国家自然科学基金(30870134)
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
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- 肺炎嗜衣原体CPAF重组蛋白致小鼠肺组织炎症及对炎症细胞因子的影响被引量：10
- 2011年
- 目的：研究肺炎嗜衣原体（Chlamydophila pneumoniae,Cpn）蛋白酶样活性因子（CPAF）的181400aa基因（CPAFm）的重组蛋白在BALB/c小鼠体内引起的肺部炎症改变及对炎症细胞因子TNF-α和IL-6的水平的影响,为进一步探索CPAF在Cpn感染中的致病作用提供实验依据。方法：将纯化的CPAFm重组蛋白于鼻内或尾静脉注射BALB/c小鼠,HE染色观察肺组织病理形态学改变,计小鼠外周血与支气管肺泡灌洗液（Bronchoalveolar lavage fluids,BALF）中白细胞总数,ELISA方法检测血清和BALF中的TNFα-和IL-6的水平。结果：实验组BALB/c小鼠的肺组织出现中性粒细胞、淋巴细胞等炎症细胞浸润,对照组与正常组BALB/c小鼠肺组织未见明显病理改变。鼻内滴入重组蛋白实验组BALB/c小鼠BALF中白细胞总数明显高于GST对照组（P〈0.05）、PBS对照组（P〈0.05）和正常组（P〈0.01）;鼻内滴入和尾静脉注射重组蛋白实验组BALF中炎症因子IL-6、TNF-α的水平明显高于GST、PBS对照组与正常组（均P〈0.01）;鼻内滴入重组蛋白实验组外周血中炎症因子IL-6和TNF-α水平显著高于GST、PBS对照组和正常组（P〈0.05）;尾静脉注射重组蛋白实验组外周血中炎症因子IL-6的水平明显高于相应的对照组（均P〈0.01）。结论：CPAFm重组蛋白有致病性,能引起BALB/c小鼠肺组织的炎症损伤和炎症因子TNF-α、IL-6的水平的升高,肺损伤与BALB/c小鼠体内炎症细胞增多和炎症因子TNF-α、IL-6的水平的升高相关。
- 王华丽吴移谋郑江花朱翠明李忠玉周洲余敏君
- 关键词：肺炎嗜衣原体重组蛋白炎症细胞因子
- 肺炎嗜衣原体CPAF诱导THP-1细胞产生前炎症细胞因子和凋亡被引量：1
- 2010年
- 目的 研究肺炎嗜衣原体（Chlamydophila pneumoniae,Cpn）衣原体蛋白酶样活性因子（Chlamydial protease-like activity factor,CPAF）能否在体外诱导人单核细胞THP-1产生前炎症细胞因子和凋亡,为进一步探索Cpn感染宿主致病的分子机制提供实验依据.方法 将Cpn CPAF全基因克隆于pGEX6p-2载体上,在大肠杆菌（E coli）中诱导表达重组蛋白,经去内毒素纯化柱和琼脂糖凝胶FF获得纯化且无脂多糖（LPS）污染的重组蛋白GST-CPAF.以不同浓度的该蛋白作用于THP-1,ELISA检测TNF-α吨和IL-6水平.MTT法检测经该蛋白处理后THP-1的增生或抑制作用,用Hoechst33258荧光染色、DNA片段化分析、Armexin V-FITC-PI染色法检测细胞凋亡情况.结果 制备的莺组蛋白GST-CPAF以时间和剂量依赖方式刺激THP-1分泌TNF-α和IL-6,并以剂量依赖方式抑制THP-1增殖;当GST-CPAF刺激THP-1细胞24 h后,能诱导细胞调亡.结论 制备的Cpn重组蛋白GST-CPAF能诱导THP-1产生前炎症细胞因子和凋亡,可能是Cpn致病机制中的一个因素.
- 胡旃吴移谋陈虹亮郑江花周洲唐国芳
- 关键词：肺炎嗜衣原体THP-1前炎症细胞因子细胞凋亡
- 肺炎嗜衣原体Cpn0810重组蛋白诱导THP-1细胞产生促炎因子和凋亡的研究被引量：2
- 2011年
- 目的:在E.coliBL21中表达肺炎嗜衣原体Cpn0810,并研究该蛋白能否诱导人单核细胞(THP-1)产生TNF-α和IL-6等促炎因子和细胞凋亡。方法:PCR扩增Cpn0810蛋白编码基因,构建pGEX6p-2/Cpn0810重组质粒,在E.coliBL21中诱导表达,经ToxinEraser纯化柱纯化后,用不同浓度的GST-Cpn0810作用THP-1细胞,ELISA法检测TNF-α和IL-6的水平,Hoechst33258荧光染色、AnnexinV-FITC-PI染色法检测细胞凋亡情况。结果:构建了重组质粒pGEX6p-2/Cpn0810,并在E.coliBL21菌中高效表达。该蛋白能诱导THP-1细胞以时间、剂量依赖方式表达TNF-α和IL-6;当10mg/L GST-Cpn0810处理THP-1细胞24 h后,形态学上,细胞表现为皱缩、核碎裂、细胞起泡及凋亡小体等凋亡特征。结论:表达并纯化的Cpn0810蛋白能诱导THP-1细胞分泌TNF-α和IL-6等促炎因子和诱导其发生凋亡。
- 陈玉玉吴移谋刘良专陈丽丽张秋桂
- 关键词：肺炎嗜衣原体前炎症细胞因子凋亡THP-1细胞
- 三种检验方法在诊断女性生殖道沙眼衣原体感染的比较研究被引量：2
- 2009年
- 目的:比较不同方法对宫颈拭子样本沙眼衣原体的检测效果。方法:采集300例20～50岁无感染症状女性宫颈分泌物,分别采用细胞培养、聚合酶链式反应及胶体金法进行沙眼衣原体检测,培养阳性或两个非细胞培养方法检测为阳性,定为真阳性,称为""扩大金标准"。结果:300例受检查者,按"扩大金标准"CT感染者共36例,发病率为12%(36/300),细胞培养、聚合酶链式反应、胶体金法敏感性分别为72.22%、91.67%、52.78%。特异性分别为100%、98.11%、98.86%。阳性预测值分别为100%、86.84%、86.36%。阴性预测值分别为96.35%、98.85%、93.88%。结论:三种检测方法均可用于CT感染的诊断。
- 何璐吴移谋李忠玉周曦陈忠东
- 关键词：沙眼衣原体细胞培养法聚合酶链式反应
- γ干扰素抗衣原体感染作用的研究进展被引量：1
- 2009年
- 衣原体为专性胞内寄生菌,具有广泛致病谱,是重要的致病菌。γ干扰素在抗衣原体感染中起重要作用,其介导的抗衣原体感染效应机制包括耗竭色氨酸、诱导铁缺失途径以及激活一氧化氮合酶等;但衣原体也有其自身特有的避免γ干扰素干扰的免疫逃避机制。本文综述γ干扰素抗衣原体感染作用机制的研究现状。
- 唐国芳李忠玉吴移谋
- 关键词：衣原体Γ干扰素免疫应答免疫逃避
