国家重点基础研究发展计划(G1998051200)
- 作品数：35 被引量：330H指数：10
- 相关作者：郑树余捷凯陆祖宏孙啸刘建更多>>
- 相关机构：浙江大学医学院附属第二医院东南大学浙江大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学电子电信更多>>
- 乳腺癌患者血清蛋白质指纹图谱检测及其临床意义被引量：7
- 2004年
- 目的 用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱 (SELDI TOF MS)和蛋白质芯片检测乳腺癌患者血清蛋白质指纹图谱 ,初步探讨筛选候选肿瘤标志物建立的诊断模型在乳腺癌诊断中的临床意义。方法 用SELDI TOF MS技术及配套蛋白质芯片检测 4 9例乳腺癌和 37例非乳腺癌疾病患者的血清蛋白质指纹图谱 ,并运用SPSS10 0软件判别分析处理数据和筛选标志物 ,以建立诊断模型。结果 6个蛋白质峰 [86 11、16 82 7、2 5 711、2 8931、2 5 4 85和 2 4 37质荷比 (m/z) ]组合构建的诊断模型Ⅰ鉴别乳腺癌和非乳腺癌疾病的敏感性为 81 6 % (4 0 / 4 9) ,特异性为 78 4 % (2 9/ 37)。 6个蛋白质峰 (4 4 70、10 85 4、19193、3883、2 0 11和 74 70m/z)组合的诊断模型Ⅱ鉴别Ⅰ期乳腺癌与非乳腺癌疾病的敏感性为 80 0 % (12 / 15 ) ,特异性为 89 2 % (33/ 37)。 5个蛋白质峰 (2 72 6、2 70 14、2 2 4 7、4 4 77和19333m/z)组合的诊断模型Ⅲ鉴别Ⅰ期与Ⅱ～Ⅳ期乳腺癌的敏感性为 91 2 % (31/ 34) ,特异性为93 3% (14 / 15 )。结论 SELDI TOF MS在乳腺癌的诊断尤其是早期诊断、术前分期及候选肿瘤标志物筛选等方面具有一定价值 。
- 胡跃张苏展余捷凯刘建郑树
- 关键词：乳腺癌TOF指纹图谱血清蛋白质SELDI蛋白质芯片
- 荧光原位杂交技术在肺癌痰细胞学诊断中的应用被引量：12
- 2000年
- 目的 探讨荧光原位杂交技术 (FISH)在肺癌痰细胞学诊断中的应用。方法 用 7号、11号、17号、X染色体特异的着丝粒DNA探针 ,对 30例肺癌痰标本进行双色FISH。结果 30例痰标本中 ,有 2 3例为阳性痰 ,7号、17号、X、11号染色体出现超二倍体改变者分别为 6 5 .2 % (15 / 2 3)、6 0 .9% (14/ 2 3)、5 2 .2 % (12 / 2 3)和 39.1% (9/ 2 3)。在 7例细胞学诊断为可疑癌的痰标本中 ,出现 7号染色体超二倍体改变者达到 5 7.1% (4 / 7)。结论 FISH不仅可以检测痰标本中的异倍体肿瘤细胞 。
- 贾东辉张智慧刘树范程书钧
- 关键词：肺肿瘤原位杂交痰标本
- 血清蛋白质谱与人工神经网络模型诊断卵巢癌的应用性研究被引量：27
- 2005年
- 目的 建立筛选卵巢癌血清蛋白质谱与人工神经网络诊断模型的研究。方法 用H4(疏水表面)蛋白芯片结合表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI- TOF- MS)技术检测卵巢癌患者和健康人血清样本的蛋白质谱,同时采用人工神经网络筛选差异蛋白以建立诊断模型。结果 用SELDI -TOF -MS技术和H4蛋白芯片从47例卵巢癌和29名健康人血清中,筛选出4个有明显表达差异的蛋白,其质荷比(m/z)分别为5 881、7 553、6 652和9 391。用其中的18名健康人和29例卵巢癌患者样本作训练集和交叉验证后,再用筛选出的4个差异蛋白质建立人工神经网络预测模型。然后,对11名健康人和18例卵巢癌患者样本进行盲法测试,以验证该模型。结果显示,我们建立的诊断模型对卵巢癌检测的敏感性为100%,特异性为90 .9%,阳性率为94. 7%。结论 血清蛋白质谱与人工神经网络模型对小样本的卵巢癌诊断具有较高的敏感性和特异性,可扩大样本进行深入的应用性研究。
