江西省自然科学基金(0540087)
- 作品数：5 被引量：10H指数：1
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- 相关机构：南昌大学第一附属医院南昌大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：江西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠骨髓源性血管内皮祖细胞的体外培养与鉴定被引量：6
- 2008年
- 目的：目前内皮祖细胞主要从骨髓、脐带血和外周血获取,但其分离培养方法尚不成熟,外周血来源因损伤小、易获取而被普遍使用,但得到的内皮祖细胞纯度较低。实验拟探讨大鼠骨髓来源内皮祖细胞体外培养、诱导扩增和生物学特性鉴定方法。方法：实验于2006-08/2007-08在南昌大学第一附属医院泌外研究所完成。①实验材料：2周龄SD大鼠由南昌大学医学院动科部提供,雌雄不拘,清洁级,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法：应用梯度离心法采集大鼠骨髓单个核细胞,贴壁筛选法分离内皮祖细胞,置于添加了血管内皮细胞生长因子、人碱性成纤维细胞生长因子、白血病抑制因子、表皮生长因子的M199培养液中扩增培养,对培养2周的细胞采用免疫荧光染色鉴定细胞标志物血管性血友病因子、血管内皮生长因子受体-2、CD34、CD133,采用RT-PCR法检测内皮细胞特异性分子标志血管性血友病因子、FLK-1、Tie-2、CD34、CD133、eNOS基因表达。结果：①培养4d,光电显微镜下可见细胞集落形成,梭形贴壁细胞从集落中央以放射状向外周生长。培养7-10d,细胞集落相互连接,呈典型的＂鹅卵石＂样外观。2周左右可见细胞排列成条索状结构并可呈“微血管样”排列生长。②贴壁细胞免疫荧光染色鉴定细胞标志物血管性血友病因子、FLK-1、CD34、CD133阳性,RT-PCR法检测内皮细胞特异性分子标志血管性血友病因子、FLK-1、Tie-2、CD34、CD133、eNOS基因阳性表达。结论：采用梯度离心法从骨髓中分离单个核细胞,经诱导培养可实现内皮祖细胞的分离培养和体外扩增。
- 邓志锋鲁友明汪泱娄远蕾郭菲谢安
- 关键词：内皮祖细胞骨髓源性体外培养
- 大胚龄人神经干细胞长期冻存后的复苏培养被引量：1
- 2008年
- 目的探讨长期冻存后的大胚龄人胚神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的生长及其生物学特性。方法分别于冻存后6、12及24个月,快速解冻复苏胚龄为16～20周的胎脑细胞,采用无血清培养液悬浮培养,观察培养细胞的活性及成球时间,采用免疫细胞化学方法鉴定这些细胞球及其分化成熟后的细胞表面标志。结果培养传代的细胞透亮﹑成球时间短,与取自新鲜胎脑的神经干细胞无明显区别。细胞球Nestin染色阳性,成熟分化后神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及2',3'-环腺苷酸-3'-磷酸二酯酶(CNPase)抗原呈阳性。结论长期冻存后的人大胚龄神经干细胞仍具有较强增殖能力及多分化潜能。
- 邓志锋涂伟汪泱赖贤良谢安
- 关键词：神经干细胞胚胎冻存
- 核因子-κB在神经干细胞增殖和分化中的作用被引量：1
- 2008年
- 核因子-κB(NF-κB)是一种可诱导的转录因子。在神经系统中,NF-κB由神经元、神经胶质细胞和神经干细胞表达。神经干细胞具有强大的增殖能力和多向分化潜能,在神经系统损伤的修复中起重要作用。近年来的研究发现,NF-κB信号系统参与了中枢神经系统神经干细胞增殖和分化的调控,通过对其机制的深入研究,有望为脑缺血、脑炎、神经变性等疾病的治疗开辟新的途径。文章对NF-κB在神经干细胞增殖和分化中的多重作用进行了综述。
- 刘玉霞汪泱邓志锋
- 关键词：核因子-ΚB神经干细胞增殖分化
- 骨髓基质细胞促进人胚神经干细胞向神经元的分化被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨骨髓基质细胞(BMSCs)对人胚神经干细胞(NSCs)分化的影响。方法:采用机械法分离人胚NSCs,成球法进行传代培养,采用免疫荧光染色检测神经上皮干细胞蛋白(Nestin)的表达鉴定NSCs。按培养方式不同,分为NSCs自然分化组、BMSCs和NSCs直接接触共培养组及Transwell共培养组,采用免疫细胞荧光法及免疫印迹法检测各组神经元和星形胶质细胞标志物的表达。结果:在直接接触共培养组和transwell共培养组中,免疫荧光染色显示神经元标志物NSE阳性细胞率明显高于自然分化组,而星形胶质细胞标志物GFAP阳性细胞率低于自然分化组。免疫印迹检测显示Transwell共培养组中NSE表达量显著高于自然分化组,而GFAP表达量低于自然分化组。结论:BMSCs具有促进NSCs向神经元分化的作用。
- 邓志锋涂伟汪泱赖贤良谢安沈晓黎郭华
- 关键词：神经干细胞骨髓基质细胞神经元细胞分化
- 骨髓间充质干细胞通过血管内皮细胞生长因子受体2调控神经干细胞的增殖与分化被引量：1
- 2008年
- 目的观察血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）在骨髓间充质干细胞（MSCs）调控神经干细胞（NSCs）增殖与分化中的作用。方法细胞共培养分为5组：NSCs＋MSCs、NSCs＋MSCs＋SU5416（VEGFR2阻断剂）、NSCs＋HMVECs、NSCs＋HMVECs＋SU5416、NSCs＋3T3。共培养6h后，采用逆转录-聚合酶链反应检测各组NSCs标志物nestin、成熟星形胶质细胞标志物GFAP及Notch信号分子Notch1和hes1的表达。结果在MSCs及HMVECs共培养组中nestin的表达较高，当VEGFR2信号通路被阻断后，nestin的表达明显下降，而成熟神经细胞GFAP的表达却明显增加。同时，在MSCs及HMVECs共培养组中，Notch1、hes1的表达也明显高于313对照组及VEGFR2信号通路阻断剂组。结论VEGFR2在MSCs调控NSCs增殖与分化过程中可能起重要作用。
- 邓志锋汪泱刘诸敏涂伟赖贤良娄远蕾
- 关键词：骨髓间充质干细胞神经干细胞增殖分化
