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辐射诱导启动子介导的腺病毒自杀基因联合照射的抗肿瘤效应被引量：1: 2011年; 目的检测利用肿瘤特异性辐射诱导嵌合启动子介导的腺病毒自杀基因系统联合放射线对肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法构建含有6个串联放射反应元件的人端粒酶反转录酶基因嵌合启动子调控辣根过氧化物酶表达的复制缺陷型腺病毒，同时建立人肝癌细胞MHCC97裸鼠皮下移植瘤模型，瘤内注射重组腺病毒，腹腔注射吲哚乙酸，同时给予叮射线照射，观察肿瘤生长、裸鼠生存状态，以及肿瘤组织和正常器官的组织病理学改变。结果分组处理后第31天，阴性对照病毒组、单纯病毒组、单纯照射组及联合组裸鼠皮下移植瘤相对体积分别为49．23±4．55、27．71±7．74、28．53±10．48和．11．58±3．23，组间差异具有统计学意义（F=16．288，P〈0．01），其中联合组的肿瘤抑制作用最强，生长抑制率为76．5％；与对照组相比，非对照组均能延长裸鼠中位生存期（r=18．307，P〈0．01），其中联合组差异最显著（13d与43d）；光镜下各治疗组肿瘤组织均出现坏死，其中联合组肿瘤坏死较多，而正常器官组织病理学检查未发现治疗相关损伤改变。对照组裸鼠肝脏显示出密集的肝癌转移灶，单纯治疗组仅有少数转移灶，而联合组肝脏未见明显异常。结论复制缺陷型腺病毒介导的靶向自杀基因治疗联合放疗能有效抑制肝癌皮下移植瘤生长，延长裸鼠生存期，为肝癌的治疗提供了新的途径，具有良好的应用前景。; 孙文洁於海军熊杰徐禹廖正凯周福祥谢从华周云峰; 关键词：腺病毒人端粒酶反转录酶

射线联合嵌合启动子介导的自杀基因对肿瘤细胞的靶向杀伤作用被引量：4: 2011年; 目的探讨放射线联合新型嵌合启动子介导辣根过氧化物酶／吲哚乙酸（HRP／IAA）自杀基因系统特异高效的抗肿瘤作用。方法构建含有4个串联放射反应元件CArG、含或不含巨细胞病毒（CMV）启动子的人端粒酶逆转录酶嵌合启动子，筛选肿瘤特异性及放射诱导性强的嵌合启动子，下游连接自杀基因辣根过氧化物酶（HRP），检测放射线联合基因治疗对肿瘤细胞HeLa、A549和MHCC97增殖及凋亡的影响。结果人胚肺成纤维细胞MRC-5中C4-hTC嵌合启动子的活性（0．1±0．0）明显低于肿瘤细胞株HeLa、A549和MHCC97（0．6±0．0、1．1±0．1和1．0±0．1，P〈0．01），经过6Gy射线诱导后，这种差异更加显著（活性分别为0．2±0．1、1．7±0．2、2．3±0．2和2．3±0．1，P〈0．01）。在肿瘤细胞株HeLa、A549和MHCC97中，嵌合启动子C4-hTC-HRP携带的自杀基因系统SER值分别为2．64、2．75和2．82，显著高于单纯hTERT启动子。在肿瘤细胞中，除阴性对照质粒pGL3-contr01．Luc外，自杀基因与放射治疗相联合对肿瘤细胞的生长抑制明显高于单一治疗方法，而联合组中pC4-hTC．HRP／IAA系统与放射联合的生长抑制作用最显著，对HeLa、A549和MHCC97细胞的生长抑制率分别为67．3％、69．0％和64．6％。在肿瘤细胞中，除阴性对照质粒pGL3-control-Luc外，联合组诱导的早期凋亡率明显高于单一治疗方法组，其中pC4-hTC-HRP／IAA系统与放射联合诱导的凋亡率最高，HeLa、A549和MHCC97细胞凋亡率分别为39．6％、33．0％和33．2％。结论新型嵌合启动子C4-hTC具有良好的肿瘤特异性及放射诱导性，放射线联合基因治疗对肿瘤细胞具有特异高效的杀伤作用，在肿瘤的基因放疗中具有较强的应用潜力。; 孙文洁熊杰王伟锋廖正凯周福祥周云峰; 关键词：人端粒酶逆转录酶人巨细胞病毒吲哚乙酸肿瘤细胞系

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武汉市科技攻关计划项目(200960323129)

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