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口蹄疫病毒遗传进化研究进展被引量：1: 2016年; 口蹄疫病毒以"准种"状态生存和演变,具有群体庞大、复制突变率高、繁殖周期短等特征,是研究物种进化的最好模型之一。利用突变、遗传漂移、重组和基因迁移等多种机制以及在环境压力的作用下,口蹄疫病毒不断发生适应性进化,种群衍变分化导致其宿主嗜性、毒力、抗原性等表型出现差异,形成了具有明显区域特征的变异株系,展现出丰富的遗传多样性。现对口蹄疫病毒进化的源动力、进化方式及其结果进行综述,并对进化所产生的生物学效应进行介绍。; 郑海学刘湘涛; 关键词：口蹄疫病毒准种进化

Asia 1型口蹄疫病毒抗原表位突变株的构建及其生物学特性分析: 2015年; 为了研制口蹄疫抗原表位突变标记疫苗,本研究以含有Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)c DNA全长的感染性克隆p Asia 1-FMDV作为骨架,将3D蛋白中第27位氨基酸的H和31位的氨基酸N分别突变成Y和R,从而突变3D蛋白的一个抗原表位,将构建的带有突变表位的重组质粒转染BHK-21细胞,成功拯救出一株突变FMDV。经比较后发现,重组病毒的生物学特性与亲本毒株相似。病毒中和试验结果显示,抗重组病毒的血清与亲本病毒有良好的反应性。Western blotting结果表明重组病毒诱导的抗体能与突变的表位合成肽反应而不与野生型病毒的表位合成肽发生反应,从而区分重组病毒与亲本病毒。综上所述,这株抗原表位突变FMDV有望作为口蹄疫标记疫苗候株进一步评估。; 张岩胡永浩杨帆杨波王松豪朱紫祥郑海学; 关键词：口蹄疫病毒

口蹄疫病毒O型Mya98谱系猪源毒株和牛源毒株全基因组的比较被引量：2: 2014年; 为了查明我国新流行的口蹄疫病毒(FMDV)O型Mya98谱系猪源和牛源毒株的序列差异,采用RT-PCR方法,对FMDV O型Mya98谱系牛源毒株(O/BY/CHA/2010)和猪源毒株(O/GZ/CHA/2010)的基因组全序列进行了扩增和测序,并与O型其他牛源和猪源参考毒株的基因组进行了比较分析。结果显示,O/BY/CHA/2010毒株和O/GZ/CHA/2010毒株都属于SEA拓扑型的Mya98谱系毒株。O/BY/CHA/2010毒株和O/GZ/CHA/2010毒株与来自Mya98谱系的其他毒株的全基因的核苷酸同源性大于98.0%。除了VP4、2A和3BCD区,O/BY/CHA/2010毒株和O/GZ/CHA/2010毒株与Mya98谱系的其他毒株的其他基因区的同源性较低。与非SEA拓扑型毒株(UKG/7B/2007、Akesu/58和PanAsia谱系毒株)相比,在2A、P2和3CD区,具有较高的同源性,表明O/BY/CHA/2010和O/GZ/CHA/2010可能具有这些毒株的生长特性。进一步的序列分析表明,O/GZ/CHA/2010毒株在L蛋白第10位增加了1个亮氨酸,在S片段缺失70个核苷酸。试验结果为进一步分析氨基酸插入和核苷酸缺失对毒株致病性的影响奠定了基础。; 吕律杨帆何继军靳野郭建宏郑海学刘湘涛; 关键词：口蹄疫病毒全基因组 S片段

猪RIG-I真核表达载体的构建及其抗口蹄疫病毒作用研究被引量：2: 2015年; 为研究模式识别受体分子RIG-I是否具有抑制口蹄疫病毒(FMDV)复制的作用,本研究从猪的PK15细胞中提取RNA,通过分段扩增与融合PCR的方法,扩增猪的RIG-I的完整CDS序列,进一步构建猪RIG-I的真核表达质粒。通过Western blotting和间接免疫荧光试验对构建的真核表达质粒进行表达验证,证明其成功表达,同时证明猪RIG-I蛋白定位于细胞的细胞质中。感染试验发现FMDV能够诱导细胞内RIG-I的转录上调,这表明两者间存在着重要联系。过表达试验证实RIG-I具有抑制FMDV复制的作用,而下调表达RIG-I可以促进FMDV的复制,这表明RIG-I在机体抗口蹄疫病毒感染过程中发挥着重要作用。本研究的开展,为进一步探索RIG-I抗口蹄疫病毒的分子机制提供了理论支持;为口蹄疫病毒感染过程中,天然免疫系统抗病毒机制研究奠定了基础。; 王国庆朱紫祥曹伟军杨帆毛箬青李丹刘磊郑海学; 关键词：口蹄疫病毒 RIG-I 天然免疫抗病毒作用

