国家自然科学基金(30170396)
- 作品数：18 被引量：42H指数：4
- 相关作者：孔佩艳彭贤贵魏立陈幸华曾东风更多>>
- 相关机构：第三军医大学新桥医院解放军第89医院宜宾市第二人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- SDF-1/CXCR-4系统与造血干细胞动员
- 2003年
- 魏立孔佩艳
- 关键词：基质细胞衍生因子-1CXCR4造血干细胞动员
- 抗CXCR_4单克隆抗体对与正常骨髓基质细胞共培养的HL-60细胞Bcl-2、PCNA、Fas蛋白表达的影响
- 2004年
- 目的 目前研究发现 ,骨髓基质细胞分泌的基质衍生因子 1(stromalcellderivedfactor 1,SDF 1)及其受体CXCR4可能参与髓内残留病变的形成。因此 ,本研究着重探讨了阻抑SDF 1活性对与正常骨髓基质细胞共培养的HL 60细胞增殖、生存的影响。方法 培养并共培养HL 60细胞。实验分为两组 ,实验组采用抗CXCR4单克隆抗体 12G5( 2 0ug/ml)阻断SDF 1生物作用 ,孵育 2 4小时后采用免疫组化染色检测HL 60细胞Bcl 2、PCNA、Fas蛋白表达。 结果 免疫组化染色显示 ,实验组中Bcl 2、PCNA及Fas阳性率分别为 ( 15 .7± 4.9) %、( 4 2 .1± 3 .9) %及 ( 3 9.7± 7 5 ) % ,而对照组分别为 ( 3 1.6± 5 .2 ) %、( 67.4± 8.5 ) %和 ( 2 4.1± 6.7) % ,t检验显示 12G5下调HL 60细胞Bcl 2及PCNA蛋白表达 ,上调Fas蛋白表达。结论 12G5可在一定程度抑制HL 60细胞增殖 ,促进凋亡 ,影响其生存。
- 魏立孔佩艳陈幸华彭贤贵常城曾东风刘红刘林王庆余张怡
- 关键词：SDF-1/CXCR4单克隆抗体
- RNA干扰骨髓基质细胞衍生因子表达对共培养Jurkat细胞增殖及凋亡的影响被引量：5
- 2005年
- 目的探讨阻抑骨髓基质细胞衍生因子(SDF1)表达对与其共培养的Jurkat细胞增殖、凋亡的影响。方法脂质体介导SDF1特异性RNA干扰质粒转染培养的急性白血病骨髓基质细胞,G418筛选阳性克隆(A组),采用ELISA法检测SDF1表达变化;与Jurkat细胞共培养,绘制生长曲线并计算倍增时间,用流式细胞术检测细胞周期,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺失末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,免疫细胞化学检测增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl2、Bax、Fas、FasL表达。以未转染急性白血病骨髓基质细胞(B组)及正常骨髓基质细胞(C组)作为对照。结果A组骨髓基质细胞培养上清SDF1含量为(384±41)pg/ml,较B组[(2474±271)pg/ml]、C组[(1324±154)pg/ml]明显降低。与之共培养的Jurkat细胞,A组与B组、C组比较,细胞增殖速度减缓,倍增时间延长(A组42h,B组29h,C组33h);细胞周期分析G0/G1期细胞比例增多[A组(28.47±2.39)%,B组(19.43±2.80)%,C组(27.15±2.07)%],S期细胞减少[A组(25.57±1.90)%,B组(74.48±3.23)%,C组(60.99±2.33)%],G2/M期细胞增多[A组(45.96±3.24)%,B组(6.09±1.96)%,C组(11.86±1.98)%];细胞凋亡率增加[A组(15.2±0.8)%,B组(5.4±0.7)%,C组(9.5±0.4)%];PCNA、Bcl2、Fas表达减少,Bax、FasL表达增多。结论阻抑SDF1表达在一定程度上抑制与骨髓基质细胞共培养的Jurkat细胞的增殖活性,并促进其凋亡。
