国家自然科学基金(31371395)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
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- 实时定量聚合酶链反应结合Taqman荧光探针JCV-P检测肾移植受者JC病毒被引量：3
- 2014年
- 目的：建立肾移植受者尿液和外周血JC病毒（JCV）感染实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测方法。方法针对JCV基因组设计特异性引物JCV-F和JCV-R ，Taqman荧光探针JCV-P ，探针的5′端标记有荧光基团，在除5′端外的任意一个位置上标记有淬灭基团；然后处理待测样本，进行PCR反应，建立重组质粒标准曲线，评价特异性、灵敏度、重复性。结果将检测阳性的扩增产物进行基因测序，测序结果经BLAST 比对后证实JC V基因序列；利用上述方法对86份样本进行检测：20份JC V血清样本及20份JC V尿液样本检测均为阳性，有S型扩增曲线，动态范围测定显示103～1010拷贝/m L标准曲线具有良好的相关性；20份健康人尿液样本和20份血液样本及6份临床常见的其他病原体血液样本检测均为阴性，无S型扩增曲线。结论实时荧光定量PCR结合Taqman荧光探针JCV-P检测肾移植术后患者JCV方法可用于肾移植术后JCV感染的的早期诊断，对预防JCV感染造成的多瘤病毒相关性肾病（PVAN）和进行性多灶性脑白质病（PML）具有一定意义。
- 韩永蔡明王强许晓光黄海燕许亮周文强肖漓石炳毅
- 关键词：聚合酶链反应肾移植JC病毒
- 移植肾急性抗体介导排斥反应中半乳糖凝集素7的表达被引量：1
- 2014年
- 背景:半乳糖凝集素家族蛋白在移植免疫调节中的作用已被提出,目前尚未有半乳糖凝集素7检测对于肾移植后围手术期移植肾功能不全的辅助诊断,对肾移植受者而言,监测半乳糖凝集素7可能及早发现移植后肾功能异常,为临床治疗争取时间。目的:检测半乳糖凝集素7在移植肾急性抗体介导性排斥反应中的表达。方法:选取同种异体肾移植后行移植肾穿刺活检诊断为急性抗体介导性排斥反应的患者27例,同时选取同期移植后肾病理穿刺经诊断为正常的患者10例做对照。应用免疫组织化学染色法检测半乳糖凝集素7在组织中的表达情况、应用Western Blot法检测各组血清半乳糖凝集素7蛋白表达水平差异。结果与结论:免疫组织化学正常组光镜下半乳糖凝集素7表达于近曲小管上皮细胞表面微绒毛,肾小球、远曲小管、集合管和静脉未见其表达;急性抗体介导的体液性排斥反应组光镜下肾小动脉内膜水肿,管壁纤维素样坏死,肾小球肾小管淋巴细胞和单核细胞浸润,半乳糖凝集素7仅见于近曲小管上皮细胞表面微绒毛,同时动脉平滑肌也有表达,阳性度较高。急性抗体介导的体液性排斥反应组半乳糖凝集素7阳性细胞计数显著高于正常对照组(P<0.01)。Western Blot检测结果,急性抗体介导的体液性排斥反应组血清半乳糖凝集素7的表达高于正常对照组(P<0.05)。结果说明,移植肾穿刺病理活检安全可靠,对患者及移植肾无不良影响,半乳糖凝集素7检测对于肾移植后围手术期移植肾功能不全的辅助诊断具有重要的指导意义。
- 韩永郭晖蔡明钱叶勇李州利周文强王强许晓光黄海燕肖漓王新颖石炳毅
- 关键词：免疫印记
- 液态芯片技术检测抗人类白细胞抗原抗体抗主要组织相容性Ⅰ类相关链A位点抗体在移植肾围手术期急性抗体介导性排斥反应中的应用
- 2014年
