国家自然科学基金(30972968)
- 作品数：10 被引量：14H指数：3
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- 保留软骨的兔脱细胞气管支架的性能被引量：4
- 2014年
- 目的 探讨高氯酸钠（NaClO4）处理制备兔气管支架的最适宜浓度.方法 健康新西兰兔30只,随机分5组（n=6）.以新鲜气管为对照A组,按NaClO4浓度分别为3％、5％、6％、7％为实验B、C、D、E组.各组气管基质经形态学观察和生物力学性能检测比较.结果 组织学染色显示A组气管有大量黏膜上皮细胞,C组气管黏膜上皮细胞去除;电镜扫描可见A组气管上皮细胞的纤毛,实验B组气管基质内表面毛糙欠光滑,C组气管基底膜完整无损坏,而D、E组气管则出现不同程度的裂痕;比较于原生对照组,C组的细胞核去除显著,DNA下降差异有统计学意义（P＜0.05）,而胶原蛋白、弹力纤维和网状纤维相对保留,基质内的软骨细胞活力良好,糖胺聚糖含量降低差异无统计学意义（P＞0.05）;生物力学分析：随着NaClO4浓度升高,最大拉伸力、拉伸应变在断裂和弹性模量逐步降低（P＜0.05）.结论 5％浓度NaClO4处理的兔气管支架保留了较完整的细胞外基质（ECM）结构和理想的脱细胞效果,适合用于构建组织工程同种异体气管.
- 潘枢孙飞史宏灿章方彪刘星辰
- 关键词：脱细胞气管支架软骨细胞
- 组织工程气管体内原位移植的研究进展
- 2013年
- 气管相关疾病包括良性病变如医源性、先天与后天畸形、创伤、感染等引起的疾病及恶性病变如肿瘤等,病变部位切除并行端端吻合是治疗的金标准.然而,这仅限于病变气管段不超过成人气管总长度的1/2或儿童的1/3,且仅能单一缓解病情[1].传统长段气管病变（＞6 cm）的异体移植治疗极具外科手术风险性,且需终生服用免疫抑制剂,早期临床试验患者多死于移植物血管再生障碍、感染及纵隔炎.自体移植曾临床用于气道小病变的治疗,而如何有效治疗气管较大面积损坏仍然是个难题[2].人工假体也曾用于气管替代治疗,但由于支架常出现迁移、破裂、感染、狭窄、污染而导致治疗失败[3].
- 孙飞潘枢史宏灿
- 关键词：气管病变原位移植良性病变相关疾病
- 细胞外基质材料在胸心外科组织工程领域的研究进展
- 2011年
- 组织工程学是通过人为干预组织再生过程获得可以治疗病变的组织或器官。生物组织足由细胞、细胞外基质和信号系统构成。组织工程学主要是从种子细胞、支架材料以及两者之间的相互作用二方面对生物组织重构进行研究。
- 韩石史宏灿
- 关键词：细胞外基质材料胸心外科生物组织再生过程信号系统种子细胞
- 组织及器官脱细胞方法的研究进展
- 2015年
- 来源于脱细胞组织和器官的生物支架材料已成功运用于组织工程和再生医学。不同组织因来源、密度、组成、几何特性、生物特性不同，脱细胞方法也不尽相同。最佳的脱细胞方法应在充分去除细胞成分的基础上，保存细胞外基质（ECM）的完整性及生物活性。现主要介绍常用的组织及器官脱细胞方法，并对脱细胞后支架材料结构和组成影响进行综述。
- 蒋媛史宏灿
- 关键词：细胞外基质脱细胞
- 气管软骨细胞和羧乙基壳聚糖-羟基磷灰石泡沫支架复合及裸鼠皮下植入被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨以兔气管软骨细胞为种子细胞在自制羧乙基壳聚糖-羟基磷灰石泡沫（NCECS-HA）支架合成组织工程气管软骨的可行性.方法 通过真空冷冻干燥法制得NCECS-HA泡沫支架.从6个月大的大耳白兔取气管软骨片段,Ⅱ型胶原酶消化,将所获得第3代软骨细胞种植于NCECS-HA三维支架上.细胞-支架复合物在24孔板中培养5 d以后,将其植入裸鼠皮下8周.然后取出分别进行HE染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色和甲苯胺蓝染色,观察软骨细胞基质分泌情况.结果 8周后,构建出组织工程气管软骨示光泽良好,甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色显示细胞-支架复合物中的软骨细胞可以像天然软骨一样分泌糖氨多糖和Ⅱ型胶原.结论 生物材料NCECS-HA对于兔软骨细胞有良好的生物相容性,可作为生物组织工程支架.