- 余捷凯郑树唐勇李力胡跃刘建
- 关键词：血清蛋白质谱SELDI-TOF-MS技术人工神经网络蛋白芯片血清样本差异蛋白
- 中国人肝脏细胞色素P4502E1表达──基因型与表型的关系被引量：12
- 2001年
- 细胞色素Ｐ４５０（ＣＹＰ）２Ｅ１代谢激活多种致癌物并参与酒精代谢和自由基形成，其基因启动子区ＲｓａＩ单核苷酸多态与酒精性肝病和某些癌症如食管癌和肺癌的易感性相关．以免疫印迹和特异底物的方法研究了ＲｓａＩ识别的不同基因型肝脏标本中ＣＹＰ２Ｅ１蛋白含量及其功能活性的差异．结果表明，ｃｌ／ｃ１基因型（ｎ＝２８）的蛋白含量（（１２４．０± ８３．９）ｐｍｏｌ／ｍｇ）高于携带至少一个ｃ２等位基因的变异基因型（（６５．５±３８．９）ｐｍｏｌ／ｍｇ， ｎ＝ ２２），差异有极显著性（Ｐ＜ ０．０１）．ｃｌ／ｃ１基因型的肝微粒体代谢４－硝基苯酚的活性也同样显著高于变异基因型（（１９８．４±２７．８）ｐｍｏｌ／（ｍｉｎ· ｍｇ）比（１０１．２± １８．１）ｐｍｏｌ／（ｍｉｎ·ｍｇ）， Ｐ＜０．０１））．结果证明，ＣＹＰ２Ｅ１表达水平和酶活性的个体差异与ＲｓａＩ识的基因多态有关，这与分子流行病学研究发现的ｃ１／ｃ１基因型是某些癌症的遗传易感因素一致．
- 谭文吴健雄唐槐静林东昕
- 关键词：CYP2E1单核苷酸多态肝微粒体中国人致癌物
- 基因芯片技术在药物研究和开发中的应用被引量：17
- 2001年
- 基因芯片技术能够对细胞或生物体中核酸序列信息进行快速、高通量和低成本的检测和分析。基因芯片已在化学药物的筛选和评价 ,新的药物作用靶分子的确定 ,药物的代谢和毒性及其个体化差异的检测 ,以及药物作用机理等方面得到了应用 ,并将为在分子水平上建立现代中药理论方面发挥重要的作用。
- 陆祖宏何农跃孙啸
- 关键词：基因芯片中药现代化药物研究药物开发
- 绿色荧光蛋白在een基因表达产物中的应用被引量：2
- 2000年
- een是一个新的人类急性白血病相关基因 ,为了确定een基因在CHO细胞中表达产物的作用部位 ,用绿色荧光蛋白载体将een基因导入其中并得到表达。结果表明 ,een基因的表达产物定位于胞浆中。
- 谢玲刘孟珉王玉芝
- 关键词：绿色荧光蛋白细胞定位
- 5-氮-2′-脱氧胞苷对RKO结肠癌细胞株p16/CDKN2基因去甲基化的转录调节作用被引量：18
- 2003年
- 目的 探讨DNA 5′CpG岛去甲基化对RKO结肠癌细胞株p16 CDKN2抑癌基因的转录调控作用及对细胞株生长增殖的生物学影响 ,寻找抗癌治疗的新靶点。方法 用特异性DNA甲基转移酶抑制剂 5 氮 2′ 脱氧胞苷 (5 Aza 2′ deoxycytidine)作用结肠癌细胞株 72h后 ,甲基特异性PCR(Methylation specificPCR ,MSP)、T A克隆及DNA测序分析甲基化状态 ,四唑盐 (MTT)比色、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、荧光定量PCR(Real timePCR)、免疫组织化学染色 (IHC)及蛋白印迹 (Westernblot)检测用药前后RKO细胞株生长倍增时间以及对p16 CDKN2mRNA及蛋白表达的影响。结果 (1)未经 5 Aza deoxycytidine作用的对照组RKO细胞基因组DNA的胞嘧啶保持不变 ,而经 5 Aza CdR作用的RKO结肠癌细胞基因组DNA的胞嘧啶均已变为胸腺嘧啶 ;(2 )与对照组相比 ,3组不同浓度 5 Aza 2′ deoxycytidine均能明显抑制肿瘤细胞生长 ,倍增时间分别增加了 1 4 9、1 6 4、1 87倍 ;(3)经 5 Aza 2′ deoxycytidine作用后 ,p16 CDKN2基因mRNA表达分别增加了 4 89、16 91、19 97倍 ,而DNA甲基转移酶mRNA表达显著降低 ;(4 )免疫组化染色和蛋白印迹均显示 ,经处理后的肿瘤细胞p16 CDKN2蛋白表达呈明显增强。结论 DNA异常甲基化与RKO结肠癌细胞有?
