国家自然科学基金(81173397) 作品数:7 被引量:52 H指数:4 相关作者: 范治伟 康新 路晓光 梁正凯 战丽彬 更多>> 相关机构: 大连大学附属中山医院 遵义医学院 大连市中心医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省教育厅资助项目 大连市医学卫生科学研究计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
AQP5和CC16蛋白在大鼠失血性休克复苏后肺损伤中的表达及意义 被引量:4 2017年 目的观察大鼠肺脏水通道蛋白5(aquaporin5,AQP5)和克拉拉细胞蛋白16(Clara cell protein 16, CC16)表达变化,探讨失血性休克复苏后急性肺损伤发生的机制。方法健康清洁级雄性Sprague。Dawley大鼠,32只,随机(随机数字法)分为对照组和失血性休克复苏组两组(It=16),再按休克复苏后12h、24h分为两个亚组(n=8)。按Wiggers改良法制作失血性休克模型,将回收血液加等体积林格液回输进行复苏。取血测定血浆内毒素含量,酶联免疫法检测肺组织AQP5及血浆CC16蛋白含量。取左肺测湿/干质量比,苏木精伊红染色法观察肺组织病理改变,免疫组织化学法测定肺组织CC16蛋白和AQP5表达。结果①血浆内毒素含量:休克复苏组显著高于对照组(P〈0.01),且随时间递增。②血浆CC16蛋白含量:休克复苏组明显高于对照组(P〈0.05),且随时间递增。③肺组织AQP5含量:休克复苏组较对照组明显降低(P〈0.05),且随时间递减。④肺组织含水量(左肺湿/干比)检测:休克复苏组明显高于对照组(P〈0.05)。⑤肺组织苏木精伊红染色观察:对照组肺泡结构完整,肺泡囊清晰,肺泡间隔正常。休克复苏组肺泡间隔增宽,肺泡腔内有明显的出血渗出,中性粒细胞浸润。⑥肺组织CC16免疫组织化学评分:对照组明显高于休克复苏组(P〈0.05)。⑦肺组织AQP5免疫组织化学评分:对照组明显高于休克复苏组(P〈0.05)。结论AQP5及CC16蛋白参与失血性休克复苏后急性肺损伤发生过程,AQP5及CC16蛋白表达降低与时间呈正相关。 宋轶 路晓光 陈龙翊 范治伟 康新 白黎智 王禹 刘杰关键词:失血性休克 全身炎症反应 水通道蛋白5 两种重症急性胰腺炎造模方式对大鼠胰外器官损害的比较 被引量:2 2022年 目的比较胰胆管逆行注射牛黄胆酸钠与腹腔注射L-精氨酸两种重症急性胰腺炎(SAP)造模方式对胰外器官损害的差异。方法18只雄性远交群(SD)大鼠经随机数表法分为3组,每组6只:空白对照组(A组),L-精氨酸诱导SAP模型组(B组),牛磺胆酸钠诱导SAP模型组(C组)。造模后,分别于12、24 h割尾采血,检测谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、淀粉酶、内毒素、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,并于24 h取胰腺、肝、回结肠、肾、肺、心、脑组织,进行病理学评分。组间比较采用单因素方差分析。结果(1)12 h,B组和C组的AST(F=203.345,P<0.05)、ALT(F=303.403,P<0.05)、BUN(F=72.921,P<0.05)、Cr(F=205.601,P<0.05)、cTnI(F=35.991,P<0.05)、CK-MB(F=42.815,P<0.05)、淀粉酶(F=1300.111,P<0.05)、内毒素(F=34.158,P<0.05)、IL-6(F=541.858,P<0.05)、TNF-α水平(F=191.687,P<0.05)显著高于A组,差异均有统计学意义;24 h,B组和C组的AST、ALT、BUN、Cr、cTnI、CK-MB、淀粉酶、内毒素、IL-6、TNF-α水平显著高于A组。