- 杨文博孔佩艳常城魏立曾东风彭贤贵史占忠刘红刘林陈幸华王庆余
- 关键词：骨髓基质细胞基质细胞衍生因子RNA干扰增殖
- 基质细胞衍生因子-1受体CXCR7在急性白血病细胞的表达及意义被引量：1
- 2012年
- 目的研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)受体CXCR7在急性白血病(AL)细胞株和AL患者骨髓细胞中的表达及意义。方法使用RPMI-1640培养基培养人单核细胞白血病细胞株(THP-1细胞)、人原髓细胞白血病细胞株(HL-60细胞)和人T淋巴细胞白血病细胞株(Jurkat细胞),分离急性髓系白血病(AML)患者和急性淋巴细胞白血病(ALL)患者和正常人骨髓单个核细胞,抽取新鲜骨髓2 ml/(人)份,分为ALL组、AML组和正常组,用流式细胞仪和Western blot法观察各组CXCR7蛋白的表达情况。结果 1)CXCR7表达水平:THP-1细胞为(69.05±3.04)%,HL-60细胞为(20.17±1.53)%,Jurkat细胞为(3.41±2.46)%,THP-1细胞表达高于HL-60细胞(P<0.01),而HL-60细胞表达又明显高于Jurkat细胞(P<0.01)。2)CXCR7表达水平:AML组为(19.03±3.84)%,ALL组为(3.34±1.71)%,正常组为(2.40±1.27)%,AML组与正常组、ALL组相比,CXCR7表达水平明显增加(P<0.01),ALL组与正常组对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 AML患者和HL-60细胞的CXCR7表达均明显增高,提示其在AML的发生、发展中可能具有有重要作用,并可能成为1种新的血液肿瘤诊断及治疗的思路和靶点。
- 罗乐孔佩艳刘红曾东风李杰平李佳丽张勇彭贤贵王平
- 关键词：CXCR7THP-1细胞JURKAT细胞
- 基质细胞衍生因子-1和受体CXCR4在急性白血病和恶性淋巴瘤中的表达被引量：10
- 2005年
- 目的分析急性白血病(AL)和恶性淋巴瘤(ML)患者外周血血清基质细胞衍生因子1(SDF1)及其骨髓单个核细胞(MNC)表面特异性受体CXCR4的表达,并进行对照研究。方法ELISA法检测血清中SDF1表达,流式细胞术检测骨髓MNC表面CXCR4的表达。结果26例AL患者包含9例急性淋巴细胞白血病和17例急性非淋巴细胞白血病,其SDF1、CXCR4表达分别为(7115.8±946.5)ng/L、(77.2±9.7)%和(4642.2±1146.8)ng/L、(38.9±11.0)%;18例ML患者包含5例霍奇金淋巴瘤和13例非霍奇金淋巴瘤,其SDF1、CXCR4表达分别为(3728.9±690.9)ng/L、(9.2±2.7)%和(4442.1±1073.0)ng/L、(8.5±2.4)%,上述各组SDF1/CXCR4表达均高于对照组水平(2369.3±966.5)ng/L、(2.7±1.5)%(P<0.01)。有髓外浸润的AL患者其SDF1/CXCR4的表达水平高于同组其他患者,有广泛浸润的ML患者其SDF1的表达水平高于同组其他患者。结论CXCR4/SDF1的高表达与AL和ML的发病及其浸润特性存在一定联系,为上述肿瘤的治疗提供了新思路。
- 曾东风孔佩艳陈幸华魏立常诚彭贤贵
- 关键词：基质细胞衍生因子-1受体CXCR4急性白血病恶性淋巴瘤ML间质细胞
- 阻抑正常骨髓基质SDF-1作用对HL-60细胞生物学性质的影响被引量：5
- 2004年
