国家自然科学基金(30872544)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
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- 5-氮胞苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究被引量：6
- 2012年
- 目的:研究体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(mensenchymal stem cells,MSCs)经5-氮胞苷(5-aza)诱导定向分化为心肌样细胞形态学及分子生物学特征。方法:SD大鼠股骨骨髓经密度梯度离心及贴壁分离培养传代MSCs,体外用5-aza定向诱导向心肌样细胞分化。相差显微镜观察心肌样细胞形态学变化。免疫组化检测肌钙蛋白T(cTnT)、α-肌动蛋白和缝隙连接蛋白Cx43表达。结果:密度梯度离心及贴壁法分离培养的MSCs生长稳定,增殖快。5-aza诱导后,部分细胞形态发生变化,有肌管样结构形成。随诱导后培养时间延长MSCs中cTnT、α-肌动蛋白和缝隙连接蛋白Cx43表达逐渐增强。结论:密度梯度离心及贴壁分离培养可获得大量纯度较高的骨髓间充质干细胞。经5-aza诱导骨髓间充质干细胞体外可分化为心肌样细胞。
- 王俊陈斌刘翔李芝陈亦江
- 关键词：骨髓间充质干细胞心肌样细胞5-氮胞苷
- 脂多糖预处理对VEGF165、Ang-1与HMGBx1在缺血-再灌注损伤心肌中表达的影响
- 2010年
- 目的探讨脂多糖预处理对血管内皮生长因子(VEGF165)、促血管生成素1(Ang-1)与高迁移率族蛋白B1(HMGBx1)在缺血-再灌注损伤心肌中表达的影响。方法普通B6小鼠制作心肌缺血-再灌注动物模型,实验组手术前给予脂多糖。用TUNEL检测心肌细胞凋亡状况,用凝胶迁移率实验(EMSA)检测核转录因子(NF-κB)的活力,用Western blot检测VEGF165、Ang-1、HMGBx1在心肌中的表达。大鼠心肌成肌细胞H9c2,转染携带人VEGF165和Ang-1的腺病毒,随后过氧化氢刺激,检测HMGBx1的胞浆含量和NF-κB的活性。结果小剂量脂多糖预处理能显著促进VEGF165、Ang-1在缺血-再灌注损伤心肌中的早期表达,并同时显著减少HMGBx1的表达和抑制心肌细胞凋亡。细胞实验提示VEGF165和Ang-1联合使用能显著减少心肌细胞胞浆中HMGBx1的含量和NF-κB的活性。结论 VEGF165和Ang-1可能通过抑制NF-κB的活性,减少HMGBx1的含量而对心肌细胞产生直接保护作用。
- 刘翔陈亦江吴延虎
- 关键词：心肌缺血-再灌注血管内皮生长因子165促血管生成素1
