国家自然科学基金(30872580)
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
- 相关作者：黄赤兵余雪松范明齐冯嘉瑜王平贤更多>>
- 相关机构：第三军医大学新桥医院第三军医大学西南医院中国人民解放军第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 口服MHC-CTB交联物对大鼠移植肾存活的影响
- 2012年
- 目的观察口服MHC-CTB交联物对大鼠肾移植术后的影响。方法用固相法合成MHC肽,对其相对分子质量和纯度进行检测后,口服MHC-CTB交联物灌胃2次/周,持续2个月;对照组口服灌胃生理盐水为对照,以BN(RT1n)大鼠为供体,Lewis(RT11)大鼠为受体,建立大鼠肾移植模型,观察两组术后外周血CD4+CD25+T细胞含量变化、两组生存时间、移植肾病理变化情况,并在体外试验中,通过混合淋巴细胞培养,进一步验证,MHC肽对T淋巴细胞有无抑制其增殖功能。结果通过固相法合成的MHC肽相对分子质量为1 389.81,纯度为98.1%,建立大鼠肾移植模型后,术后第1天外周血流式结果显示实验组CD4+CD25+T细胞较对照组明显升高(P<0.01),且实验组生存天数为(21.4±1.45)d,对照组生存天数为(8.2±2.15)d,二者间比较差异有统计学意义(P<0.01),移植肾病理切片显示对照组移植肾排斥变化早于实验组,体外混合淋巴细胞培养显示,实验组T淋巴细胞增殖弱于对照组(P<0.01),且添加MHC肽后,T淋巴细胞增殖抑制效果更明显(P<0.01)。结论口服MHC肽能有效诱导免疫耐受,抑制大鼠肾移植排斥,延长生存时间。
- 余雪松黄赤兵范明齐王平贤冯嘉瑜肖亚
- 关键词：器官排斥口服耐受
- 内支架法在大鼠肾移植模型中的应用被引量：1
- 2011年
- 目的建立一种稳定、操作简单的肾移植模型。方法以BN(RT1n)大鼠为供体,Lewis(RT11)大鼠为受体,实验组静脉吻合用3号prolene线作内支架,对照组直接端端吻合肾动静脉,将输尿管带膀胱瓣吻合于膀胱。结果实验组和对照组移植成功率分别为90%和85%,两组准备供体耗时为(23.0±2.4)min,供肾热缺血时间为(5.6±1.3)s,实验组和对照组移植手术耗时分别为(40.6±6.3)min和(54.1±4.2)min,冷缺血时间分别为(38.4±5.7)min和(49.7±6.3)min,手术耗时和冷缺血时间比较,两组有显著差异(P<0.05)。结论内支架法简单实用,明显缩短肾缺血时间。
- 余雪松黄赤兵张艮甫孙帧
- 关键词：肾移植内支架动物模型
- 大鼠T细胞源性exosome提取方法比较被引量：1
- 2013年
- 目的采用3种方法从大鼠T细胞培养上清中提取纯化exosome,以获取高质量的exosome。方法分别采用ExoQuick Precipitation提取法、超滤密度梯度离心法、差速离心法提取T细胞培养上清中的exosome。利用透射电镜进行形态学观察,2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠(BCA)法进行蛋白定量,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析蛋白表达的差异,Western blotting检测白细胞介素2(IL-2)的表达。结果 3种方法均可提取出exosome;ExoQuick Precipitation提取法、超滤密度梯度离心法所得样本浓度显著高于差速离心法所得样本浓度(P<0.05);SDS-PAGE结果显示3种方法所得样本具有蛋白表达强度的差异;Western blotting显示3种方法所得样本均表达IL-2。结论 ExoQuick Precipitation提取法、超滤密度梯度离心法可获得高纯度、无蛋白丢失的exosome样本。
- 孙祯黄赤兵宋亚军陈益荣李传贵
- 关键词：EXOSOMEPRECIPITATION
- 创新思维在小鼠器官移植模型建立教学中的应用
- 2011年
- 小鼠肾移植模型是研究肾移植排斥反应发生机制、治疗措施以及诱导免疫耐受的重要平台,但由于动物体积小,耐受性差,手术操作精细复杂等原因,成功的建立小鼠肾移植模型目前仍有相当大的难度,同时,在传统的教学中也存在诸多问题。
- 黄赤兵许晓婷冯嘉瑜范明齐王平贤肖亚张艮甫
- 关键词：创新思维教学
- 大鼠肠系膜淋巴结和外周淋巴结固有exosome的制备及其对T细胞增殖的影响被引量：1
- 2013年
- 目的从大鼠肠系膜淋巴结、外周淋巴结中分离纯化exosome,鉴定其对T细胞增殖的影响。方法取出BN(RT1n)大鼠的外周淋巴结及肠系膜淋巴结并研磨、离心以获得非细胞组织上清,采用超滤密度梯度离心法提取exosome。透射电镜对收集的exosome进行形态学鉴定,BCA法进行蛋白定量,SDS-PAGE电泳分离蛋白,Western blot检测IL-10的表达,并通过混合淋巴细胞培养检测其对T细胞增殖的影响。结果两种淋巴组织来源的非细胞组织上清均含有exosome,肠系膜淋巴结源性exosome蛋白浓度[(1.92±0.10)μg/μL]显著高于外周淋巴结源性exosome[(1.57±0.06)μg/μL,P<0.05],SDS-PAGE显示两种组织源性exosome所含蛋白种类和数量有明显差异,Western blot显示肠系膜淋巴结固有exosome中IL-10的表达显著高于外周淋巴结固有exosome,混合淋巴细胞培养结果显示肠系膜淋巴结固有exosome和外周淋巴结固有exosome对T细胞的增殖均有促进作用(P<0.05),外周淋巴结源性exosome的促增殖作用显著大于肠系膜淋巴结源性exosome(P<0.05)。结论肠系膜淋巴结、外周淋巴结均含有组织固有exosome,两种组织来源exosome有蛋白浓度和蛋白种类的差异,且均能促进淋巴细胞增殖,促进程度有显著差异。
- 孙祯黄赤兵宋亚军余雪松贺伟峰陈益荣胡文刚王晋
- 关键词：EXOSOME淋巴结混合淋巴细胞培养
- 口服供体脾细胞对大鼠移植肾的影响
- 2011年
- 背景:口服供体抗原诱导免疫耐受已被证实有显著效果,而脾脏为人体最大淋巴器官,富含T淋巴细胞,可提供丰富抗原。目的:观察口服供体脾细胞对大鼠肾移植移植肾功能影响。方法:肾移植前脾细胞组Lewis(RT11)大鼠采取口服灌胃5×105个BN(RT1n)大鼠供体脾细胞,1次/d,持续7d;肾移植组Lewis(RT11)大鼠口服灌胃1mLPBS为对照。结果与结论:移植后第5天肾移植组出现移植肾排斥症状,脾细胞组平均存活时间长于肾移植组,移植后脾细胞组血肌酐、尿素氮水平升高明显慢于肾移植组;苏木精-伊红染色显示肾移植组移植肾发生急性排斥变化早于脾细胞组。说明口服供体脾细胞能诱导免疫耐受,延长移植肾存活时间。
- 余雪松黄赤兵邹升安范明齐王平贤冯嘉瑜肖亚
- 关键词：口服耐受移植物排斥脾细胞器官移植
