预测DGF的发生有重要意义。供者GsTM1基因型缺失可能是发生DGF的原因之一。
徐自强王瑾珺倪晓洁陈必成杨亦荣郑少玲郑建建陈琰
关键词:肾移植移植肾功能延迟恢复谷胱甘肽硫转移酶
Blockade of γc Signals in Combination with Donor-specific Transfusion Induces Cardiac Allograft Acceptance in Murine Models
2010年
The γc cytokines play an important role in proliferation and survival of T cells. Blocking the γc signals can cause the activated donor-reactive T cells losing the ability to proliferate, and getting into apoptosis pathway, which contributes to induction of the peripheral tolerance. In this study, we induced the transplant tolerance through blocking the γc in combination with donor-specific transfusion (DST) in the cardiac transplantation. Following DST, on the day 2, 4 and 6, C57BL/6 recipients received anti-γc monoclonal antibodies (mAbs) injection, and those in control group were not given anti-γc mAbs. On the day 7, Balb/c cardiac allografts were transplanted. All recipients in experimental group accepted cardiac allografts over 30 days, and two of them accepted allografts without rejection until sacrifice on the 120 day. Animals only receiving DST rejected grafts within 5 days, and the mice receiving cardiac transplantation alone rejected grafts within 9 days. Our study showed that blockade of γc signaling combined with DST significantly prolonged allograft survival, which was probably associated with inhibition of antigen-specific T-cell proliferation and induction of apoptosis.
昌盛汪理林星光向芙莉陈必成陈忠华
器官移植受者体液免疫现象的“饱和一非饱和杀伤”假说
2011年
目的建立“饱和一非饱和杀伤”假说以解释移植受者体内的体液免疫反应,包括抗体介导的“适应”现象和排斥反应。方法以补体依赖的杀伤过程为基础,当一定时间内细胞表面实际的抗原抗体结合量(R)达到杀伤细胞所需最低抗原抗体复合物阈值量(D)时,即R≥D时为“饱和杀伤”;当R〈D时为“非饱和杀伤”。通过此模型解释目前已有的各种移植相关的体液免疫现象,并解释其中的矛盾现象。结果抗体介导的超急性排斥反应、加速排斥反应和急性排斥反应可以用“饱和杀伤”加以解释。ABO血型不相容移植物的长期存活,部分患者出现抗HLA抗体而移植物功能稳定,新生抗HLA抗体的损伤,供者细胞保护性蛋白谱表达增加,C4d与体液免疫排斥反应的不相关等现象可用“非饱和杀伤”加以解释。结论“饱和一非饱和杀伤”模式有助于了解各种体液免疫现象问的相互联系,部分解释“适应”现象和排斥反应。
陈必成郭晖刘勇昌盛蔡勇夏鹏郑少玲杨亦荣
关键词:抗原抗体反应杀伤
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