国家自然科学基金(30772253)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
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- 西罗莫司对创伤小鼠脾脏树突状细胞诱导T淋巴细胞应答能力的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 了解西罗莫司对创伤小鼠脾脏树突状细胞（DC）诱导异源性T淋巴细胞应答能力的体外调节作用.方法 将24只BALB/c小鼠按随机数字表法分为对照组与创伤组,每组12只.将创伤组麻醉后造成失血合并闭合性骨折,对照组仅麻醉不致伤,24 h后分离2组小鼠脾脏DC.将2组DC分为西罗莫司阴性对照组和创伤组（不用西罗莫司处理）,以及西罗莫司阳性对照组和创伤组（用10μg/L西罗莫司处理6 h）.检测各组DC自噬活性（用荧光强度值表示）及DC介导的混合淋巴细胞反应（MLR）变化（用吸光度值表示）.流式细胞仪检测细胞表面主要组织相容性复合物（MHC）Ⅱ与共刺激分子CD40、CD80、CD86表达.用ELISA法检测LPS刺激后DC中IL-12p40、IL-12p70和IL-10的水平.对数据进行单因素方差分析.结果 （1）西罗莫司阴性创伤组小鼠脾脏DC自噬活性（荧光强度值为13±2）及其介导的MLR强度均较西罗莫司阴性对照组（荧光强度值为22±6）明显减弱（F=212.836,P〈0.05）.与西罗莫司阴性对照组和创伤组比较,西罗莫司阳性对照组和创伤组自噬活性（45±8、44±8）均明显增强（F=212.836,P〈0.05或P〈0.01）.西罗莫司阳性创伤组MLR强度较西罗莫司阴性创伤组明显增强（F值分别为101.426、86.533,P值均小于0.05）.（2）西罗莫司阴性创伤组小鼠脾脏DC表面的MHCⅡ[（60±9）%]及CD40[（4±1）%]表达较西罗莫司阴性对照组[（85±6）%、（8±1）%]明显降低（F值分别为37.918、40.426,P值均小于0.05）,西罗莫司阳性创伤组MHCⅡ表达[（78±7）%]较西罗莫司阴性创伤组明显提高（F=37.918,P〈0.05）.（3）两罗莫司阴性创伤组小鼠脾脏DC的IL-12p40、IL-12p70表达水平[（120±13）、（10±3）pg/mL]较西罗莫司阴性对照组[（200±25）、（20±6）pg/mL]明显降低（F值分别为218.646、310.253,P值均小于0.05）;与西罗莫司阴性对照组和创伤组比较,西罗莫司阳性对
- 涂永久范霞杨雪王希魏强梁华平
- 关键词：西罗莫司树突细胞
- 创伤患者外周血淋巴细胞自噬变化及其与糖代谢的关系
- 2009年
- 目的观察创伤患者外周血淋巴细胞的自噬变化规律以及与创伤后血糖变化的关系。方法根据损伤严重度评分（ISS）或简明损伤定级标准（AIS）将创伤患者分为轻伤组、重伤组、严重伤组，同时设立健康对照组，分别于创伤后1、3、5、10d采集外周血，采用密度梯度离心结合贴壁分离法分离创伤患者外周血淋巴细胞，应用激光共聚焦显微镜和透射电镜观察细胞自噬现象；将分离得到的淋巴细胞进行MDC染色并裂解，应用荧光分光光度计（激发光波长380nm、发射光波长525nm）测定荧光强度进行定量分析；于创伤后1、3、5d检测患者血糖水平，分析创伤后自噬与血糖的相关性。结果与健康对照组比较，创伤患者外周血淋巴细胞自噬水平明显升高，有显著变化（P〈0．01）。结论创伤后外周血淋巴细胞自噬水平与创伤严重程度、创伤后血糖成正相关。
- 余剑张连阳韩荣鹏梁华平
- 关键词：创伤淋巴细胞自噬糖代谢
- 创伤小鼠骨髓来源树突状细胞诱导T细胞应答的能力变化被引量：2
- 2009年
- 目的:研究失血合并闭合性骨折小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)诱导异源T细胞应答能力的变化.方法:致伤后24h分离小鼠骨髓细胞,体外应用重组小鼠粒细胞/巨噬细胞-集落刺激因子(rmGM-CSF)诱导BMDC,通过混合淋巴细胞反应(MLR)检测未成熟、成熟树突状细胞(DC)诱导异源T细胞的应答能力,流式细胞术检测BMDC表面主要组织相容性复合物Ⅱ类分子(MHCⅡ)及共刺激分子CD40、CD80、CD86表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脂多糖(LPS)刺激的BMDC培养上清中白细胞介素-12(IL-12)p40、IL-12p70以及白细胞介素-10(IL-10)水平的变化.结果:无论是否经过LPS诱导,创伤组小鼠BMDC介导的MLR值均明显低于对照组值(P<0.05),创伤组小鼠BMDC在LPS刺激前后的CD40表达均明显低于对照组[(4.0±1.0)%vs(22.0±3.5)%;(56.0±7.5)%vs(91.0±8.0)%,P<0.01],但MHCⅡ、CD80和CD86表达在2组间差异无显著性.创伤组小鼠BMDC在体外经LPS刺激24h后其IL-12p40、IL-12p70分泌水平均明显低于对照组[(45.0±6.5)vs(78.0±6.8)ng/L;(9.0±1.0)vs(18.0±1.9)ng/L,P<0.05],但创伤组小鼠BMDC分泌IL-10的能力与对照组相比差异无统计学意义.结论:创伤小鼠BMDC诱导T细胞应答的能力降低,该变化可能与其共刺激分子CD40表达降低及IL-12分泌不足有关.
- 裘辉涂永久李小凤韩健梁华平
- 关键词：创伤树突状细胞T细胞应答细胞因子
- 创伤患者外周血单核细胞自噬变化的研究被引量：1
- 2008年
- 目的研究创伤患者外周血单核细胞的自噬变化。方法①根据损伤严重度评分(injury severity score,ISS)或简明损伤定级标准(abbreviated injury scale,AIS)将创伤患者分为轻度创伤组、中度创伤组、严重创伤组,同时设立健康对照组,分别于创伤后24h、3、5、10d采集外周血,采用密度梯度离心结合贴壁分离法分离创伤患者外周血单核细胞,应用激光共聚焦显微镜和透射电镜观察细胞自噬现象。②将分离得到的单核细胞进行MDC染色并裂解,应用荧光分光光度计(激发光波长380nm、发射光波长525nm)测定荧光强度进行定量分析。③于创伤后24h、3、5d检测患者血糖水平,分析创伤后自噬与血糖的相关性。结果与健康对照组相比,创伤患者外周血单核细胞自噬水平明显升高(P<0.01),创伤后外周血单核细胞自噬水平与创伤程度成正比,与创伤后血糖呈正相关(轻度创伤组:r=0.962,中度创伤组:r=0.928,重度创伤组:r=0.973,P<0.05)。结论创伤后通过调节单核细胞自噬水平,使机体免疫功能得到恢复,从而改善预后。
- 余剑曹红卫梁华平张连阳
- 关键词：自噬创伤单核细胞糖代谢
