北京市自然科学基金(7062057)
- 作品数：12 被引量：60H指数：5
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- 单侧输尿管梗阻大鼠肾脏组织基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2的表达及益气活血法的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:肾间质纤维化是肾脏疾病进展到肾功能衰竭的共同通路。通过观察益气活血法中药制剂对肾间质纤维化大鼠肾组织基质金属蛋白酶3,基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2表达的影响,探讨其抗肾间质纤维化的作用机制。方法:实验于2006-12/2007-06在首都医科大学解剖与组织胚胎学系实验室完成。①实验动物:Wistar雄性大鼠30只,采用随机数字法分为模型组、西药蒙诺组、中药小剂量组、中药中剂量组、中药大剂量组和假手术组。实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求。②实验方法:其中前5组行单侧输尿管梗阻致肾小管间质纤维化模型手术,假手术组打开大鼠腹腔后,分离其左侧输尿管,不结扎即关闭腹腔。益气活血法中药制剂主要由生黄芪,当归,赤白芍,丹参,黄芩,车前草,牛膝等组成。西药组、中药小剂量组、中药中剂量组和中药大剂量组于手术前2d开始灌胃给药,1次/d,其药量分别为:西药组蒙诺10mg/(kg·d)、小剂量组0.018mL/(kg·d)、中剂量组0.036mL/(kg·d)、大剂量组0.072mL/(kg·d),连续给予2周。模型组及假手术组用相同体积的生理盐水灌胃。③实验评估:6组大鼠于术后14d麻醉后处死,观察梗阻肾脏病理改变,并用免疫组织化学方法检测肾组织对基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子2的表达,通过医学病理图像分析系统对基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子2的积分光密度进行统计学分析。结果:30只大鼠全部进入结果分析。肾组织切片免疫组织化学方法结果显示:基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子2主要表达部位在肾小管上皮,少量表达在肾间质和肾小球。基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶3在模型组的表达较假手术组明显减弱,两组间积分光密度比较差异有显著性意�
- 刘娜刘丽曾晓蓓景朋杨连雪杨琳刘文军
- 关键词：益气活血法基质金属蛋白酶2基质金属蛋白酶3金属蛋白酶组织抑制因子2
- 益气活血方对肾间质纤维化大鼠血清IL-10、IFN-γ含量的影响被引量：5
- 2010年
- 目的观察益气活血中药对肾间质纤维化大鼠血清白细胞介素10(IL-10)、干扰素(IFN-γ)含量的影响。方法诱导建立单侧输尿管梗阻致肾小管间质纤维化模型,模型成功后随机分为模型组,中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组和西药组,另设正常对照组。中药治疗3周后留取大鼠动物血清,采用酶联免疫吸附反应(ELISA)方法检测各组动物血清IL-10、IFN-γ含量。结果肾间质纤维化模型组大鼠造模后,其血清IL-10、IFN-γ含量显著高于假手术组(P<0.001),经中药治疗后,IL-10、IFN-γ含量明显降低,与西药对照组比较,中药对IFN-γ的影响优于西药组,而对IL-10的影响则不如西药组。结论益气活血中药抑制肾间质纤维化模型组大鼠炎症状态可能是其发挥治疗肾纤维化作用的靶点之一。
- 张如锋刘文军刘咏梅刘晓倩吴志奎
- 关键词：益气活血方肾间质纤维化
- 益气活血法对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响被引量：2
- 2009年
- [目的]观察益气活血法中药方剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、果蝇MAD类似基因2/3(Smad2/3)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的调节,探讨其对肾小管上皮细胞转分化的影响。[方法]采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型。将30只大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组、西药组。术后14d,观察梗阻肾组织病理改变,用免疫组化方法检测肾组织TGF-β1、Smad2/3和α-SMA的表达。[结果]益气活血法能减轻肾间质纤维化程度,并能下调TGF-β1、Smad2/3和α-SMA的表达。[结论]益气活血法可通过下调TGF-β1、Smad2/3和α-SMA的表达,从而抑制大鼠肾小管上皮细胞转分化。
