国家重点基础研究发展计划(2002CB513105)
- 作品数：13 被引量：34H指数：4
- 相关作者：陆应麟杜芝燕徐元基王妍陈惠华更多>>
- 相关机构：军事医学科学院中国人民解放军海军总医院空军总医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 利用RNA干扰技术研究14-3-3ζ对肺癌细胞转移的抑制作用被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨14-3-3ζ对肺癌细胞转移的押制作用。方法:以人肺巨细胞癌低转移细胞株为模型,利用RNAi技术研究14-3-3ζ被干涉后肿瘤细胞恶性表型的变化,探讨14-3-3ζ与肿瘤转移的相关性。结果:本研究发现14-3-3ζ被干涉后细胞的集落形成能力明显提高,黏附能力明显降低,细胞迁移、侵袭能力明显提高。结论:14-3-3ζ可能抑制肺癌细胞的转移。
- 陈惠华谭晓刚王妍徐元基杜芝燕陆应麟
- 关键词：肿瘤转移肺肿瘤RNA干扰
- 肺癌中凝血酶受体-1的表达及意义被引量：8
- 2004年
- 目的 分析凝血酶受体 (PAR 1)在肺癌组织及细胞中的表达情况 ,探讨PAR 1与人肺癌生物学行为的关系。方法 采用免疫组织化学、Westernblot及RT PCR方法检测不同类型肺癌组织及细胞系中PAR 1的表达情况。结果 免疫组化S P法检测PAR 1在 5 2例肺癌组织中表达情况分别为 :腺癌 14 / 2 0例、鳞癌 6 / 16例、大细胞癌 6 / 10例、小细胞癌中 4 / 6例。免疫组化阳性细胞多位于癌巢周边 ,1例侵及支气管软骨处的鳞癌癌巢及另 1例低分化腺癌脉管内的癌栓呈明显阳性 ,1例腺癌组织周围的肺泡上皮不典型增生灶呈明显阳性。Westernblot及RT PCR方法检测结果均显示PAR 1在人肺巨细胞癌细胞系高转移株 (PLA80 1D)中的高表达明显高于其低转移株 (PLA80 1C)。结论 PAR 1在各种组织类型的人肺癌组织中均有不同比例表达。PAR 1在人肺巨细胞癌细胞系高转移株 (PLA80 1D)中的表达明显高于其低转移株 (PLA80 1C)。PAR
- 孟宇宏张金强朱彦君宁浩勇胡明姚林郑集义王妍陆应麟虞积耀
- 关键词：肺癌生物学行为免疫组织化学
- 14-3-3ζ抑制肺癌细胞转移的实验研究被引量：6
- 2005年
- 目的:探讨14-3-3ζ与肺癌转移的关系。方法:以人肺巨细胞癌高低转移细胞株为模型,Western印迹验证14-3-3ζ在高低转移株中的差异表达;随后采用细胞转染技术将1433ζ基因导入人肺巨细胞癌高低转移株,通过研究转染后细胞增殖能力、黏附能力以及迁移能力的变化,探讨14-3-3ζ与肿瘤转移的相关性。结果:Western印迹检测发现14-3-3ζ在低转移株PLA801C中的表达水平显著高于高转移株PLA801D,在此基础上,构建成功正反义表达载体并转染细胞,转染正义载体后细胞的增殖减慢,黏附能力提高,体外迁移能力下降;而转染反义载体后细胞的增殖加快,体外迁移能力提高。结论:1433ζ可能抑制肺癌细胞的转移。
- 陈惠华王妍徐元基杜芝燕郝好杰徐丁尧谭晓刚蔺会云陆应麟
- 关键词：肿瘤转移肺肿瘤
- 免疫组化检测14-3-3ζ在临床肺癌中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨14-3-3ζ与肺癌转移的关系。方法:以免疫组织化学染色检测14-3-3ζ在临床肺癌标本原发灶与转移灶的表达情况,探讨14-3-3ζ与肿瘤转移的相关性。结果:在所有的肿瘤标本中均检测到14-3-3ζ的表达,其中15例标本原发灶14-3-3ζ的表达水平高于转移灶。结论:14-3-3ζ与肺癌转移具有一定的相关性。
- 陈惠华孟宇宏徐元基杜芝燕王妍谭晓刚陆应麟
- 关键词：肿瘤转移肺肿瘤免疫组织化学
- RNA干扰在肿瘤转移研究中的应用被引量：2
- 2005年
- RNA干扰是与特定基因同源互补的双链RNA在体内以序列特异的方式引发靶基因的mRNA降解,从而导致转录后基因沉默的过程。由于其在基因沉默中的高度特异性和有效性,在基因功能和基因药物的研究中有很大潜力。综述了RNA干扰可能的分子机制、分子生物特性和其在肿瘤特别是肿瘤转移中的应用。
- 谭晓刚陈惠华陆应麟
- 关键词：RNA干扰转录后基因沉默肿瘤转移