- 目的探讨液态芯片技术(Luminex)检测移植肾受者围手术期发生急性抗体介导性排斥反应者抗人类白细胞抗原(HLA)抗体、抗主要组织相容性Ⅰ类相关链A位点(MICA)抗体水平与影响。方法选取我院器官移植研究所2008年1月至2013年6月肾移植术后围手术期患者106例为研究对象,采用Luminex技术检测接受同种异体肾移植手术并明确病理诊断肾围手术期急性抗体介导性排斥反应患者血清中抗HLA抗体、抗MICA抗体,并同步检测血肌酐、尿量及移植肾超声等临床指标。结果参照Banff 2007标准组织病理学诊断移植肾超急性排斥反应2例,急性抗体介导性排斥反应15例,同时应用Luminex方法检测抗HLA抗体、抗MICA抗体水平,HLA抗体检测结果15例阳性,阳性率为88%(15/17),检出PRAⅠ类和Ⅱ类阳性率分别为47%(7/15)和53%(8/15);MICA抗体2例阳性,阳性率为12%(2/17),其余89例其他病理类型检测未见抗HLA抗体、MICA抗体阳性,移植肾穿刺病理结果显示HLA抗体、抗MICA抗体阳性患者C4d沉积均为阳性。结论抗HLA抗体、抗MICA抗体可预测围手术期急性抗体介导性排斥反应发生及治疗效果,对于及时诊断及治疗排斥反应提供了一个重要指标,可影响移植肾的长期存活。
- 周文强石炳毅韩永钱叶勇蔡明肖漓王强许晓光黄海燕王新颖匡国杰武洪文
- 关键词：移植物排斥HLA抗体MICA抗体
- 移植肾急性排斥组织中C4d CD3 CD4 CD8 CD138表达的初步研究被引量：1
- 2014年
- 目的分析探讨移植肾急性排斥组织中C4d、CD3、CD4、CD8、CD138的表达。方法收集我院2010年3月至2013年10月经病理学确认为急性排斥反应移植肾穿刺标本136例,依据Banff 2007标准将研究对象分为5组,利用免疫组织化学染色计数测定各组C4d、CD3、CD4、CD8、CD138阳性表达情况并计算CD4/CD8值。结果急性抗体介导性排斥反应组C4d染色均为阳性,急性T细胞介导性排斥反应组C4d染色均为阴性;CD3、CD4、CD8阳性细胞数及CD4+/CD8+值急性T细胞介导性排斥反应组高于急性抗体介导性排斥反应组,差异有统计学意义(P<0.01),急性T细胞性排斥Ⅰ、Ⅱ级组高于疑为急性T细胞介导性排斥组,差异有统计学意义(P<0.01),急性T细胞性排斥Ⅱ级组高于急性T细胞性排斥Ⅰ级组,差异具有统计学意义(P<0.05),急性抗体介导性排斥反应Ⅰ级组与急性抗体介导性排斥反应Ⅱ级组差异无统计学意义(P>0.05);CD138阳性细胞急性抗体介导性排斥反应组大于急性T细胞介导性排斥反应组,差异有统计学意义(P<0.01),急性抗体介导性排斥反应Ⅱ级组高于急性抗体介导性排斥反应Ⅰ级组,差异具有统计学意义(P<0.05),急性T细胞介导性排斥反应3组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 C4d的表达和CD3、CD4、CD8、CD138阳性细胞数以及CD4+/CD8+值与肾移植急性排斥反应的类型及反应程度密切相关,检测C4d、CD3、CD4、CD8、CD138在移植肾急性排斥组织中表达情况,对于探讨移植肾早期急性排斥反应发生具有重要意义。
- 韩永郭晖蔡明钱叶勇周文强肖漓王强许晓光黄海燕王新颖袁建徐燕杰石炳毅
- 关键词：移植物排斥
- 移植肾术后急性抗体介导性排斥反应的诊断与治疗被引量：6
- 2015年
- 目的观察肾功能不全移植肾术后3个月内急性抗体介导性排斥反应的诊断和治疗方法。方法肾移植术后患者106例,均在B超引导下行移植肾穿刺活检组织病理检查,观察移植肾病理改变情况;采用免疫组织化学染色观察移植肾C4d表达情况;确诊急性抗体介导性排斥反应后给予血浆置换和静脉注射小剂量丙种球蛋白等治疗,观察治疗效果。结果移植肾超急性排斥反应2例,急性抗体介导性排斥反应15例;免疫组织化学染色示C4d均为阳性;2例超急性排斥反应移植肾失功,移植肾切除;15例急性抗体介导性排斥反应患者中13例治疗后移植肾功能恢复,2例移植肾功能未恢复,血肌酐稳定于较高水平。结论移植肾穿刺活检组织病理对肾移植术后移植肾功能不全的诊断有重要意义,血浆置换及静脉注射小剂量丙种球蛋白在肾功能不全移植肾术后急性抗体介导性排斥反应治疗中有积极作用。
- 韩永蔡明郭晖周文强肖漓王强许晓光黄海燕石炳毅
- 关键词：肾移植组织病理