与12 h比较,B组的AST(189.33±23.47比65.83±6.08,F=155.732,P<0.05)、ALT水平(156.33±10.67比55.33±4.72,F=449.603,P<0.05)高于C组,但BUN(8.80±0.56比11.02±1.33,F=14.131,P<0.05)、Cr(35.30±2.65比58.77±3.65,F=162.136,P<0.05)、cTnI(0.056±0.107比0.070±0.089,F=5.972,P<0.05)、CK-MB(5.23±0.65比6.22±0.70,F=6.426,P<0.05)、淀粉酶(1445.89±70.37比2063.25±72.58,F=223.767,P<0.05)、内毒素(34.00±4.70比47.09±5.90,F=18.030,P<0.05)、IL-6(102.18±7.01比147.45±7.70,F=113.465,P<0.05)、TNF-α水平(152.35±14.43比211.95±19.27,F=36.790,P<0.05)低于C组,差异均有统计学意义。与24 h比较,B组的AST、ALT高于C组,BUN、Cr、cTnI、CK-MB、淀粉酶、内毒素、IL-6、TNF-α水平低于C组。(2)B组、C组中胰腺(F=52.612,P<0.05)、肝脏(F=9.767,P<0.05)、回肠(F=18.879,P<0.05)、结肠(F=31.398,P<0.05)、肾脏(F=54.266,P<0.05)� 杨春雨 聂梦珂 路晓光 康新 宋轶 范治伟关键词:重症急性胰腺炎 牛磺胆酸钠 L-精氨酸 丙酮酸钠液腹腔复苏对失血性休克大鼠肠黏膜屏障的保护作用 被引量:4 2014年 目的 探讨丙酮酸钠液腹腔复苏对失血性休克大鼠肠黏膜屏障的保护作用.方法 健康清洁级雄性SD大鼠,40只随机(随机数字法)分为4组:假手术组(Ⅰ组)、失血性休克模型组(Ⅱ组),复方氯化钠静脉复苏+ PD-2液腹腔复苏组(Ⅲ组),复方氯化钠静脉复苏+丙酮酸钠腹腔复苏组(Ⅳ组),每组10只.采用Wiggers改良法制备失血性休克模型.Ⅱ组行右颈总动脉、右股静脉、左股动脉插管及全身肝素化.Ⅲ组、Ⅳ组行静脉复苏的同时,分别向腹腔内注入2.5% PD-2液20 mL和2.5%丙酮酸钠液20 mL.2h后取动脉血测血气(pH、PaCO2、PaO2)和D-乳酸含量,光镜下观察各组大鼠小肠黏膜组织形态变化.结果 血气分析:Ⅲ组、Ⅳ组较Ⅱ组pH水平及PaO2含量明显升高(P<0.01);与Ⅲ组比较,Ⅳ组pH水平及PO2水平升高更为明显(P<0.05).D-LA含量:Ⅲ组、Ⅳ组较Ⅱ组明显降低(P<0.01);与Ⅲ组比较,Ⅳ组D-LA降低更明显(P<0.05).光镜下Ⅱ组大鼠小肠黏膜层绒毛高度水肿,黏膜下血管塌陷,大片黏膜绒毛坏死、脱落,缺损;Ⅲ组和Ⅳ组小肠黏膜破坏较Ⅱ组明显减轻;Ⅳ组大鼠小肠黏膜绒毛水肿、倒伏及坏死程度均轻于Ⅲ组.小肠上皮损伤指数评分:Ⅳ组高于Ⅱ组及Ⅲ组(P<0.01 orP< 0.05).结论 静脉复苏加腹腔复苏可降低失血性休克大鼠血浆D-LA含量、纠正酸中毒,提高氧分压;并且对于肠黏膜屏障的保护作用,丙酮酸钠液作用优于PD-2液. 王小周 路小光 康新 范治伟 郭帅 梁正凯关键词:肠黏膜 腹腔复苏 D-乳酸 大黄附子汤改善重症急性胰腺炎大鼠肠道动力障碍的机制研究 被引量:10 2021年 目的通过观察大黄附子汤对重症急性胰腺炎(Severe acute pancreatitis,SAP)致肠道动力障碍大鼠血清胃动素、回肠Cajal间质细胞及胃动素受体的影响,探讨大黄附子汤改善肠道动力障碍的作用及机制。方法清洁级雄性Sprague-Dawley大鼠,18只,随机(随机数字法)分为对照组、SAP组及大黄附子汤治疗组(n=6)。采用逆行胰胆管注射4%牛磺胆酸钠制备SAP大鼠模型。对照组开腹后,找到胰腺轻微翻动数次后关腹;SAP组在造模后12、24 h分别给予2 mL生理盐水(37℃)灌肠;治疗组在造模后12、24 h分别给予2 mL大黄附子汤(37℃)灌肠。