- mag-1基因与肿瘤细胞转移的相关性研究被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨mag-1基因与肿瘤细胞转移的关系。方法:检测mag-1在人肺巨细胞癌高低转移细胞株PLA801D与PLA801C、肺癌高低转移细胞株A549与H1299及乳腺癌高低转移细胞株MCF-7与MDA-MB-231中mag-1的表达水平;检测构建的mag-1正反义真核表达载体转染细胞后mag-1表达水平的变化;将mag-1正义表达载体分别转染低转移细胞株PLA801C及MCF-7并筛选出稳定克隆;研究mag-1过表达对细胞形态、增殖、迁移、黏附及侵袭等生物学行为的影响。结果:高转移细胞株PLA801D中mag-1的mRNA及蛋白表达水平均显著高于低转移细胞株PLA801C中mag-1的表达水平,乳腺癌高低转移细胞株中mag-1的蛋白表达水平也有明显的差异;过表达mag-1细胞的形态及增殖能力没有发生改变,而细胞的黏附、迁移及侵袭能力增强。结论:mag-1可能促进肿瘤细胞的转移。
- 贾海泉蔺会云徐元基杜芝燕王妍陈惠华姜云波陆应麟
- 关键词：肿瘤转移转染基因表达肺肿瘤乳腺肿瘤
- 人肿瘤转移相关基因mag-2的多克隆抗体的制备和鉴定
- 2007年
- 目的:制备和鉴定针对人肿瘤转移正相关基因mag-2蛋白产物的特异性多克隆抗体。方法:采用生物软件分析mag-2蛋白序列特性,预测特异性抗原表位,人工合成17肽抗原表位片段,将之与钥孔碱血蓝蛋白(KLH)耦联,采用背部皮下及皮内多点注射法免疫日本大耳白兔,收集分离血清,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定其效价,Western印迹试验鉴定其特异性及其在多种肿瘤细胞中的表达。结果:成功免疫日本大耳白兔,ELISA结果表明得到的抗血清与免疫多肽有良好的结合,获得了高效价的多克隆抗体;Western印迹试验结果显示抗血清检测到的条带大小约为55×103,与mag-2理论蛋白产物相对分子质量相符;发现mag-2在多种肿瘤细胞中均有表达。结论:成功制备了mag-2特异性多克隆抗体,为深入研究mag-2基因在肿瘤转移中的作用提供了一个有用的工具。
- 刘刚徐元基姜云波贾海泉潘和平杜芝燕陆应麟
- 关键词：多克隆抗体肿瘤转移表位
- 转移正相关基因mag1-的原核表达及抗体制备被引量：1
- 2006年
- 目的:克隆人mag1-基因,在大肠杆菌中进行表达并制备其抗体。方法:利用PCR方法从含有mag1-基因全长序列的pcDNA3-mag1-质粒上扩增mag1-基因开放阅读框(ORF),将其插入表达载体pET-28 a(+)中,构建重组表达载体pET-28 a-mag1-,用IPTG诱导目的基因在E.coli中的表达,并通过W estern印迹方法对表达产物进行鉴定。表达产物经过初步纯化后作为抗原免疫兔制备多克隆抗体。结果:所获得的序列经测序分析与源序列一致;SDS-PAGE分析表明,经0.1 mmol/L IPTG 37℃诱导6 h后在E.coli中有大量的融合蛋白表达,相对分子质量约为18×103。W estern印迹分析提示,诱导表达产物能与H is单抗发生特异反应。ELISA结果表明获得了高效价的多克隆抗体。结论:获得了H is-mag1-融合蛋白在大肠杆菌中高效表达,并制备了其相应的多克隆抗体。
- 蔺会云徐元基王妍陈惠华杜芝燕谭晓刚陆应麟
- 关键词：基因表达抗体酶联免疫吸附测定
- 14-3-3ζ与细胞凋亡被引量：2
- 2005年
- 细胞凋亡的调控是一个复杂的过程,1433ζ作为凋亡抑制蛋白,近年来对其研究不断深入。本文介绍了1433ζ的结构特点以及抑制细胞凋亡的机制,同时简要介绍了该蛋白的配体类型及其拮抗剂的应用。
- 陈惠华陆应麟
- 关键词：细胞凋亡配体
- MAG-2对肺癌细胞系PLA801生长的影响及其机制的研究
- 2008年
- 背景与目的肿瘤的发生、发展、增殖及转移是多种基因的结构、功能和表达情况改变积累的结果。MAG-2是利用抑制消减杂交技术获得的与肺癌转移相关的新基因,实验证实该基因与肺巨细胞癌细胞的转移密切相关。本研究的目的在于研究基因MAG-2对肺巨细胞癌细胞增殖的影响及其分子机制。方法构建MAG-2的正反义表达载体,分别转染PLA801C和PLA801D,获得稳定表达相应序列的细胞株;然后利用MTT实验、流式细胞术、Fluo-3-Am荧光染料染色实验观察了这两株稳定转染细胞的细胞增殖能力、细胞周期的组成、细胞内游离Ca2+浓度变化,并用Westernblot及RT-PCR实验检测MAG-2对p53、PCNA等分子的影响。结果MAG-2正义载体转染能增加PLA801C株细胞内PCNA的转录,抑制p53突变蛋白的水平,增加S期细胞所占的比例,增加细胞内游离Ca2+浓度,对细胞具有一定的促增殖作用;MAG-2反义载体转染可以降低细胞内游离Ca2+浓度,抑制PLA801D株细胞的增殖,但是对p53和PCNA的影响不明显。结论MAG-2对肺癌细胞PLA801具有促增殖的作用,通过影响细胞内游离Ca2+浓度来实现对细胞增殖的调节是其可能的机制之一。
- 张金强孟宇宏刘刚陈惠华王妍徐元基杜芝燕陆应麟
- 关键词：钙信号增殖肺肿瘤