- 刘丽刘文军杨琳景鹏杨连雪刘娜
- 关键词：益气活血法肾小管上皮细胞转分化转化生长因子-Β1Α-平滑肌肌动蛋白
- 益气活血方对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF-β/smad信号通路及结缔组织生长因子的影响被引量：15
- 2010年
- 目的:观察益气活血方对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF-β/smad信号通路及结缔组织生长因子(connectivetissue growth factor,CTGF)的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠30只诱导建立单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)致肾小管间质纤维化模型,模型成功后随机分为模型组,益气活血方大、中、小剂量组和西药组,另取健康雄性Wistar大鼠6只设为假手术组。3周后处死大鼠,称取体质量;取血清检测肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(bloodurea nitrogen,BUN)水平;取肾脏组织采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法和免疫印迹法检测各组转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)、smad2、smad7、CTGF mRNA和蛋白表达水平;苏木精-伊红染色和Masson染色检测各组肾间质纤维化指数。结果:模型组大鼠血清Cr和BUN值较假手术组偏高;与模型组比较,大剂量益气活血方可以降低Cr和BUN值,但差异无统计学意义。苏木精-伊红染色和Masson染色显示模型组肾小管上皮细胞萎缩,大部分肾小管管腔扩张,间质纤维组织增生,大量炎性细胞浸润,肾小球数目明显减少,胶原成分显著增加。益气活血方大剂量组、中剂量组和西药福辛普利钠组大鼠肾间质炎性细胞浸润、纤维组织增生、肾小管扩张情况较模型组明显减轻,胶原成分明显减少。与假手术组比较,模型组大鼠肾脏组织中TGF-β、smad2和CTGFmRNA以及蛋白表达水平明显升高(P<0.05),smad7的表达水平则明显降低(P<0.05)。与模型组比较,益气活血方大剂量组和中剂量组大鼠TGF-β、smad2、CTGF mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.01,P<0.05),smad7表达明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论:UUO大鼠肾组织中CTGF mRNA的表达可能通过TGF-β/smad信号通道进行调节;益气活血方可以通过下调TGF-β、smad2和上调smad7的表达来抑制CTGF表达,进而遏制肾纤维化的进展。
- 刘咏梅刘瑞华刘文军刘丽吴志奎陈玉英
- 关键词：复方(中药)SMAD蛋白质类结缔组织生长因子肾间质纤维化
- 转化生长因子β细胞内信号转导负调控蛋白Smad6,7在肾间质纤维化大鼠肾脏表达与益气活血法的影响被引量：3
- 2007年
- 目的:观察肾间质纤维化大鼠肾组织中转化生长因子β细胞内信号转导负调控蛋白Smad6,7表达变化与益气活血法中药制剂的影响。方法:实验于2006-12/2007-06在首都医科大学解剖与组织胚胎学系实验室完成。①实验动物:Wistar雄性大鼠30只,采用随机数字法随机分为模型组、中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组、西药蒙诺组、假手术组,每组5只。益气活血法中药提取液(生黄芪15g,当归10g,赤白芍10g,丹参30g,黄芩10g,车前草15g,牛膝15g等)经水提醇沉得4.4kg/L生药提取液。实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求。②实验方法:其中前5组行单侧输尿管梗阻致肾小管间质纤维化模型手术。假手术组打开大鼠腹腔后分离左侧输尿管,并不结扎即关闭腹腔。中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组、西药蒙诺组,于手术前2d给予灌胃给药0.072mL/(kg·d),0.036mL/(kg·d),0.018mL/(kg·d),10mg/(kg·d),1次/d,连续2周。模型组及假手术组用相同体积的生理盐水灌胃。③实验评估:6组大鼠于术后14d麻醉后处死,观察梗阻肾组织病理改变,用免疫组化方法检测肾组织Smad6,7蛋白表达,通过医学病理图像分析系统对Smad6,7蛋白的积分光密度进行统计学分析。结果:30只大鼠全部进入结果分析。苏木精-伊红染色显示模型组肾小管上皮细胞萎缩,大部分肾小管管腔扩张,间质纤维组织增生,大量炎性细胞浸润,肾小球数目明显减少。中药大剂量组、中剂量组、西药蒙诺组较模型组肾间质炎性细胞浸润、纤维组织增生、肾小管扩张情况明显减轻。Smad6,7蛋白主要在肾皮质肾小管上皮细胞内表达,在模型组它们的表达较假手术组明显减弱且分布面积减少,两组间积分光密度差异具有统计学意义(P<0.05);中药中剂量组、大剂量组、西药蒙诺组Smad6,7蛋白的表达较模型组明显增强、面积增加,积分光密度差异�
