国家自然科学基金(30872620)
- 作品数：4 被引量：14H指数：3
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- 不同牵伸载荷对体外培养人肌腱细胞纤维型肌动蛋白的影响被引量：7
- 2011年
- 目的探讨不同牵伸载荷条件对体外人肌腱细胞纤维型肌动蛋白（F—actin）的影响，分析不同载荷条件与人肌腱细胞F-actin的变化关系。方法取5～7代人肌腱细胞加载不同牵伸载荷，其中牵伸强度分别为4％、8％、12％；时间：2、4、8、12、24h；频率：0．5H、1．0Hz。采用罗丹明标记的鬼笔环肽（rhodamine—phalloidin）及DAPI免疫荧光染色，激光扫描共聚焦显微镜观察F．actin的变化、细胞核固缩及凋亡小体形成；图像分析软件测定单个细胞平均荧光强度并进行单因素方差分析。结果设定牵伸频率为0．5Hz、牵伸强度4％，牵伸时间2h时，人肌腱细胞微丝排列紊乱、模糊；牵伸时间4h时，微丝增粗、减少，出现断裂呈细颗粒状。设定牵伸频率为0．5Hz、牵伸时间4h时，牵伸强度8％微丝解聚、断裂明显，F-actin总体分布减少；牵伸强度12％胞质微丝全部断裂，仅有部分胞膜微丝完整。设定牵伸频率为1．0Hz，牵伸强度为12％，加载时间分别为2、4、8、12、24h时，微丝断裂呈递增趋势，牵伸24h肌动蛋白微丝全部断裂。空白对照组细胞微丝完整荧光强度整体水平最高。牵伸频率固定时，随着牵伸强度递增，微丝的荧光强度呈梯度降低（P〈0．05），且差异有统计学意义；牵伸时间为8h时，各实验组微丝荧光强度增加，但低于对照组，随着时间的延长，F—actin表达量逐渐降低，24h时最低，其中，牵伸频率为0．5Hz、牵伸强度4％、牵伸时间4h时，细胞核固缩最明显，凋亡小体形成。结论不同牵伸载荷条件可引起体外培养的人肌腱细胞F—actin发生断裂、解聚，F-actin的断裂、解聚与载荷时间及应力强度呈正相关，F—actin的断裂、解聚诱导了人肌腱细胞生物学行为的改变。
- 邓银栓唐康来谢美明曹洪辉陈磊常德海董世武陶旭李辉杨会峰许建中
- 关键词：肌动蛋白类应力
- 新型肌腱细胞循环牵伸载荷系统的研制及运行效果观察被引量：7
- 2010年
- 目的研制一种能对体外培养肌腱细胞进行循环载荷牵伸的实验装置并观察其运行效果。方法用聚二甲基硅氧烷预聚物与固化剂制备微沟槽硅树脂培养皿;用可编程控制器配控制循环载荷牵伸装置的运转速度及时间,调节对培养皿的牵拉频率和时间;更换不同大小凸轮对培养皿实行不同牵拉强度。观察循环牵伸载荷系统的运行情况及稳定性;初步观察不同牵拉强度、频率和时间对体外肌腱细胞的生物学表现。结果循环牵伸载荷系统能按不同的强度、频率和时间对硅树脂微沟槽培养皿进行牵拉,运行良好且稳定。微沟槽硅树脂培养皿能对其表面生长的肌腱细胞进行改向,细胞呈平行排列,与体内肌腱细胞排列方向具有相似性。结论本研究研制的新型肌腱细胞循环牵伸载荷系统是一个较好的体外细胞牵伸载荷模型,具有运行稳定、可控性强的优点。
- 曹洪辉唐康来陈磊常廷杰董世武郑红陈前博陶旭James H-C Wang
- 关键词：肌腱细胞
- 不同界面处理方法对肩袖止点腱-骨愈合影响的研究被引量：3
- 2011年
- 目的腱-骨愈合是肩袖损伤修复的关键因素,通过生物力学及组织学观察探讨不同界面处理方法对兔肩袖止点腱-骨愈合的影响。方法取42只成年日本短耳兔,雌雄不限,体重2.0～2.5kg,随机分为3组,分别为皮质骨层组(n=18)、松质骨层组(n=18)、空白对照组(n=6)。空白对照组不作任何处理,作为正常对照;皮质骨层组:全层切断冈上肌腱中1/2部分,将冈上肌腱直接缝合固定于肱骨大结节;松质骨层组:全层切断冈上肌腱中1/2部分,去除肱骨大结节骨皮质,将冈上肌腱缝合固定于肱骨大结节。术后4、8周处死实验动物,完整切取冈上肌腱与肱骨大结节及连接部,行大体观察、HE染色及生物力学测定。结果术后4周,皮质骨层组和松质骨层组标本的冈上肌均较空白对照组萎缩,腱-骨连接部界限不明显;术后8周,两组冈上肌与空白对照组比较已无明显差异。组织学观察示皮质骨层组术后4周,界面组织层与新生骨组织层移行尚可;术后8周,界面组织层与新生骨组织层逐渐移行,骨侧形态接近正常。松质骨层组术后4周,界面组织层与新生骨组织层连接不紧密,胶原纤维排列凌乱;术后8周,骨侧大量新生骨组织,界面组织层变薄,平行的胶原纤维长入。生物力学测试示术后4、8周,皮质骨层组最大负荷均较松质骨层组高,且每组术后8周的最大负荷均较术后4周高,差异均有统计学意义(P<0.05);除抗拉强度及术后4周两组间断裂强度外,其余结果比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论兔肩袖断裂模型中,界面处理至皮质骨层在愈合强度及程度方面均优于处理至松质骨层。
- 陶旭唐康来陈磊周建波曹洪辉常廷杰李辉许建中
- 关键词：肩袖损伤腱-骨愈合松质骨皮质骨
- 不同牵伸强度对体外人肌腱细胞磷脂酶A2／环氧合酶表达的影响被引量：5
- 2011年
- 目的探讨不同循环牵伸强度对体外人肌腱细胞磷脂酶A2（phospholipase A2，PLA2）和环氧合酶（cyclooxygenase，COX）表达的影响。方法取4～6代人肌腱细胞在0．5Hz、4h条件下施加不同牵伸强度（4％、8％、12％），未牵伸组设为对照组。静置4h后，用RT—PCR、Western blot检测胞浆性PLA2（cytosolic PLA2，cPLA2）、COX1、COX2的表达，ELISA测定分泌性PLA2（secretory PLA2，sPLA2）的表达。结果对照组、4％、8％、12％牵伸组ePLA2、COX1、COX2基因表达随牵伸强度增加呈递增趋势，4％牵伸组cPLA2、COX1蛋白表达与对照组比较增加均不明显，差异无统计学意义（P〉0．05）；8％和12％牵伸组cPLA2及COX1蛋白表达与对照组比较明显增加，差异有统计学意义（P〈0．01）。4％、8％、12％牵伸组COX2与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01），且随牵伸强度增加而逐渐增加。sPLA2在4％牵伸组分泌量和对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05），8％和12％牵伸组增加明显（P〈0．01）。结论体外人肌腱细胞PLA2、COX1、COX2的表达与牵伸强度呈正相关，PLA2／COX调节系统可能成为防治肌腱病的新分子靶标。
- 谢美明唐康来邓银栓李辉周建波谭晓康陈磊许建中
- 关键词：肌腱病磷脂酶A2环氧合酶机械拉伸
