国家自然科学基金(30571993)
- 作品数：13 被引量：13H指数：2
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- 氯离子通道阻滞剂对人RPE细胞增生抑制作用的实验研究被引量：3
- 2006年
- 目的探讨氯离子通道阻滞剂5-硝基-2-(3苯丙氨基)苯甲酸(NPPB)在人视网膜色素上皮(RPE)细胞增生中的作用。方法培养人RPE细胞株,ARPE-19细胞;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度的NPPB对ARPE-19细胞增生的影响;利用血清饥饿法对ARPE-19细胞进行细胞周期同步化,并通过流式细胞仪加以确定;进行核仁染色,观察NPPB对ARPE-19细胞周期进行中核仁变化的影响。结果NPPB浓度依赖性地抑制了ARPE-19细胞的增生;核仁染色显示了ARPE-19细胞核仁数量和形态随着细胞周期进行而发生变化,NPPB使ARPE-19细胞核仁萎缩,抑制核仁形成,使细胞处于静息状态。结论氯离子通道阻滞剂NPPB能够抑制静止期的ARPE-19细胞进入细胞周期,从而抑制ARPE-19细胞的增生。
- 郑雅娟辛华张文松王丹
- 关键词：视网膜色素上皮细胞增生核仁
- 阴离子交换蛋白阻滞剂DIDS对人视网膜色素上皮细胞非特异性吞噬过程的影响被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨阴离子交换蛋白在人视网膜色素上皮(RPE)细胞非特异性吞噬过程中的作用。方法:体外培养人RPE细胞,以荧光包被的乳胶株作为吞噬标记物,建立RPE细胞吞噬模型。使用不同浓度阴离子交换蛋白阻滞剂DIDS(1、10、100、200、300、500和1000μmol·L-1)预处理RPE细胞,37℃孵育6h,利用流式细胞术定量检测RPE细胞对乳胶珠的吞噬指数。结果:经6h孵育,未加DIDS的对照组RPE细胞对乳胶株的吞噬指数为(35·1±1·6)%,加入1μmol·L-1DIDS的RPE细胞吞噬指数为(34·1±2·1)%(P>0·05),加入10μmol·L-1DIDS的RPE细胞吞噬指数为(28·7±1·9)%,10μmol·L-1的DIDS显著地抑制了RPE细胞对乳胶株的吞噬作用(P<0·05),并且随着DIDS浓度的增加(100、200、300、500及1000μmol·L-1),RPE细胞吞噬指数逐渐降低[吞噬指数分别为(23·0±1·2)%、(17·0±1·5)%、(12·0±1·6)%、(7·0±2·2%)及(5·0±2·5)%],与对照组比较差异均有显著性(P<0·01)。结论:抑制阴离子交换蛋白的活性将导致人RPE细胞非特异性吞噬功能的障碍,阴离子交换蛋白可能参与人RPE细胞的非特异性吞噬过程。
- 郑雅娟辛华刘赤兵韩秀清张文松
- 准分子激光屈光性角膜切削术中应用丝裂霉素C预防角膜上皮下雾状混浊形成的meta分析被引量：2
- 2006年
- 目的：探讨在准分子激光屈光性角膜切削术（PRK）中应用丝裂霉素C对抑制角膜上皮下雾状混浊（haze）形成的效果。方法：检索Medline、OVID医学期刊全文数据库、中国学术期刊全文库、万方数据资源系统收录的1995年4月-2005年4月10年发表的关于丝裂霉素C与PRK相关的对照研究，并辅以手工检索。结果：共纳入2项随机对照试验，异质性Q检验无统计学差异（χ^2=0．17，df=1，P=0．68）。2项研究的OR值分别为0．17[95％CI0．05～0．533、0．10[95％CI0．01～0．853；合并OR值为0．14[95％CI0．05～0．403，与对照组比较差异有显著性（Z=3．75，P=0．0002）。结论：PRK术中局部应用0．02％丝裂霉素C可以明显减少高度近视眼术后的haze形成。
- 吴荒王春勇王宜宋跃郑雅娟
- 关键词：角膜切除术光折射角膜上皮下雾状混浊
- 氯离子转运通道在人视网膜色素上皮细胞吞噬过程中的作用
- 2010年