- 刘丽刘娜刘文军杨琳曾晓蓓杨连雪景鹏
- 关键词：益气活血法肾间质纤维化SMAD6SMAD7
- 肾间质纤维化大鼠肾脏细胞外基质成分变化与益气活血治法的影响被引量：4
- 2008年
- 目的:观察益气活血法中药制剂对肾间质纤维化大鼠肾组织细胞外基质成分纤维连接蛋白、层粘连蛋白和胶原蛋白Ⅳ表达的影响,分析其抗肾间质纤维化的机制。方法:实验于2007-07/10在首都医科大学解剖与组织胚胎学系实验室完成。①材料:Wister雄性大鼠30只随机分为模型组,中药大、中、小剂量组,西药组和假手术组6组,每组5只。益气活血法中药生黄芪15g,当归10g,赤白芍10g,丹参30g,黄芩10g,车前草15g,牛膝15g等经水提醇沉得4.4kg/L生药提取液。②方法:假手术组手术但不结扎输尿管,其他5组制备单侧输尿管梗阻致肾小管间质纤维化模型。手术前2d开始灌胃给药:中药大、中、小剂量组分别给予益气活血中药提取液0.072,0.036,0.018mL/(kg·d),给予福辛普利钠10mg/(kg·d),模型组及假手术组给予相同体积的生理盐水,1次/d,连续2周。③评估:术后14d处死大鼠,观察梗阻肾组织病理改变,免疫组化法检测肾组织纤维连接蛋白、层粘连蛋白和胶原蛋白Ⅳ的表达,通过医学病理图像分析系统对其积分吸光度进行统计学分析。结果:30只大鼠全部进入结果分析。①模型组层粘连蛋白、纤维连接蛋白和胶原蛋白Ⅳ的积分吸光度高于假手术组(P<0.05)。②中药小剂量组胶原蛋白Ⅳ的积分吸光度低于模型组(P<0.05),层粘连蛋白和纤维连接蛋白积分吸光度与模型组比较差异无显著性意义(P>0.05)。③中药大、中剂量组和西药组层粘连蛋白、纤维连接蛋白和胶原蛋白Ⅳ的积分吸光度均低于模型组(P<0.05),中药大、中剂量组胶原蛋白Ⅳ的积分吸光度低于西药组(P<0.05)。结论:益气活血法可以通过下调层粘连蛋白,纤维连接蛋白和胶原蛋白Ⅳ在肾组织的表达,从而减少细胞外基质的过度聚集,抑制或延缓肾间质纤维化。
- 刘丽刘文军景鹏杨连雪曾晓蓓刘娜
- 关键词：益气活血法肾间质纤维化层粘连蛋白纤维连接蛋白
- 维持性血液透析患者生活质量影响因素分析被引量：14
- 2010年
- 目的 研究维持性血液透析（MHD）患者的生活质量及其影响因素. 方法 选择本院血液透析中心102例MHD患者,采用问卷调查方式,利用慢性肾脏病专用量表KDQOL-SFTM1.3评价患者肾脏病与透析相关生存质量（KDTA）和一般健康相关生存质量（SF-36）,并分析其影响因素. 结果 量表各影响因素中,医护人员的鼓励、社会支持、症状、认知功能、社会关系质量和患者满意程度评分较高,而性功能、肾脏病给生活带来的负担、总体健康期望和自我健康评价评分则较低.影响因素方面,女性患者躯体功能、躯体疼痛评分（分）明显低于男性（63.52±17.96比71.65±18.66,64.33±21.23比76.58±19.20,均P〈0.05）.年龄〉60岁患者工作状况、性功能评分（分）较≤40岁和40～60岁患者显著升高（61.98±13.63比52.27±7.54和55.23±19.97,68.33±4.04比5.45±9.34和15.81±26.92,均P〈0.05）;且60岁以上者患者满意程度评分较高,躯体功能评分较低.原发病中仅糖尿病患者受到医护人员鼓励最多[（93.57±11.29）分].白蛋白〈3.5 g/L患者KDTA总评分、肾脏病对日常生活的影响、认知功能、躯体功能、总体健康期望及与以往比较评分（分）均明显低于白蛋白≥3.5 g/L者（53.62±8.87比61.26±9.42,44.58±12.52比57.47±17.15,65.56±20.60比78.18±15.73,54.38±19.73比68.87±17.57,31.11±10.23比41.19±66.27,44.44±27.06比68.57±26.94,均P〈0.05）.透析≥6年患者症状、躯体疼痛、精力状况、总体健康期望评分（分）较高（分别为86.92±6.67、85.08±57.34、 78.40±13.04、 53.33±24.22）,而社会支持评分（分）以透析3～6年者最高（94.23±10.96,均P〈0.05）.而不同血红蛋白和尿素清除指数水平对MHD患者生活质量无明显影响. 结论 MHD患者对自己的信心不足,个人负担较重;营养状态对患者的生活质量影响较大.因此MHD患者的生活质量仍需加强,尤其营养状态方面更是今后的重点.
