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巴氏染色法在精子顶体研究中的应用被引量：8: 2005年; 目的应用巴氏染色方法对临床上精子顶体区是否正常进行区分。方法分别对该研究所门诊111例精子标本进行巴氏染色后,每例标本在显微镜油镜下记数200个精子,观察顶体区。结果111例标本中,5例为无顶体圆头精子,23例为小顶体区精子,83例顶体区正常精子。结论巴氏染色法在临床上可对精子顶体区是否正常作出准确的判断。; 朱文兵范立青曾亚荣卢光琇; 关键词：精子顶体巴氏染色

富集低丰度蛋白的人类精子全蛋白二维电泳整合图的建立被引量：8: 2006年; 目的:运用二维电泳(2-DE)技术分离人类正常精子低丰度蛋白并建立全精子蛋白的2-DE整合图。方法:30例精子标本混匀后一次性进行蛋白提取,分别使用0.8、0.6、0.5、0.3 mg的蛋白上样量进行2-DE。运用MALD I-TOF法对确定2个恒定蛋白点的等位点(PI)和相对分子质量(Mr)作为图像的内参照点,对不同上样量的2-DE图进行比较分析,最后合成1张富集低丰度蛋白的整合图。结果:在0.5 mg图中分离出(1 080±23)个蛋白点,并合成具889个匹配点的整合图A。在上样量为0.8、0.6及0.3 mg的2-DE图中,分别新检测到381、50、32个在0.5 mg图中未检测到的蛋白点。最后合成具1 352个蛋白点的整合图B。结论:通过改变上样量的方法促进低丰度蛋白分离并合成具1 352个蛋白点富集低丰度蛋白的2-DE整合图。; 孙波澜范立青李凌伟朱文兵卢光琇; 关键词：二维电泳

CD117(c-kit)在人类精液生精细胞中表达研究被引量：4: 2005年; 目的从精液中分离和鉴定各类生精细胞,探讨用c-kit从精液中分离生精细胞的可能性。方法对精液中圆细胞超过3×106的标本进行联苯胺兰染色,排除白细胞,再用改良非连续percoll梯度离心,对生精细胞进行分离纯化。结合细胞形态学、荧光原位杂交,鉴别各类生精细胞的组成,运用抗人CD117单克隆抗体对纯化的细胞进行免疫细胞化学检测。结果经Percoll分离,对分离的细胞用X/Y混合探针进行荧光原位杂交,可对除精原细胞和初级精母细胞外的各级生精细胞进行准确的分类,结合形态学分析,可确定分离细胞中生精相关细胞的组成比例。在分离纯化的圆细胞中,无核胞浆小体占整个细胞比例为28.5%,细胞免疫化学研究表明,有c-kit表达的细胞占整个总细胞的比例为66.3%,且精子也表达c-kit。结论c-kit在人类精液中各级生精细胞及精子上均表达,为从人类精液中分离各类生精细胞用于临床及科研提供了可能。; 蒋祥龙范立青朱文兵曾亚荣卢光王秀; 关键词：生精细胞

应用双向电泳技术初步建立人精子头部蛋白质图谱被引量：16: 2004年; 目的 :利用人类精子蛋白质组分析的双向蛋白电泳 (2 DE)技术建立正常人精子头部蛋白质图谱。　方法 :先用固相pH梯度 SDS电泳技术 (IPG DALT)对全精子和精子头部蛋白质抽提物进行蛋白质分离 ,然后用图像分析软件比较精子头部蛋白质图像与精子蛋白质图像的蛋白质斑点组成差异。其中 ,全精子蛋白质的抽提比较了硫脲 /尿素 /盐酸胍和Kit/盐酸胍两种抽提方法。　结果 :硫脲 /尿素 /盐酸胍法与Kit/盐酸胍法所得的全精子 2 DE图像蛋白质斑点分别为 80 2个和 797个 ,其中相同的有 4 92个 ,将两种方法获得的图像整合而得到的全精子蛋白质图像有1 1 0 7个蛋白质斑点 ;精子头部图像蛋白质斑点有 4 2 8个 ,经匹配 ,全部来源于全精子蛋白质图像。　结论 :综合采用两种蛋白质提取方法初步建立了精子头部蛋白质图谱。; 谭玉梅范立青罗克莉朱文兵卢光琇; 关键词：蛋白质图谱精子双向电泳