于造模48 h后,各组大鼠取腹主动脉血,测定血清内毒素及淀粉酶含量,使用酶联免疫吸附法测定血清胃动素水平;取胰腺、回肠组织行苏木精伊红染色观察病理变化;采用免疫组织化学法检测回肠平滑肌组织中Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICC)表达蛋白c-kit及胃动素受体(Motilin receptor,MTL-R)蛋白的表达。结果与对照组相比,SAP组大鼠血清内毒素、淀粉酶水平均显著增高[(504.98±88.81)pg/mL vs.(17.76±5.01)pg/mL;(532.28±66.53)vs(69.45±3.61)U/L,均P<0.05],而血清胃动素水平显著降低[(195.4±6.7)ng/L vs.(301±8.10)ng/L,P<0.05],ICC表达蛋白c-kit及MTL-R免疫组织化学评分降低(P<0.05);与SAP组相比,大黄附子汤治疗组大鼠血清内毒素、淀粉酶水平均显著降低[(189.9±38.23)pg/mL vs.(504.98±88.81)pg/mL;(294.23±25.66)vs.(532.28±66.53)U/L,均P<0.05],而血清胃动素水平显著升高[(264.2±8.3)ng/L vs.(195.4±6.7)ng/L,P<0.05],同时c-kit及MTL-R免疫组织化学评分升高(P<0.05)。结论大黄附子汤通过促进胃动素的分泌、提高ICC细胞的活性及MTL-R的表达而改善SAP大鼠肠道动力障碍。 宋轶 刘杰 路晓光 战丽彬 范治伟 路童 康新关键词:重症急性胰腺炎 CAJAL间质细胞 胃动素 大黄附子汤对失血性休克急性肺损伤患者的保护作用 被引量:3 2013年 目的探讨大黄附子汤防治失血性休克并发急性肺损伤的保护作用及其机理。方法采用前瞻性、多中心、随机对Ntis床试验。收集2010年6月至2013年4月大连地区3所三级甲等医院87例失血性休克并发急性肺损伤患者的临床资料,采用随机数字法分为对照组(n=42)和大黄附子汤灌肠组(试验组,n=45)。于患者入组时及治疗1、3、7d分别取静脉血测定肿瘤坏死因子仅(TNF—d)、C反应蛋白(CRP)、血乳酸、内毒素质量浓度;测定血管外肺水指数(EVLWI)、EVLW/ITBV(胸腔内总血容量)、平均动脉压(MAP)、心脏指数(CI);测定静态肺顺应性、呼吸道阻力以及呼吸机撤离时间、低氧血症纠正时间,计算患者病死率。采用SPSS17.0软件分析实验数据,组内比较采用方差分析,两两比较采用LSD—t检验。结果与对照组比较,试验组在大黄附子汤治疗后各时间点血清TNF一仪、CRP、内毒素、血乳酸、EVLWI及EVLW/ITBV显著降低(P〈0.05或P〈0.01)。与对照组比较,试验组静态肺顺应性在大黄附子汤治疗3、7d后明显增强(P〈0.01),气道阻力则在治疗7d后有所降低(P〈0.05)。对照组与试验组比较,呼吸机撤离时间[(7.82±1.54)dVS.(5.26±1.28)d,P〈0.05]、低氧血症纠正时间[(82.42±14.61)hVS.(62.34±11.27)h,P〈0.01]、住院时间[(13.85±2.94)dVS.(10.57±2.05)d,P〈0.05]、病死率(7.5%VS.2.5%,P〈0.01)。结论大黄附子汤通过降低肠源性内毒素和促炎因子TNF—d的释放,降低血管外肺水和呼吸道阻力,提高静态肺顺应性,改善机体氧合指数,进而缩短呼吸机撤离时间和低氧纠正时间,降低失血性休克并急性肺损伤患者的病死率。 路晓光 康新 战丽彬 于健 杨荣利 范治伟 肖威强 李思瑶 梁正凯 余洁 于亮亮关键词:失血性休克 急性肺损伤 大黄附子汤 内毒素 血管外肺水 大黄附子汤对重症急性胰腺炎肠黏膜上皮细胞线粒体超微结构和离子泵的影响 被引量:15 2015年 目的 观察大黄附子汤(DHFZT)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠黏膜上皮细胞(IEC)线粒体离子泵Na^+-K^+-三磷酸腺苷(ATP)酶和Ca^2+-ATP酶以及超微结构的影响.方法 72只SD大鼠,随机分成3组:对照组、SAP组(模型组)及治疗组,每组再按1、3、6、12h分为4个亚组(n=6).