- 刘文军路晓光阎丽君冯博岳玉和
- 关键词：维持性血液透析生活质量
- 益气活血降浊复方对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化影响的实验研究被引量：2
- 2012年
- 目的:研究益气活血降浊复方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织E-cadherin,α-SMA蛋白表达情况,观察本方对肾小管上皮细胞转分化的影响,进一步探讨其抑制肾间质纤维化的作用机制。方法:132只雄性SD大鼠以单侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化动物模型,造模成功后大鼠随机分为正常组,假手术组,模型组,西药组,益气活血降浊复方大、中、小剂量组。根据大鼠体重确定具体给药剂量,益气活血降浊复方大剂量组34.6g.kg-1,中剂量组17.3g.kg-1,小剂量组8.6g.kg-1(分别为人服用量的20,10,5倍)ig给药,1次/天,模型组和假手术组、正常组灌入相应生理盐水。蒙诺10mg.kg-1(相当于成人用量的20倍)。考马斯亮蓝法测定24h尿蛋白定量;检测血清Scr、BUN水平;采用免疫组化方法检测肾组织中E-cadherin,α-SMA蛋白表达。结果:与正常组、假手术组相比,模型组大鼠在第1、2、3周E-cadherin蛋白表达明显减少(P<0.01),益气活血降浊复方大、中、小剂量组较正常组、假手术组在各个时间点E-cadherin蛋白表达有所减少,但与模型组比较显著增加(P<0.01),福辛普利钠组较模型组表达也显著增加(P<0.01),具有统计学意义。中药大剂量组在各个时间点增加E-cadherin蛋白效果最好且与西药组相当,中、小剂量组虽然能增加E-cadherin蛋白表达,但效果逊于大剂量组和西药组。而模型组大鼠第1、2、3周肾间质α-SMA蛋白较正常组、假手术组表达明显增加(P<0.01),益气活血降浊复方大、中、小剂量组较正常组、假手术组在各个时间点α-SMA蛋白表达有所增加,但与模型组比较显著减少(P<0.01),西药组较模型组表达也显著减少(P<0.01),具有统计学意义。中药大剂量组在各个时间点降低α-SMA蛋白效果最好且与西药组相当,中、小剂量组虽然能降低α-SMA蛋白表达,但和大剂量组及西药组存在差异。结论:益气活血降浊复方可能通过抑制α-SMA蛋
- 刘晓倩赵宗江闫军堂杨美娟宗妍刘文军
- 关键词：肾间质纤维化EMT
- 益气活血中药对肾间质纤维化大鼠肾组织中I、Ⅲ型胶原,MMP-1和TIMP-1表达的影响被引量：8
- 2009年
- 目的探讨益气活血中药抗肾间质纤维化的作用机制。方法采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型。应用免疫组化等技术,通过医学病理图像分析系统检测I、Ⅲ型胶原蛋白,基质金属蛋白酶1(MMP-1),金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)在肾间质纤维化大鼠肾组织中的表达。结果模型组Ⅲ型胶原蛋白的表达较假手术组显著增强;MMP-1在模型组表达较假手术组显著减弱且分布面积减少,同时模型组TIMP-1的表达与假手术组比较显著增强;中药治疗组与西药蒙诺治疗组都能逆转I、Ⅲ型胶原蛋白,MMP-1和TIMP-1的表达,但两组间无显著差异,中药大剂量的治疗效果明显优于中、小剂量。结论益气活血中药与血管紧张素转换酶抑制剂的治疗效果和机制较为一致,可能通过恢复MMP/TIMP间的网络平衡来减少细胞外基质中胶原蛋白的合成,增加其降解,从而达到减轻或抑制肾小管间质纤维化进程的目的。
- 杨琳刘丽景朋刘娜刘文军
- 关键词：肾间质纤维化基质金属蛋白酶1金属蛋白酶组织抑制因子1
- 益气活血中药对肾间质纤维化大鼠转化生长因子-β、Smad2和Smad3表达的影响被引量：4
- 2010年
- 目的 探讨益气活血中药对肾间质纤维化大鼠转化生长因子-β（TGF-β）、Smad2和Smad3表达的影响.方法 将36只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、西药对照组及中药大、中、小剂量组,每组6只.采用单侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化动物模型.西药对照组及中药大、中、小剂量组于术前2 d灌胃福辛普利钠（10 mg·kg-1·d-1）及中药提取液（7.2、3.6、1.8 ml·kg-1·d-1）各2 ml;假手术组和模型组给予等量生理盐水.各组于术后3周处死大鼠取肾组织,用实时聚合酶链反应（real-time PCR）和蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测TGF-β、Smad2和Smad3的mRNA和蛋白表达.结果 模型组大鼠肾组织TGF-β、Smad2和Smad3的mRNA和蛋白表达较假手术组均明显升高（P〈0.05或P〈0.01）;益气活血中药各剂量组可以明显抑制模型大鼠肾组织TGF-β、Smad2和Smad3的mRNA和蛋白表达,其中除中药小剂量组对Smad3mRNA的抑制作用较大、中剂量组明显降低外（均P〈0.05）,其余指标各剂量组间比较差异均无统计学意义.结论 益气活血中药可能通过抑制TGF-β/Smad信号通路中TGF-β、Smad2和Smad3等表达起到治疗作用.
- 刘咏梅刘文军王文娟刘丽刘瑞华吴志奎陈玉英
- 关键词：益气活血肾间质纤维化转化生长因子-ΒSMAD2SMAD3