- 目的 本研究通过应用抗CXCR4 单克隆抗体 12G5抑制趋化因子SDF 1的生物活性 ,观察HL 60细胞生物学性质的变化 ,探讨SDF 1在维持HL 60细胞生存、增殖中的作用。方法 培养HL 60细胞并与正常骨髓基质细胞共培养 ,采用 12G5阻断SDF 1生物作用 ,孵育 2h后观察对照组及单抗组HL 60细胞在骨髓基质层上的粘附情况 ,2 4h后测定细胞粘附率 ;2、4、6、8h应用台盼蓝排染法测定细胞存活率 ,MTT法检测HL 60细胞活力 ,流式细胞术观察HL 60细胞增殖周期变化。结果 ① 12G5孵育后 2 4h ,骨髓基质对HL 60的粘附率为 (19 1± 8 6) % ,显著低于对照组。②单抗孵育后HL 60细胞存活率下降 ,且随单抗孵育时间延长而逐渐下降。③细胞活性下降。④ 12G5孵育 2、6h后 ,处于增殖周期中G0 G1 期的细胞分别为 (5 4 7± 6 3 7) % ,(5 5 1± 7 0 4) % ,而S期的细胞分别为 (3 8 4± 4 5 1) % ,(3 7 1± 4 0 8) %。结论 12G5可改变HL 60细胞的生物学特性 ,从而在一定程度上抑制白血病细胞的增殖 ,影响细胞生存。
- 魏立孔佩艳陈幸华彭贤贵常城曾东风刘红刘林王庆余张怡
- 关键词：SDF-1/CXCR4生物学性质
- 急性白血病骨髓基质细胞表达SDF-1异常被引量：2
- 2005年
- 杨文博魏立孔佩艳常城曾东风彭贤贵史占忠刘红刘林陈幸华王庆余
- 关键词：急性白血病骨髓基质细胞基质细胞衍生因子-1细胞培养
- 以SDF-1/CXCR4为靶点治疗血液肿瘤的研究进展被引量：1
- 2006年
- 基质细胞衍生因子-1(SDF-1)是一种主要由骨髓基质细胞合成释放的趋化因子,属CXC亚家族成员。SDF1与其表达于正常造血干/祖细胞和多种血液肿瘤细胞表面的受体CXCR4特异性结合及相互作用,在造血调控及血液肿瘤转归中具有重要作用。本文就以SDF1/CXCR4为靶点治疗血液系统肿瘤的有关研究进展作一综述。
- 杨文博孔佩艳
- 关键词：CXCR4血液肿瘤基质细胞衍生因子-1
- SDF-1与VEGF在不同类型恶性血液肿瘤中的表达及其意义被引量：1
- 2005年
- 目的检测SDF-1、VEGF在不同恶性血液肿瘤的表达水平,分析其在恶性血液肿瘤中的表达特点及其意义.方法收集我科2003年1月～2003年7月初收治的恶性血液肿瘤患者28例的外周血血清样本,同时选取12例正常对照,采用ELISA法分别检测样本外周血血清SDF-1、VEGF的表达水平,并进行统计学分析.结果 28例血液肿瘤患者血清样本SDF-1、VEGF的表达水平均显著高于正常对照组(P<0.01),SDF-1、VEGF两种因子之间在表达上存在相关性(相关系数为0.675,P<0.01).结论 SDF-1、VEGF在不同恶性血液肿瘤的高表达使之可能成为监测血液肿瘤的重要因子,同时,SDF-1、VEGF可能存在的相关性为我们后续对恶性血液肿瘤发生机制的研究提供了思路.
- 曾东风陈幸华孔佩艳彭贤贵魏立常城
- 关键词：血管内皮生长因子
- 抑制SDF-1活性对HL60细胞增殖影响的实验研究被引量：1
- 2003年
- 目的 通过应用SDF 1受体CXCR4单克隆抗体 (1 2G5 )观察抑制SDF 1活性对HL6 0细胞增殖活性的影响 ,探讨趋化因子SDF 1在维持HL6 0细胞生存能力中的作用。方法 培养骨髓基质细胞 ,并与HL6 0细胞共培养 ,采用SDF 1受体CXCR4单克隆抗体阻断SDF 1生物活性后 ,用MTT法检测HL6 0细胞活力 ,流式细胞术观察HL6 0细胞增殖周期变化、检测细胞膜表面CXCR4表达 ,同时检测CXCR4单克隆抗体应用前后HL6 0细胞内游离钙离子浓度等。结果 应用抗CXCR4单克隆抗体后 ,HL6 0细胞出现下列变化 :(1 )细胞膜表面CXCR4表达下调 ;(2 )增殖周期中G0 /G1 期的细胞增多 ,增殖期细胞减少 ;(3)细胞活性下降 ;(4 )细胞内游离钙离子浓度降低 ,并与单抗浓度呈正相关。结论 抑制SDF 1活性可在一定程度上抑制白血病细胞增殖 ,但对于抑制髓内残留病变的形成尚需进一步研究。
- 魏立陈幸华孔佩艳刘林彭贤贵严巨明张曦
- 关键词：CXCR4单克隆抗体细胞增殖白血病