- 王万鹏史宏灿陆妍朱爱萍李海甲陈林松
- 关键词：软骨细胞壳聚糖羟基磷灰石
- 去污剂-联合酶法行兔脱细胞组织工程气管制备及性能评价被引量：3
- 2014年
- 目的探讨兔气管支架最佳脱细胞周期，进行生物力学性能及细胞外基质结构完整性评价。方法选取40只健康新西兰兔，体质量2．5～3．0kg，雌雄不限。随机数字表法分为8组（n=5），A组为新鲜对照组，B、C、D、E、F、G、H组对应脱细胞1、3、5、6、7、8、9周期组。取同种气管，通过去污剂一联合酶法（DEM）分别行气管周期脱细胞处理，通过HE、Movat五色、DAPI染色显微镜观察、扫描电镜观察及生物力学性能测定，判断最佳脱细胞周期并行相关性能评价。结果与对照组相比，经7个DEM循环之后组织工程基质细胞核溶解、极少数细胞残留，结构体系未见明显破坏；组织学与分子生物学分析证实细胞成分及细胞核物质近乎全部去除；扫描电子显微镜（SEM）显示脱细胞基质依然保持完整的结构体系；生物力学证实脱细胞并未对基质形态学及机械性能产生明显影响；免疫荧光分析显示脱细胞气管基质细胞核物质显著减少（P〈0．05）。结论通过7周期改良DEM处理，能够有效获取长段无免疫原性脱细胞兔组织工程气管，具有与原生气管相似的结构体系及生物力学性能，是一种较为理想的支架材料。
- 孙飞潘枢史宏灿章方彪张卫东叶刚刘星辰
- 关键词：气管细胞外基质
- 组织工程化气管构建的研究进展被引量：1
- 2013年
- 目前，气管替代物的选择和应用仍然是气管重建外科面临的挑战性问题。近年来，利用组织工程学原理和技术在体外构建出具有生物活性及主要生理功能的人丁气管，将其作为移植物修复气管缺损逐渐成为研究热点。种子细胞的选择、培养、分离纯化，气管支架材料的选择以及二者之间的复合是组织工程气管成功构建的关键；体内组织工程气管理念的提出让构建方法有了质的进步。
- 张卫东章方彪史宏灿
- 关键词：组织工程化气管替代物生理功能生物活性体外构建
- 体内原位组织工程气管干细胞种植的研究现状与进展被引量：1
- 2013年
- 气管损伤可由狭窄（先天性或获得性）、感染、创伤、肿瘤等引起，气管切除并端端吻合是其标准治疗方法，却仅限于病变长度不超过成人1／2或小儿1／3的患者。长段气管（〉6cm）病变是外科手术的棘手难题，目前行之有效的办法是气管替代治疗。理想的气管替代物应具密封性、无免疫性、不可分解、能够快速上皮化、可血管再生，以及保持呼吸道通畅所需的适宜支架结构（横向硬度与纵向弹性）。
- 孙飞史宏灿
- 关键词：气管损伤细胞种植保持呼吸道通畅病变长度气管替代物
- 羧乙基壳聚糖-纳米羟基磷灰石复合材料细胞相容性和生物力学性能的实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的制备羧乙基壳聚糖一纳米羟基磷灰石（NCECS／nHA）复合材料，研究其生物力学性能以及与气管软骨细胞的生物相容性。方法气管软骨片段取自8周龄大耳白兔，Ⅱ型胶原酶消化，将所获得软骨细胞传代培养。将体外制备的NCECS／nHA复合材料分别进行干态标本和湿态标本的生物力学检测。将第3代软骨细胞种植到NCECS／nHA复合材料，分别计算材料表面软骨细胞在2h、6h、12h细胞贴壁率，并用噻唑蓝（MTT）法测定细胞增殖活性。结果NCECS／nHA复合材料具有良好的生物力学性能。兔气管软骨细胞在NCECS／nHA复合材料表面上12h的贴壁率达（88．4＋2．1）％，与其他组差异无统计学意义（P〉0．05）。同时MTF显示气管软骨细胞在NCECS／nHA复合材料表面生长状态良好。扫描电镜结果显示软骨细胞在NCECS／nHA薄膜上增殖和分化良好。结论NCECS／nHA复合材料具备良好的细胞相容性和适宜的生物力学强度，作为一种具有开发潜力的生物材料，可用于组织工程气管的体外构建。
- 史宏灿王万鹏陆妍朱爱萍陈林松李海甲
- 关键词：生物力学生物相容性纳米羟基磷灰石
- 兔骨髓间充质干细胞体外培养方法的比较被引量：4
- 2013年
- 目的比较不同的骨髓间充质干细胞（BMSCs）培养方法，寻求适宜的兔BMSCs培养方式。方法分别用全贴壁筛选培养法、半全红细胞裂解液培养法、完全红细胞裂解液培养法和Ficoll密度梯度离心法提取兔的骨髓液，于4、7、10、13d分别比较各组细胞数量；绘出所获得细胞的P2、P3、P4及P5的生长曲线，比较各代细胞的增殖特点；观察所培养细胞的形态，检测其CD44、CD34抗原的表达。结果4种方法均能得到规则的以梭形为主的贴壁细胞，且流式细胞仪测得CD44抗原表达阳性率95．57％、CD34抗原表达阳性率0．99％；其中全贴壁筛选培养法获得的贴壁细胞数量在不同的时间点均明显多于其他培养方法（P〈0．05）；P4代细胞的增殖活性优于其他代数细胞（P〈0．05）。结论全贴壁筛选培养法是兔BMSCs最适宜的培养方法，P4代细胞是BMSCs增殖能力最强的1代细胞。
- 张卫东史宏灿章方彪谭荣邦叶钢李广宇
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞培养
