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国家高技术研究发展计划(2004DA754C)
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
相关作者:
郭筠秋
申景岭
时飒
金连弘
孙轶华
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相关机构:
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发文基金:
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作者
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李冬梅
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金连弘
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时飒
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郭筠秋
传媒
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解剖学报
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2007
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大鼠骨髓间充质干细胞L-型钙通道的表达及电流检测
被引量:3
2007年
目的 探讨L-型钙通道基因和蛋白在骨髓间充质干细胞(MSCs)中的表达及离子电流,以进一步研究其在MSCs增殖和分化中的作用。方法 分离、培养和纯化大鼠骨髓间充质干细胞,细胞免疫荧光化学方法检测表面分子CD14、CD29、CD34,CD44、CD45、CD106的阳性率和L-型钙通道蛋白的表达;采用RT-PCR技术观察MSCs细胞中钙离子通道不同亚基α1C、α1D、α1G、α1H、α1S mRNA的表达;全细胞膜片钳技术记录单个细胞离子电流。结果 细胞免疫荧光化学方法检测CD29、CD44、CD106阳性率在93%左右,CD14、CD34、CD45表达阴性。RT-PCR结果显示,可见L-型钙通道α1C亚基的mRNA高表达;但未见L-型钙通道α1D、α1S亚基和T-型钙通道的α1G、α1H亚基mRNA的表达。L-型钙通道蛋白(α1C)呈阳性表达。在36例细胞中16例细胞记录到电压依赖性内向电流。此电流激活电位-30mV,最大激活电位为0-10mV,可被nifedipine(10μmol/L)阻断,细胞外液中以10mmol/L Ba^2+作为负载离子,记录的电流强度明显大于2mmol/L Ca^2+时,证实为L-型钙电流。结论 MSCs不仅有L-型钙通道的基因和蛋白的表达,并且具有功能电流。
时飒
金连弘
申景岭
孙轶华
郭筠秋
李冬梅
关键词:
骨髓间充质干细胞
L-型钙通道
离子电流
全细胞膜片钳技术
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