正常精子和圆头精子差异表达蛋白的分离与鉴定被引量：16: 2003年; 圆头精子症是一种表现为顶体缺失的男性不育症.为了研究正常精子和圆头精子的蛋白质组成差异,用固相pH梯度双向凝胶电泳和质谱分析等蛋白质组学方法,分离了 30份正常和 3份圆头精子标本的蛋白质.对其中16个在正常精子中有高丰度表达而在圆头精子中缺失,和 1个在圆头精子中表达明显下调的蛋白质点,以及在圆头精子中存在而在正常精子中缺失的蛋白质簇W和点X,进行了肽质指纹分析和蛋白质鉴定,获得 8个点的肽质量指纹图,经MS Fit软件搜索SWISS PROT数据库来鉴定其身分.发现其中 3个点与高尔基体相关、2个点与蛋白酶体相关、2个点为锌指蛋白。; 罗克莉范立青朱文兵卢光; 关键词：正常精子蛋白蛋白质组学

Establishment of a high-resolution 2-D reference map of human spermatozoal proteins from 12 fertile sperm-bank donors被引量：6: 2007年; 瞄准：扩大人的精子的 proteome 的分析并且在 3.5-9.0 的 pHrange 建立人的精子的蛋白质的一张 2-D 胶化电气泳动(2-DE ) 参考地图。方法：为了揭示更多的蛋白质，看到，女人的使不能调动的 pH 坡度脱衣( 24cm ) pH 3-10 和狭窄的范围 pH 使不能调动的 pH 6-9 ，以及不同重叠的更狭窄的范围变化 pH 坡度( IPG )脱衣包括 3.5-4.5 ， 4.0-5.0 ， 4.5-5.5 ，第5.0-6.0a 5.5-6.7 ，被使用。在 2-DE 以后，在不同 pH range2-D 胶化对之间的几个视觉上相同的点从胶化被割并且由集体分光术证实了并且为计算机分析用作里程碑。结果：有从 3.5 ～ 9.0 的 pH 价值的 2-D 参考地图被使用 ImageMaster 分析软件综合。重叠的点被排除，以便每个点被数仅仅一次。3 872 个不同蛋白质点的一个总数从参考地图被识别，与宽广范围 pH 3-10 IPG 相比的近似 3 褶层增加脱衣(1 306 个点).Conclusion：现在的 2-D 模式是为人的肥沃的精子的蛋白质点的一张高分辨率 2-D 引用地图。人的精子的蛋白质作文的全面知识在学习男富饶的 dysregulation 是很有意义的。; Ling-Wei Li Li-Qing Fan Wen-Bing Zhu Hong-Chuan Nie Bo-Lan Sun Ke-Li Luo Ting-Ting Liao Le Tang Guang-Xiu Lu; 关键词：精子库精蛋白

建立3872点人类正常精子2-D蛋白质整合图: ＜正＞为了构建一张pH值从3.5到9.0的人类正常精子蛋白质二维电泳合成图, 在整个实验过程中运用了二维电泳,蛋白质组学2-D软件分析,质谱分析以及其他相关辅助实验技术。为了获得更多的蛋白点,不但采用宽范围（pH3-10...; 李凌伟范立青朱文兵; 关键词：二维电泳质谱分析; 文献传递

与男性不育相关基因的研究进展被引量：1: 2009年; 生殖是所有哺乳动物的生存所需的,基础研究有助于确定这些基因及男性和女性生殖系统发展、功能和调节机制。目前人类已经在生殖领域取得了一些进展,但是将这些科研成果应用于临床的速度也非常缓慢。但总而言之:近年来在对能控制人类生殖的分子基础的理解上的进步是非常巨大的并最终将改善病人的治疗效果。本文就近年来发现的几种常见的基因对男性生育能力的影响。; 向桢范立青; 关键词：男性生育能力 BCL-2 GNRH Y染色体囊性纤维化

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国家自然科学基金(30170480)