经胰胆管注入5%牛磺胆酸钠(4 ml/kg)建立SAP模型.造模后0、4、8h对照组和模型组用0.9% NaCl,治疗组用DHFZT保留灌肠(1ml/100 g).测定血清肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)、二胺氧化酶(DAO)及IEC线粒体Na^+-K^+-ATP酶、Ca^2+-ATP酶水平;电镜、光镜观察胰腺、小肠结构变化.结果 经DHFZT治疗后,治疗组大鼠较模型组IEC线粒体Na^+-K^+-ATP酶[μmol Pi/mg(protein,h),1 h:6.35±0.49比6.24 ±0.46,3 h:7.01±0.57比5.45±0.39,6 h:6.57 ±0.58比4.81±0.32,P<0.05;12 h:5.98 ±0.39比4.24±0.29,P<0.01]、Ca^2+-ATP酶[μmol Pi/mg (protein·h),3 h:5.25±0.46比4.46±0.39,P<0.05;6 h:4.68±0.41比3.49±0.30,12 h:4.85 ±0.35比3.26±0.28,P<0.01]均增高,线粒体结构损伤显著减轻,血清iFABP和DAO显著降低[iFABP(μmol/L):6 h:74.67±8.57比132.46±16.43,12 h:121.48±14.35比243.43±35.91,P<0.01;DAO(g/L):3 h:100.03±16.99比178.43±26.38,P< 0.05;6 h:135.58±20.86比258.32±36.31,12 h:172.55±22.53比288.49±40.29,P<0.01].结论 DHFZT通过升高SAP时IEC线粒体离子泵Na^+-K^+-ATP酶、Ca^2+-ATP酶活性,维护IEC及其线粒体超微结构,降低血清iFABP、DAO水平. 康新 梁正凯 路晓光 范治伟 吕畅 白黎智 穆金海 李思瑶 陈龙翊关键词:重症急性胰腺炎 肠黏膜上皮细胞 线粒体 大黄附子汤 大黄附子汤治疗重症急性胰腺炎合并急性呼吸窘迫综合征患者的疗效分析 被引量:20 2013年 目的观察大黄附子汤对重症急性胰腺炎(SAP)合并急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者的治疗效果。方法采用前瞻性、多中心、随机对照临床实验。收集2011年7月至2012年8月大连地区3家三级甲等医院收住院的SAP合并ARDS的患者60例,分为健康对照组、大黄附子汤治疗组和大黄汤治疗组,每组20例。3组治疗均包括重症监护、禁食水、持续胃肠减压、机械通气、镇静解痉、抑制胰腺外分泌、营养支持、抗感染治疗。健康对照组用温皂水200ml每日2次保留灌肠,每次保留时间为30min。大黄附子汤组和大黄汤组分别用大黄附子汤和大黄汤,剂量、使用次数及保留时间均同健康对照组。观察三组患者治疗前、治疗后7d的APACHEII评分、7d的病死率,以及治疗前、治疗1、3、7d肝肾功能、血淀粉酶、血钙、内毒素、血常规、血清C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α【(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)、血气。结果与健康对照组和大黄汤组相比,大黄附子汤组患者治疗后3、7d血淀粉酶、血钙、PaO,和PaO,/FiO2、内毒素、以及APACHEⅡ评分、病死率均明显改善(P〈0.05或P〈0.01),同时患者血WBC、ALT、BUN及Cr、CRP、TNF-α、IL-1亦有不同程度好转(P〈0.05)。结论大黄附子汤可降低SAP—ARDS患者体内炎性介质,改善氧合功能,降低病死率,明显改善SAP.ARDS患者的预后,且大黄附子汤的治疗效果明显优于单纯大黄汤的治疗效果。 吕春雨 路小光 战丽彬 康新 于健 范治伟 杨荣利 王小周 梁正凯 姜磊关键词:重症急性胰腺炎 多器官功能障碍综合征 多器官功能衰竭 急性呼吸窘迫综合征 大黄附子汤