国家自然科学基金(30772325)
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 相关作者：王泽华杨守华任利容张静赵荣伟更多>>
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- 卵巢癌相关成纤维细胞的培养及其对癌细胞侵袭力的影响被引量：5
- 2008年
- 目的探讨卵巢癌相关成纤维细胞(CAFs)对卵巢癌细胞株CAOV3侵袭力的影响。方法用组织块贴壁培养法获得原代卵巢CAFs和卵巢正常成纤维细胞(NFs);通过倒置相差显微镜观察细胞形态和多种蛋白的免疫组化染色,对卵巢CAFs进行鉴定,观察CAFs对CAOV3侵袭力的影响。结果获得纯化的卵巢CAFs,其波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白染色呈阳性,角蛋白呈阴性;CAFs可显著提高CAOV3的侵袭能力(P<0.01)。结论与NFs相比,CAFs在形态结构、蛋白表达等方面均有显著差异,卵巢CAFs可增强CAOV3侵袭作用。
- 王晓翊卢实杨守华韩方唐慧娟王泽华
- 关键词：卵巢肿瘤癌相关成纤维细胞细胞培养侵袭力
- 卵巢上皮性癌的淋巴管形成及其临床病理意义
- 2009年
- 淋巴管形成是近年肿瘤研究的热点，淋巴管形成与肿瘤的淋巴转移、扩散关系密切，是肿瘤患者预后差的重要标志，阻断淋巴管形成可以阻止癌细胞的淋巴转移。近年来肿瘤淋巴管相关研究的突破应归功于可靠的淋巴管标记物的发现和应用。单克隆抗体D240可以特异性地识别淋巴管内皮细胞的标记物——膜糖蛋白podoplanin，有很高的特异性和敏感性。Ki-67抗原是一种增殖细胞的核标记物，可判断细胞的增殖活性。目前认为，D2-40／Ki-67免疫组化双重染色方法是研究肿瘤淋巴管形成最理想的方法。
- 赵荣伟杨守华蔡俐琼张静汪晶王泽华
- 关键词：卵巢上皮性癌病理意义PODOPLANIN淋巴管内皮细胞KI-67抗原
- Aurora B基因沉默对卵巢癌细胞A2780紫杉醇化疗敏感性的影响被引量：5
- 2011年
- 目的研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制Aurora B基因表达对卵巢癌细胞A2780细胞紫杉醇化疗敏感性的影响。方法采用RNAi方法,将不同浓度AURKB siRNA转入A2780细胞(实验组),同时设阴性对照组和空白对照组,并以不同浓度紫杉醇作用各组细胞。采用MTT检测细胞存活率;AnnexinⅤ-FITC/PI检测细胞凋亡率;Western blot检测细胞内Caspase-3蛋白水平;Hoechst染色观察细胞凋亡。结果 A2780细胞转染不同浓度siRNA后,随着siRNA浓度增加,细胞存活率逐渐下降,至50pmol/L时,实验组与空白对照组和阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);不同浓度紫杉醇处理各组细胞,随着紫杉醇浓度增加,细胞存活率明显下降,当紫杉醇浓度至10μmol/L时,实验组与空白对照和阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);50pmol/L siRNA转染A2780细胞48h,再以10μmol/L浓度紫杉醇处理细胞,实验组细胞凋亡率明显增加,与空白对照组和阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);50pmol/L浓度siRNA转染A2780细胞48h,再以10μmol/L浓度紫杉醇处理细胞,实验组细胞内Caspase-3蛋白表达明显上调,细胞凋亡明显增加。结论 Aurora B的抑制可增强A2780细胞对紫杉醇的化疗敏感性,并使细胞凋亡增加。
- 任利容梁铭霖肖兰王泽华
- 关键词：AURORA细胞存活化疗敏感性紫杉醇CASPASE-3蛋白
- RNAi抑制Aurora B激酶对卵巢癌A2780细胞增殖和周期的影响被引量：2
- 2011年
