国家自然科学基金(30170403)
- 作品数：4 被引量：39H指数：4
- 相关作者：王长征钱桂生程晓明孙鲲吴奎更多>>
- 相关机构：第三军医大学新桥医院第三军医大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 哮喘特异性免疫治疗诱导的卵蛋白致敏小鼠模型T细胞无能机制的探讨被引量：13
- 2005年
- 目的:建立哮喘特异性免疫治疗小鼠模型,探讨特异性免疫治疗诱导T细胞无能的机制。方法:通过卵蛋白(OVA)皮下注射致敏,雾化吸入激发的方法,建立哮喘特异性免疫治疗的小鼠模型,并通过对肺组织病理切片及支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞计数及分类,用ELISA法检测血清OVA特异性IgE(sIgE)及脾脏T细胞IL2和IL4的分泌等证实。分离培养脾脏T细胞,用3HTdR掺入法检测其增殖反应;用流式细胞仪(FACS)检测其表面CTLA4分子的表达。结果:与对照组小鼠相比较,哮喘特异性免疫治疗后,小鼠肺组织的炎症病理变化减轻;BALF中嗜酸性粒细胞(EOS)数、血清sIgE的水平、T细胞分泌IL2和IL4的水平以及小鼠对OVA刺激的反应性均显著降低(P<0.01);但T细胞表面CTLA4分子的表达明显上调。结论:建立了哮喘特异性免疫治疗的小鼠模型。T细胞表面CTLA4分子表达的上调可能是哮喘特异性免疫治疗诱导T细胞无能的机制之一。
- 程晓明钱桂生王长征
- 关键词：哮喘免疫治疗CTLA-4
- 免疫治疗对支气管哮喘小鼠树突细胞共刺激分子的影响被引量：7
- 2006年
- 目的应用卵白蛋白(OVA)建立特异性免疫治疗小鼠模型,探讨特异性免疫治疗对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠树突细胞(DC)表面分子CD80、CD86表达的影响。方法120只BALB/c小鼠按随机数字表法分为哮喘模型组(A组)40只:用0.1%OVA 10μg连续腹腔注射(共70μg)及1%OVA雾化吸入(共300 mg);免疫治疗模型组(B组)40只:用与A组同剂量的OVA致敏和激发,同时连续尾根部皮下注射OVA 1 mg;对照组(C组)40只:以磷酸盐缓冲液代替OVA,其余同A组。留取各组肺组织切片,经苏木精-伊红(HE)染色观察炎症反应;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清OVA特异性免疫球蛋白IgE(sIgE)及脾脏T淋巴细胞中白细胞介素2(IL-2)和IL-4的分泌。分离各组小鼠脾脏DC,用流式细胞仪检测其表面CD80、CD86分子表达。分离正常小鼠脾脏T淋巴细胞,与上述各组DC共培养;用ELISA法检测T淋巴细胞IL-4、IL-5的分泌量;用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法检测其增殖反应。结果(1)B组小鼠肺组织中支气管及血管周围以大量淋巴细胞和嗜酸粒细胞为主的炎性细胞浸润明显轻于A组,但并未完全消失;A组血清sIgE吸光度(A)值为712±129,B组为124±59,C组为20±13,A、C组间比较差异有统计学意义(P<0.05),B、C组比较差异无统计学意义(P>0.05)。B组T淋巴细胞分泌IL-2、IL-4水平分别为(8±3)、(8.4±4.3)pg/m l,A组分别为(22±8)、(32.4±12.1)pg/m l,C组分别为(6±4)、(5.1±1.1)pg/m l,A、B两组比较差异有统计学意义(P<0.05),B、C组间比较差异无统计学意义(P>0.05);(2)B组DC表面CD86、CD80阳性表达率分别为58.23%、95.63%,A组分别为77.59%、96.98%,C组分别为77.37%、77.84%;(3)与B组DC共培养的正常小鼠T淋巴细胞体外经OVA刺激后,IL-4、IL-5水平分别为(10.8±2.3)、(18.8±3.8)pg/m l,A组分别为(17.3±4.7)、(35.7±7.9)pg/m l,C组分别为(5.7±2.7)、(11.0±2.2)pg/m l,A、B两组比较差异有统计学意义(P<0.05),B、C组间比较差异无统计学意义(P>0
- 程晓明钱桂生朱波张彦琦王长征
- 关键词：免疫疗法哮喘CD80CD86共刺激分子
- 不同浓度过敏原对哮喘小鼠T淋巴细胞产生IL-5的影响被引量：6
- 2003年
- 目的 探讨大剂量过敏原对哮喘小鼠T细胞产生IL 5的影响及其机制。方法 应用不同浓度过敏原体外处理哮喘模型小鼠T细胞 ,用单核细胞作抗原递呈细胞。ELISA法检测培养清中IL 5水平 ,并用TUNEL法检测T细胞的凋亡率。结果 ①在 0～ 10 0 μg/ml卵蛋白 (OVA)处理浓度级之间 ,哮喘组小鼠淋巴细胞产生的IL 5的水平随着处理浓度的增高而增高 ,但经高浓度OVA( 10mg/ml)处理后 ,T淋巴细胞产生的IL 5水平却较哮喘低浓度组及对照组明显降低 (P <0 .0 1) ;对照组各浓度级之间则无显著差异 ;②不同浓度OVA处理后哮喘组T细胞的凋亡率均无明显差异。结论 大剂量过敏原可以诱导哮喘T细胞IL 5产生减少为表现的免疫耐受现象 ,其机制主要是诱导淋巴细胞无不反应性 ,而不是诱导T细胞凋亡。
- 孙鲲王长征
- 关键词：哮喘T细胞凋亡小鼠IL-5
- 小鼠骨髓来源的树突状细胞体外扩增与鉴定被引量：13
- 2005年
- 目的 改进目前体外大量扩增树突状细胞(DC)的方法,以获得大量高纯度的树突状细胞,从形态学和免疫表型等方面给予鉴定。方法 用2 0ng/ml重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM CSF)诱导小鼠骨髓细胞体外分化为树突状细胞,用相差显微镜观察形态学变化,进行扫描、电镜观察和FACS检测细胞表面分子。结果 培养10d ,可获得大量典型DC ,经流式细胞仪检测,DC表达表面分子CD11C、CD80、MHCⅡ。结论 本实验方法可以获得大量高纯度的树突状细胞。
- 夏俊波吴奎孙鲲王长征
- 关键词：树突状细胞分离纯化