干扰素诱导蛋白鸟苷酸结合蛋白1研究进展被引量：4: 2014年; 鸟苷酸结合蛋白1(Guanylate-binding protein 1,GBP1)为一种干扰素诱导蛋白,其属于鸟苷酸结合蛋白家族的一员。GBP1在抗病原微生物与抗肿瘤等多种生物学反应中发挥着重要作用。随着对GBP1的深入研究,发现IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL1α、IL1β、TNF-α和LPS均能够诱导GBP1的表达;因此,GBP1发挥的生物学效应也越来越广泛,并逐步地被挖掘和展现出来。尤其是GBP1发挥的抗病原微生物与抗肿瘤功能受到了极为广泛的关注。本论文综述了GBP1的分子结构、生物学活性、抗病原微生物特性以及已发现的一些其他功能的研究进展,为GBP1的后续研究提供参考和依据。; 朱紫祥曹阳春曹伟军杨帆马志永郑海学; 关键词：抗病毒抗肿瘤

组氨酸标签标记的口蹄疫重组病毒的制备及鉴定被引量：2: 2014年; 为了鉴定口蹄疫病毒(FMDV)插入位点并获得标记的重组病毒,本研究利用口蹄疫病毒反向遗传操作技术,在RGD基序后第9位和第10位氨基酸处(+9)引入组氨酸(His)标签,获得了含有His标签的FMDV全长cDNA克隆(命名为prAsia1-9His)。将prAsia1-9His质粒转染BHK-21细胞后,能够出现典型的细胞病变,对收获的病毒分别用RT-PCR、间接免疫荧光进行鉴定,结果证实,成功拯救了含His标签的重组病毒(命名为rAsia1-9His),该重组毒株能够稳定表达His标签。最后,比较测定了其对BHK-21细胞和乳鼠的致病性,结果表明,该重组毒株与亲本毒株(rAsia1)具有相似的生物学特性。含有标签标记的口蹄疫病毒的成功拯救,为深入研究口蹄疫病毒的致病机制以及分子标记疫苗奠定了基础。; 杨波杨帆王松豪张岩岳城郑海学殷宏; 关键词：口蹄疫标签标记疫苗

RNA病毒阻断RIG-I样受体识别dsRNA机制研究进展被引量：6: 2014年; RIG-I样受体(RIG-I-like receptors,RLRs)是一类重要的模式识别受体,其在机体抵抗病毒感染过程中发挥着至关重要的作用。RLRs通过级联放大效应,诱导I型干扰素的表达,激活干扰素通路,最终发挥抗病毒效应。而病毒为了自身长期的生存和繁殖,在长期的进化和演化过程中,不断的与机体免疫系统进行着抗衡和斗争,由此演化出了一系列的拮抗策略。RLRs主要识别5′端带有三磷酸基团的RNA(包括单链和双链RNA)和双链RNA,其在启动免疫应答过程中可以通过与病毒RNA结合而得以激活,然后招募下游分子,激活整个通路的信号转导。病毒为了阻断RLRs对病毒RNA的识别,拮抗RLRs通路的激活,进化出了非常精细的对抗策略,主要分为:躲避、伪装和攻击三种策略。了解清楚病毒拮抗RLRs抗病毒的分子机制对于研制新的抗病毒药物及发展新的抗病毒策略具有深远意义。本文主要对RNA病毒阻断RLRs识别dsRNA机制的研究进展进行综述。希望为研究不同RNA病毒拮抗RLRs分子机制提供一定的参考和依据。; 王国庆朱紫祥曹伟军刘磊郑海学; 关键词：DSRNA RNA病毒拮抗作用

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