国家重点基础研究发展计划(G1998051210)
- 作品数：5 被引量：25H指数：3
- 相关作者：王红阳吴孟超邱秀华江明曹慧芳更多>>
- 相关机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PTEN多克隆抗体制备和原发性肝癌组织PTEN蛋白表达的研究被引量：3
- 2003年
- 目的 :制备并鉴定抗PTEN(phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosome 10 )兔多克隆抗体 ,利用该抗体研究PTEN蛋白在原发性肝癌中表达的临床病理意义。方法 :以PCR扩增合成人PTEN全长cDNA序列 ;与 6组氨酸融合表达载体pPROEXHTb构建原核表达重组体 ,转染进大肠杆菌诱导融合蛋白表达后将其纯化 ;用融合蛋白免疫新西兰大白兔制备抗PTEN多克隆抗体 ,经Western杂交鉴定后用于免疫组织化学检测 6 0例肝癌组织中PTEN蛋白的表达。结果 :采用制备的兔多克隆抗体进行Westernblot的结果显示 ,在瞬时转染了pcDNA3 0 PTEN的MCF 7细胞裂解液中检测 1条相对分子质量约为 4 8× 10 3的特异性蛋白带 ,而转染了空载体pcDNA3 0的MCF 7细胞中未检测到该蛋白条带。免疫组化显示PTEN蛋白定位于肝细胞的胞质内 ,原发性肝癌组织内PTEN蛋白表达阳性率为4 8 33% ,显著低于对应的癌旁肝组织内 10 0 %的检出阳性率。PTEN蛋白的表达水平与肝癌患者的病理分级和有无癌栓显著相关。结论 :获得了作用特异的PTEN兔多克隆抗体 ,该抗体可应用于研究PTEN在肝癌组织中的表达分析。
- 万兴旺王红阳江明何雅琴曹慧芳刘淑琴唐亮邱秀华吴孟超
- 关键词：肝肿瘤PTEN蛋白免疫组织化学
- 人类新的肝癌高表达基因HCCA3的克隆、鉴定及其临床病理学意义被引量：1
- 2003年
- 目的 克隆新的肝癌相关基因并探索其在肝癌发生发展中的作用机制。方法 采用mRNA差异显示技术 ,分析肝癌和癌旁组织差异表达基因谱 ,获得的差异表达基因片断作为探针 ,筛选胎盘cDNA文库 ,以获得全长cDNA序列。通过Northern印迹杂交的方法 ,分析所获得的新基因在 42例肝癌组织中的表达情况 ,并分析其临床和病理学意义。结果 克隆了一个新的肝癌相关基因 ,命名为HCCA3 ,该基因的全长cDNA 170 6bp ,编码一个 2 6 4个氨基酸的蛋白质 ,在人类肝癌中广泛表达 ( 78.6 % ,33/42 ) ,并与肝癌的浸润转移密切相关。结论 HCCA3是一个新的人类基因 ,在肝癌中的异常高表达可能对肝癌的发生发展具有重要的促进作用。
- 洪毅曾锦章傅骁勇郭婷婷邱秀华王征旭刘淑琴吴孟超王红阳
- 关键词：肝癌高表达基因克隆基因表达MRNA
- 抑癌基因PTEN在原发性肝癌中的表达及意义被引量：13
- 2003年
- 目的 研究抑癌基因PTEN在原发性肝癌发生过程中的作用及意义。方法 应用免疫组织化学和northern杂交分析60例原发性肝癌及对应癌旁组织中PTEN mRNA及PTEN蛋白表达情况,结合患者的临床病理资料分析PTEN在原发性肝肝癌中的意义。结果 PTEN蛋白明确定位于肝细胞胞浆内。60例HCC的癌组织中,PTEN蛋白阳性率为48.3％(29/60),明显低于癌旁肝组织的阳性率(100％)。PTEN蛋白在肝癌组织内的表达阳性率与肝癌的病理学分级、有无癌栓有关,PTEN蛋白在肝癌组织的Ⅰ～Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级的阳性率分别为84.0％、23.8％、21.4％,无癌栓形成组PTEN蛋白表达的阳性率为55.56%,有癌栓形成组PTEN蛋白表达的阳性率为26.7％。Northern杂交显示,PIEN基因在肝癌细胞内存在四个转录子,其大小分别为5.5、4.4、2.4、1.8 kb。患者肝癌组织内PTEN mRNA的表达水平明显低于对应的癌旁肝组织。PTEN 5.5 kb和4.4 kb的转录子表达水平的降低与血清中AFP水平、有无癌栓、有无卫星灶及病理学分级有关;2.4 kb的转录子表达水平降低与患者有无癌栓、有无卫星灶有关;1.8 kb转录子表达水平的降低与临床病理学指标无关。结论 PTEN在肝癌的发生过程中可能起重要作用,其表达水平有可能作为反映肝癌进展和预后的病理学指标。
- 万兴旺王红阳江明何雅琴刘淑琴曹慧芳邱秀华唐亮吴孟超
- 关键词：抑癌基因PTEN原发性肝癌
- 信号调节蛋白α1在大鼠肝再生过程中表达的实验研究被引量：4
- 2002年
- 目的 观察信号调节蛋白α1 (SIRPα1 )在大鼠肝再生过程中的表达变化。方法 选取雄性SD大鼠 1 2 0只 ,随机分为两组 :假手术组 (SO)和肝切除手术组 (OP) ,每一组又分为 1 0个时间点 ,即手术后 2、6、1 2、2 4、30、48、72、1 2 0、1 68和 2 4 0h ,每一时间点 6只 ,切除大鼠 70 %肝脏 (肝左叶和中叶 )建立肝再生模型 ,术后在预定时间点分别取肝组织固定石蜡包埋切片 ,采用免疫组织化学方法测定肝组织SIRPα1表达。结果 再生肝组织 1 2h肝实质可见局灶散在肝细胞膜棕黄色着色 ,2 4h弥漫性肝细胞膜着色 ,1 2 0h以后肝细胞膜着色逐渐减弱。结论 SIRPα1作为一种负向调控因子参与了肝细胞再生 ,可能与肝再生终止有关 ,但关于其详细调控机制及其与其他因子相互作用的机制有待于进一步研究。
- 秦建民刘淑琴邱秀华吴孟超王红阳
- 关键词：肝再生
- 肝细胞性肝癌分子机制研究的几个热点问题被引量：5
- 2002年
- 王红阳
- 关键词：肝细胞癌分子生物学信号传递HCC
