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国家自然科学基金(30971636)
作品数:
2
被引量:9
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桂耀庭
刘彦慧
张晓燕
张巧霞
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作者
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张巧霞
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刘彦慧
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桂耀庭
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Asian ...
年份
2篇
2012
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dentification of testosterone-/androgen receptor-regulated genes in mouse Sertoli cells
被引量:9
2012年
雄激素和雄激素受体(AR ) 在男精子发生和富饶起重要作用,在 Sertoli 房间的还详细的 androgen/AR 信号仍然保持不清楚。为了识别 AR,在 Sertoli 房间指向基因,我们分析了在在 Sertoli 房间缺乏 AR 的老鼠之间的睾丸的基因表示侧面(S-AR
−/y
) 和他们的同窝出生的人野类型(WT ) 老鼠。数字基因表达式分析与 WT 相比在 S-AR
−/y
鼠标睾丸识别了 2276 基因 downregulated 和 2865 基因 upregulated。到在在 Sertoli 房间以内的差别下面的进一步的钉子,我们首先构造了 Sertoli 房间线 TM4 与稳定地 transfected AR (作为 TM4/AR 说出) 并且发现雄激素在 Sertoli TM4 和 TM4/AR 房间没有通过到 transactivate AR。有趣地, AR-cDNA 的另外的短暂 transfection 与比 TM4 房间显示出更多的雄激素敏感 10 次的 TM4/AR 房间导致了重要雄激素应答。处于最大的雄激素反应被表明的条件,我们然后分析了基因表示并且发现 2313 基因的表示层次被改变多于由 AR-cDNA 的短暂 transfection 双重面对睾丸激素。在这些基因之中,包括 164 upregulated 和 439 downregulated, 603 androgen-/AR-regulated 基因在两个 S-AR
−/y
老鼠睾丸和 TM4/AR 房间被发现。用信息科学分析,基因本体论被使用分析这些 androgen-/AR-regulated 基因在精子发生的过程预言 androgen/AR 的潜在的角色。一起,用在两只 S-AR
−/y
老鼠的基因分析,睾丸和 TM4/AR 房间可以帮助我们更好在精子发生在 Sertoli 房间和他们的影响理解 androgen/AR 信号。
Qiao-Xia Zhang
Xiao-Yan Zhang
Zhen-Ming Zhang
Wei Lu
Ling Liu
Gang Li
Zhi-Ming Cai
Yao-Ting Gui
Chawnshang Chang
关键词:
睾丸支持细胞
调节基因
SERTOLI细胞
基因表达分析
瞬时转染
小鼠雄激素受体真核表达载体的构建及稳定转染TM4细胞系的建立与鉴定
2012年
目的构建小鼠雄激素受体(androgenreceptor,AR)基因真核表达载体,转染TM4细胞,建立稳定转染AR的TM4细胞系。方法应用RT.PCR方法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正确的PCR产物克隆至pcDNA3.1(-)真核表达载体中,将载体以脂质体方式转染至TM4细胞,通过G418筛选稳定转染AR的TM4细胞株,以RT.PCR和Westem-blot检测AR在转染前后TM4细胞中的表达情况。结果成功构建了pcDNA3.1(-)Ag表达质粒,建立了稳定转染的TM4细胞系。RT-PCR和Western-blot检测结果表明,AR基因在该细胞系中成功表达。结论AR真核表达载体成功构建和稳定转染TM4细胞系的建立为进一步体外研究AR的功能奠定了基础。
张晓燕
张巧霞
桂耀庭
刘彦慧
关键词:
转染
精子发生
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