- 目的研究RNAi抑制Aurora B激酶对卵巢癌A2780细胞增殖和周期的影响。方法采用RNAi方法,将AURKB RNAi转入A2780细胞,RT-PCR、Western blot检测Aurora B mRNA和蛋白的表达,MTT检测A2780细胞增殖情况,流式细胞术检测A2780细胞周期改变。结果①通过RT-PCR、Western blot检测到人类5种卵巢癌细胞株A2780、SKOV3、CAOV3、A2780/taxol及AD6中均明显表达Aurora B mRNA和蛋白;②A2780细胞转染AURKBRNAi后,Aurora B mRNA和蛋白的表达明显下降,转染浓度至200 pmol/L RNAi 48 h后,Aurora B mRNA和蛋白的表达被完全抑制;③MTT检测和锥虫蓝染色结果显示,于转染200 pmol/L AURKB RNAi第4天开始,A2780细胞增殖明显受到抑制,吸光度值与空白对照组和阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);④Flow cytometry检测显示,转染200 pmol/L AURKB RNAi 24 h,大量A2780细胞进入有丝分裂期,并形成多倍体细胞,于72 h多倍体细胞比例达到峰值20.54%,转染后96 h转染组细胞凋亡率(11.67%)显著高于对照组(0.57%);⑤Hoechst 33258染色观察细胞凋亡结果显示,与A2780对照和阴性对照相比,转染200 pmol/L浓度AURKB RNAi 96 h后A2780细胞凋亡明显增多。结论 Aurora B的抑制使A2780细胞增殖受到明显抑制;导致多倍体形成,使细胞基因组严重不稳定,最终导致细胞凋亡,Aurora B可能是卵巢癌治疗的有效分子靶点。
- 任利容肖兰梁铭霖王泽华
- 关键词：RNA干扰卵巢癌细胞增殖
- 血管内皮生长因子与血小板源性生长因子在卵巢上皮性癌淋巴管形成中的作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）和血小板源性生长因子（PDGF）在卵巢上皮性癌（卵巢癌）淋巴管形成中的作用。方法RT—PCR技术检测淋巴管内皮细胞核标志物Prox1和淋巴管形成相关因子VEGF—A、VEGF—C、VEGF-D及PDGF—A、PDGF—B、PDGF-C、PDGF—D在卵巢癌细胞株SKOV3、70例卵巢上皮性肿瘤（卵巢良性肿瘤15例、卵巢交界性肿瘤10例、卵巢癌45例）和20例正常卵巢组织中的表达情况。实时定量PCR技术检测上述90例卵巢组织中Prox1、VEGF-A、-C、-D及PDGF—A、-B、-C、-D的表达水平，并进行相关性分析。结果（1）Prox1在各种卵巢组织中均有表达，而在SKOV3细胞中无表达；VEGF-A、-C、-D及PDGF—A、-B、-C、-D在SKOV3细胞和各种卵巢组织中均有表达。（2）卵巢癌组织中Prox1（2．2±1．3）、VEGF—A（3．5±1．5）、VEGF—C（19±14）、VEGF—D（3．0±1．8）及PDGF—A（3．3±3．3）、PDGF—C（6．9±4．6）的表达水平高于卵巢良性肿瘤和交界性肿瘤（P均〈0．05）。（3）Prox1、VEGF—A和PDGF—A在卵巢癌Ⅲ～Ⅳ期（Prox1：2．6±1．3，VEGF—A：4．0±1．4，PDGF—A：4．1±3．7）、淋巴结转移阳性（Prox1：3．0±1．4，VEGF—A：4．1±1．7，PDGF—A：4．9±4．1）及腹膜转移阳性（Prox1：2．8±0．9，VEGF—A：4．0±1．8，PDGF—A：4．5±4．0）的组织中的表达水平，分别高于Ⅰ～Ⅱ期、淋巴结转移阴性和腹膜转移阴性者（P均〈0．05）；VEGF—C、VEGF-D在淋巴结转移阳性卵巢癌组织中的表达水平（VEGF—C：24±13，VEGF—D：3．9±2．0）高于淋巴结转移阴性者（P均〈0．05）。（4）卵巢癌组织中Prox1的表达水平与VEGF—D（r=0．62，P〈0．01）、PDGF-C（r=0．91，P〈0．01）、PDGF—D（r=0．61，P〈0．01）的表达水平呈正相关关系。结论VEGF—A、VEGF-C和PDGF—A可能通过参与淋巴管形成之外的机制促进卵巢癌的淋巴结转移；VEGF—D�
- 赵荣伟杨守华蔡俐琼张静汪晶王泽华
- 关键词：卵巢肿瘤血管内皮生长因子类血小板源性生长因子淋巴管生成
