国家自然科学基金(C03030304)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
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- 腺病毒介导RNA干扰抑制人结肠癌VEGF受体表达及肿瘤生长被引量：2
- 2007年
- 目的:观察腺病毒介导的RNA干扰抑制人结肠癌中血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)表达及肿瘤生长的作用。方法:将RNA干扰pAd-Easy/VEGFR腺病毒载体用Lipofectamine 2000转染293细胞,制备携带人VEGFR的腺病毒,转染CW2细胞,通过荧光显微镜和流式细胞仪观察转染效率,通过RT-PCR和蛋白质印迹法检测VEGFR mRNA的表达;以MTT比色法测定活细胞数并绘制细胞生长曲线。同时,制备裸鼠CW2细胞移植瘤模型,注射腺病毒后,每天观察肿瘤生长情况。应用免疫组化法检测微血管密度(MVD)。结果:pAd-Easy/VEGFR重组腺病毒成功构建,转染效率为99.7%。RT-PCR、Western印迹实验结果显示转染pAd-Easy/VEGFR后,VEGFR的表达明显被抑制。细胞生长曲线表明,重组载体转染后细胞生长明显减缓。体内实验表明,pAd-Easy/VEGFR治疗后肿瘤生长慢并伴有较低的MVD。结论:pAd-Easy/VEGFR介导的VEGFR shRNA能有效抑制CW2细胞中VEGFR的表达,并能抑制肿瘤生长。
- 王卫星毛燕君杨继金
- 关键词：结肠肿瘤RNA干扰