- 目的:探讨丁脲胺或DNDS作用下视网膜色素上皮(RPE)细胞顶端膜和基底膜上氯离子转运通道对RPE吞噬功能的影响,阐明氯离子转运通道参与PRE吞噬作用的机制。方法:利用微孔滤膜培养系统体外培养极性化单层RPE细胞,以荧光包被的乳胶株作为吞噬标记物,建立RPE细胞吞噬模型,分别以1、5、10、50、100、500和1000μmol.L-1丁脲胺,以及0.01、0.10、0.50、1.00、3.00、5.00和10.00mmol.L-1DNDS作用RPE细胞6h后,应用流式细胞仪定量检测RPE细胞吞噬指数。结果:不同浓度丁脲胺作用于RPE细胞顶端膜或基底膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数与对照组比较差异无显著性(P>0.05);0.01和0.10μmol.L-1DNDS作用于RPE细胞基底膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数与对照组比较差异无显著性(P>0.05),而0.50、1.00、3.00、5.00、10.00mmol.L-1的DNDS作用于RPE细胞基底膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数降低(P<0.05或P<0.01),并随着浓度的增加,吞噬指数逐渐降低;但同样浓度的DNDS作用于RPE细胞顶端膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数无明显改变(P>0.05)。结论:顶端膜的丁脲胺敏感性Na+-K+-2Cl-协同转运载体不参与RPE吞噬乳胶株的过程,而基底膜的DNDS敏感性Cl-/HCO3-交换蛋白及氯离子通道在DNDS作用后,对人RPE细胞非特异性吞噬过程发挥抑制作用。
- 梁巍郑雅娟辛华
- 关键词：视网膜色素上皮细胞离子通道
- 七氟醚、氯胺酮静吸复合麻醉与氯胺酮静脉麻醉在小儿斜视手术中的应用被引量：3
- 2008年
- 目的：探讨两种麻醉方法在小儿斜视手术中的应用,并比较优缺点。方法：选择ASAⅠ～Ⅱ级,择期接受斜视手术的患儿32例。随机分为七氟醚、氯胺酮静吸复合麻醉组（A组）和氯胺酮静脉麻醉组（B组）各16例,保留自主呼吸,为保证通气安全,均采用喉罩置入技术。记录摇头、肢体活动和血氧饱合度SpO2〈95%的发生例数、眼心反射（oculocardiac re-flex,OCR）和术后呕吐（postoperati vevomiting,POV）、燥动的发生例数,睫毛反射消失时间、清醒时间等指标。结果：静吸复合麻醉组患儿接受程度高,血氧饱合度维持好,清醒快,OCR,术后燥动发生率低（P〈0.05）,但POV无明显差异（P〉0.05）。结论：在小儿斜视手术中,七氟醚、氯胺酮静吸复合麻醉优于氯胺酮静脉麻醉。
- 张厚忠杨华赵慧敏
- 关键词：氯胺酮七氟醚斜视矫正术
- 干扰CLC-2基因表达对人眼小梁细胞细胞周期进程的影响被引量：1
- 2010年
- 目的观察抑制CLC-2基因的表达对人眼小梁细胞细胞周期进程的影响。方法构建针对CLC-2的小干扰(siRNA)重组表达载体,脂质体LipofectamineTM2000介导转染人眼小梁细胞后,应用RT-PCR半定量检测小梁细胞CLC-2mRNA表达量的变化;流式细胞仪检测干扰CLC-2表达后,人眼小梁细胞细胞周期进程。结果与空载体组比较,重组载体组的CLC-2mRNA表达明显降低,且有效抑制小梁细胞由G0期到G1的转位。结论抑制CLC-2的表达可以干扰人眼小梁细胞正常细胞周期进程。
- 梁巍郑雅娟
- 关键词：小梁细胞RNAI
- 低渗诱导人小梁细胞容积敏感性氯电流的电生理学特点被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨与小梁细胞容积调节有关的氯通道电流的生理学特点,阐明该电流与容积敏感性氯通道电流的关系。方法:体外培养人小梁细胞,全细胞膜片钳记录等渗和低渗条件下小梁细胞膜上的氯通道电流,观察该电流特点。低渗状态下在浴液中加入氯离子通道阻断剂NPPB和他莫昔芬及ATP后记录电流的变化。结果:在等渗条件下,仅观察到微弱且稳定的背景电流,在+100和-100mV电压钳钳制下,外向和内向电流密度值(pA/pF)分别为1.48±0.36和-0.91±0.10(n=6)。