国家科技支撑计划(2006-BAD06A09)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 相关作者：陶丽红姚利晓林矫矫吴祥甫蔡幼民更多>>
- 相关机构：中国农业科学院上海兽医研究所西南大学中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 日本血吸虫SjPP基因重组杆状病毒的构建和在昆虫细胞中的表达被引量：3
- 2008年
- 目的在昆虫细胞中表达获得可溶性的日本血吸虫SjPP重组蛋白。方法提取日本血吸虫成虫总RNA,通过RT-PCR扩增出SjPP基因的编码区序列,将其定向克隆到供体质粒pFastBac HT-B中,构建重组杆状病毒供体质粒pFastBac-SjPP,转化入大肠埃希菌DH10Bac进行转座,提取重组杆粒Bacmid-SjPP,用阳离子脂质体法转染粉纹夜蛾(TN5B1-4)细胞。利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白表达情况。结果构建了含日本血吸虫SjPP基因的重组杆粒Bacmid-SjPP,转染TN5B1-4细胞后,获得有感染力的重组杆状病毒,并在TN5B1-4细胞中成功表达SjPP蛋白。该重组蛋白可被抗SjPP蛋白的兔血清识别。结论成功构建SjPP基因重组杆状病毒,并在TN5B1-4细胞中表达,该蛋白具有良好的抗原性。
- 姚利晓陶丽红杨冠珍吴祥甫蔡幼民林矫矫
- 关键词：日本血吸虫