- 方晓明孙立峰彭佳萍董琦郑树
- 关键词：结肠癌CDKN2基因
- α粒子诱发转化人支气管上皮细胞系BEP2D中XRCC5等基因的突变检测被引量：5
- 2002年
- 目的与方法 :用聚合酶链式反应 单链构象多态性分析 (PCR SSCP)方法观察α粒子诱发人支气管上皮细胞系BEP2D细胞转化过程中相关基因的改变。结果 :细胞转化过程中 ,双链断裂修复基因XRCC5发生碱基突变 ,改变从转化早期过程就持续存在 ;而p16基因exon2和hMSH2基因exon12未见变化。结论 :XRCC5基因在α粒子照射后早期发生突变 ,使细胞丧失修复双链断裂损伤的能力 ,是α粒子诱发支气管上皮细胞转化过程中的启动事件之一。
- 楼铁柱葛世丽项晓琼吴德昌
- 关键词：支气管上皮细胞Α粒子BEP2D细胞聚合酶链反应-单链构象多态性分析
- 抗肿瘤抗生素云南霉素对细胞周期的作用及分子机理被引量：11
- 2000年
- 目的 :研究具有新型结构的胞嘧啶核苷二肽类抗生素云南霉素的抗肿瘤作用的分子机理。方法 :应用细胞培养、流式细胞光度术、Westernblot分析等方法研究云南霉素对肿瘤细胞周期的影响及分子机理。结果 :云南霉素对多种肿瘤细胞 (HL 6 0 ,KB ,GLC)有G2 /M期阻滞、S期抑制作用 ,并伴有cyclinB1蛋白、P34 cdc2 蛋白、Mpm 2蛋白表达下降。结论 :云南霉素导致HL 6 0细胞G2 /M期阻滞的分子机理可能与降低cyclinB1、P34 cdc2和Mpm 2蛋白水平有关。
- 童彤郭素萍白瑾峰甄永苏
- 关键词：药理学细胞周期抗肿瘤抗生素
- 生物信息技术分析脑胶质瘤血清蛋白指纹图诊断模型的临床意义被引量：6
- 2005年
- 目的 探讨筛选的脑胶质瘤血清蛋白指纹图诊断模型的临床应用价值。方法 用疏水性表面芯片 (H4 )和表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术 (SELDI TOF MS)及生物信息学分析方法与SPSS10 0软件 ,检测分析 2 8例胶质瘤、37例其他脑良性肿瘤和 4 0名健康人的血清蛋白指纹图 ,并建立脑胶质瘤血清蛋白指纹图诊断模型。结果 用建立的区分脑胶质瘤与健康人的血清蛋白指纹图诊断模型进行盲法检测的准确率、敏感性和特异性分别为 95 7% (2 2 / 2 3)、88 9% (8/ 9)和 10 0 % (14 / 14 )。建立的区分胶质瘤与其他脑良性肿瘤的血清蛋白指纹图诊断模型 ,盲法检测脑胶质瘤的准确率、敏感性和特异性分别为 86 4 % (19/ 2 2 )、88 9% (8/ 9)和 84 6 % (11/ 13)。建立的区分Ⅰ Ⅱ级与Ⅲ Ⅳ级脑胶质瘤的血清蛋白指纹图诊断模型的准确率分别为 85 7% (13/ 15 )、84 6 % (11/13)。结论 用SELDI TOF MS技术与生物信息分析法建立的 3个血清蛋白指纹图诊断模型对脑胶质瘤的定性诊断提供了一条新途径。
- 刘建吴敏良董琦余捷凯胡跃徐文莉沈宏郑树
- 关键词：脑胶质瘤血清蛋白指纹图盲法生物信息技术SELDI
