南京医科大学科技发展基金(2006025)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 相关机构：南京医科大学常州市第一人民医院更多>>
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- 靶向黏着斑激酶siRNA表达载体构建及转染Tca8113细胞的沉默效应被引量：3
- 2008年
- 目的:构建靶向黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)基因的小干涉RNA(small interfering RNA,siRNA)质粒表达载体,转染人舌癌细胞Tca8113后观察其对FAK表达的抑制作用。方法:根据siRNA的设计原则,在人FAK mRNA序列中,设计并合成2条特异性靶序列寡核苷酸及2条无关对照序列,经退火成互补双链,再克隆到pGC-SilencerTM-U6/Neo真核表达载体中,构建重组体pSilencer-FAK并进行酶切鉴定;转染重组质粒至Tca8113细胞中,经G418抗性筛选,获得稳定转染细胞系;运用免疫细胞化学和Western-blot鉴定FAK的沉默效应。结果:质粒酶切证实目的寡核苷酸片段已被克隆到pGC-SilencerTM-U6/Neo载体中;pSi-lencer-FAK转染细胞后,FAK基因的表达受到明显抑制。结论:成功构建了针对人FAK的siRNA表达载体,通过转染Tca8113细胞可有效地抑制细胞中FAK的表达。
- 刘华联江宏兵邢树忠刘来奎王子露郑阳玉
- 关键词：黏着斑激酶舌癌细胞
- 粘着斑激酶基因沉默促进口腔癌细胞侵袭和迁移的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的:研究粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)对舌鳞癌细胞系Tca8113细胞侵袭和迁移的影响。方法:用RNA干扰的方法抑制Tca8113细胞FAK基因的表达。然后以划痕试验测定细胞迁移,以Transwell小室侵袭模型研究细胞侵袭能力。结果:外源性干扰质粒可以显著抑制Tca8113中FAK的表达;FAK基因沉默后,Tca8113细胞迁移能力、侵袭能力明显下降。结论:FAK在舌鳞癌Tca8113细胞的迁移和侵袭过程中发挥重要作用。
- 刘华联徐天舒江宏兵邢树忠
- 关键词：粘着斑激酶舌癌细胞RNA干扰迁移
- 黏着斑激酶基因沉默促进舌癌细胞失巢凋亡的实验研究被引量：1
- 2008年
- 目的观察黏着斑激酶(focal adhension kinase,FAK)基因沉默对口腔舌癌细胞株Tca8113失巢凋亡抗性的影响,探讨FAK基因与口腔鳞癌转移特性的关系。方法以舌癌细胞株Tca8113为研究对象,首先应用免疫细胞化学和免疫蛋白印记的方法检测FAK基因的表达,然后利用RNA干扰的方法抑制FAK基因的表达。最后利用悬浮培养、流式细胞仪的方法观察FAK对口腔舌癌细胞株Tca8113体外培养过程抗失巢凋亡的影响。结果舌癌细胞株Tca8113体外培养过程中具有较强的抗失巢凋亡特性。特异性siRNA可以抑制FAK基因的表达。FAK基因干扰后,Tca8113细胞的失巢凋亡显著提高(P<0.01)。结论FAK基因沉默可以逆转舌癌细胞株Tca8113体外培养过程中的抗失巢凋亡特性。
- 刘华联邢树忠江宏兵李强张群
- 关键词：黏着斑激酶舌癌细胞RNA干扰失巢凋亡
