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逆转录病毒载体介导PIG-A基因在突变型K562细胞中的表达: 2006年; 目的应用逆转录病毒载体将PIG—AeDNA转导至突变型K562细胞中，观察是否能够逆转K562细胞CD59的表达。方法采用PCR方法从质粒pEBPIG—A中扩增PIG-A基因片断，BamHI及XhoI双酶切后连接至逆转录病毒载体pLEGFP-C1相应位点。脂质体法转染PA317包装细胞，收集病毒上清感染突变型K562细胞，流式细胞仪测定感染前后CD59的表达情况。结果重组逆转录病毒载体转染PA317包装细胞后，24～48h荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白的表达。C,418筛选后，病毒滴度测定达（1．6±0．2）×10^5CFU／mL。感染K562细胞前后测定CD59的表达率分别为4．5％±O．7％及21-3％±0．3％（R〈0.01）。结论成功构建了PIG—A基因逆转录病毒载体，感染突变型K562细胞后可以提高其CD59的表达。; 李振宇徐开林邱婷婷潘秀英何徐彭孙海英李德鹏鹿群先; 关键词：逆转录病毒载体

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江苏省高校自然科学研究项目(03KJB20139)