低渗刺激后,细胞迅速肿胀,电流较等渗时明显增大,呈外向优势,外向和内向电流密度值(pA/pF)分别为19.94±0.87和-6.53±0.41(n=6,P<0.01)。在低渗状态下的浴液中分别加入NPPB(100mol.L-1)、他莫昔芬(50mol.L-1)和ATP(2μmol.L-1)20min后,外向和内向电流密度值(pA/pF)分别为7.61±0.50和-3.70±0.25、8.21±0.63和-3.83±0.25、9.08±0.67和3.89±0.22,均较低渗时明显减小(P<0.01)。结论:细胞外低渗诱导人小梁细胞产生呈外向优势氯电流,此电流对细胞容积的改变敏感,可被NPPB、他莫昔芬和ATP抑制,该电流符合容积敏感性氯电流的特征。
- 王霁雪张文杰袁海波郑雅娟李桂荣
- 关键词：人小梁细胞氯化物通道膜片钳术
- 氯通道ClC-2融合蛋白的原核表达及体外磷酸化
- 2006年
- 目的检测ClC-2是否能被促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化,为进一步研究其在细胞增殖、分化过程中的调控机制提供基础。方法从含有家兔ClC-2cDNA的质粒pSPORT1中PCR扩增ClC-2胞浆内的羧基端DNA编码序列,构建重组载体pGEX-4T-1/ClC-2CT;重组质粒经酶切、测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21菌株;经异丙基β-D-硫代半乳糖(IPTG)诱导后,通过GluthathionSepharose4B亲和层析柱纯化融合蛋白;并行融合蛋白的体外磷酸化实验。结果酶切、测序鉴定重组载体pGEX-4T-1/ClC-2CT构建正确,并纯化得到GST/ClC-2CT融合蛋白。而且该融合蛋白能被MAPK磷酸化,而GST不能被MAPK磷酸化。结论氯通道ClC-2能被MAPK磷酸化。
- 郑雅娟辛华王维忠
- 关键词：融合蛋白质类
- 近视患者角膜屈光力与角膜表面规则性的相关性分析
- 2006年
- 目的:探讨近视患者角膜屈光力与角膜表面规则性的相关关系。方法:对近视患者眼1472只(其中男性眼715只,女性眼757只)、行准分子激光屈光性角膜切削术(PRK)手术后1年的患者眼161只和行准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)手术后1年的患者眼158只进行统计学分析,探讨角膜平均屈光力(ACP)与角膜表面规则指数(SRI)的相关关系。结果:ACP与SRI在男性和女性中均存在正相关关系(Pearson相关系数分别为0.120和0.131,P<0.01);PRK术后1年,ACP与SRI之间无相关关系(Pearson相关系数为-0.077,P=0.330);LASIK术后1年,ACP与SRI之间无相关关系(偏相关系数为-0.070,P=0.385)。结论:近视患者角膜屈光力与角膜表面规则性存在正相关关系,屈光手术可以改变这种相关性。
- 吴荒王宜张辉王春勇宋跃郑雅娟
- 关键词：近视角膜地形图屈光力
- 氯离子通道阻滞剂对人眼小梁细胞吞噬作用的影响
- 2010年
- 目的探讨氯离子通道阻滞剂—5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸5-nitro-2-(3-phenyl-propylamino)-benzoic acid,NPPB对人眼小梁细胞吞噬功能的影响。方法培养人眼小梁细胞,对其进行免疫化学染色鉴定,采用RT-PCR技术检测小梁细胞CLC-2mRNA的表达,然后应用流式细胞仪定量检测不同浓度NPPB作用下,小梁细胞对乳胶株的吞噬指数。结果体外培养的人眼小梁细胞NES染色阳性,且成功检测出CLC-2mRNA表达。当加入10μmol/L的NPPB作用6h后,小梁细胞对乳胶株的吞噬指数与对照组相比无明显改变(P>0.05),而50μmol/L的NPPB作用后,小梁细胞对乳胶株的吞噬作用明显降低(P<0.01),低于对照组,且随着加入NPPB浓度的增加,吞噬指数逐渐降低。结论氯离子通道阻滞剂浓度依赖的抑制小梁细胞的吞噬功能,且氯离子通道CLC-2可能参与调节小梁细胞吞噬过程。
- 梁巍郑雅娟
- 关键词：小梁细胞
