目的探讨外源性PUMA(p53up-regulated modulator of apoptosis)基因对人乳头瘤病毒(HPV)阳性宫颈癌放疗敏感性的影响。方法以重组腺病毒为载体,将PUMA基因导入HPV阳性宫颈癌细胞HeLa和CaSki。应用MTT法比较携带PUMA的复制缺陷型重组腺病毒(Ad-PUMA)和携带野生型p53基因的复制缺陷型重组腺病毒(Ad-p53)对HeLa和CaSki细胞增殖的影响,平板克隆方法检测Ad-PUMA与X射线联合应用后对细胞生长的影响,并通过DAPI染色、流式细胞检术检测细胞凋亡情况。Western Blot法检测X射线处理后HeLa细胞PUMA表达。结果(1)Ad-PUMA能够明显抑制HeLa和CaSki细胞增殖,增加细胞凋亡,而Ad-p53对细胞生长无明显抑制作用。(2)X射线能够诱导HeLa细胞PUMA表达升高,具有时间和剂量效应。(3)Ad-PUMA与X射线联合应用后可显著增加细胞凋亡,减少平板克隆形成数,但Ad-PUMA对X射线引起的G2期阻滞无明显影响。结论PUMA在放射线诱导肿瘤细胞凋亡的过程中发挥作用。Ad-PUMA抑制宫颈癌细胞增殖,诱导细胞凋亡。Ad-PUMA与X射线联合应用后显著提高宫颈癌细胞放疗敏感性。
