国家自然科学基金(30872616)
- 作品数：14 被引量：31H指数：4
- 相关作者：卫小春段王平陈维毅丁娟杨朝晖更多>>
- 相关机构：山西医科大学第二医院太原理工大学华中科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划山西省青年科技研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 术后关节内应用镇痛药物对关节软骨的影响被引量：1
- 2010年
- 关节手术术后疼痛可以影响康复计划的实施，增加术后并发症，如延迟肌肉力量的恢复、延长关节僵硬的时间和关节疼痛等，从而影响手术疗效。尤其对于关节镜手术而言，虽然其减小了手术创伤，减少了术后并发症，缩短了康复时间，但是术后中、重度疼痛发生率仍高达76％。术后关节内镇痛较硬膜外镇痛及静脉或肌肉注射镇痛有简单易行、效果确切、副作用小、便于护理和患者活动等优点。而由于注射所用药物多以较高浓度（多高于可口服药物口服后血药浓度）直接作用于关节软骨，
- 高宗炎杨朝晖卫小春
- 关键词：术后疼痛关节软骨镇痛药物关节内术后并发症关节手术
- 不同年龄兔关节软骨细胞的力学特性被引量：4
- 2009年
- 目的探讨不同年龄关节软骨细胞的黏弹性特性。方法新西兰白兔分为幼年组、成年组和老年组。各组动物处死后，取双膝关节软骨并进行软骨细胞分离。采用微管吸吮技术结合半无限体细胞力学模型对关节软骨细胞进行黏弹性检测。结果不同年龄兔关节软骨细胞均表现为典型的黏弹性固体蠕变特性。在微管吸吮实验中，老年兔软骨细胞吸入长度随时间的变化与幼年及成年兔软骨细胞明显不同，表现在吸入长度较大、长度变化速度较快及达到平衡时间较短，而幼年及成年兔软骨细胞的变化趋势是相似的。随着年龄的增长，其黏弹性参数（瞬时模量民、平衡模量E∞、表观黏性μ）逐渐降低，幼年组E0为（0．67±0．10）kPa、E∞为（0．37±0．09）kPa、μ为（6．29±0．92）kPa·s；成年组‰为（0．65±0．07）kPa、E∞为（0．35±0．05）kPa、μ为（6．01±0．89）kPa·s；老年组民为（0．55±0．05）kPa、E∞为（0．28±0．04）kPa、μ为（4．10±0．61）kPa·s。分析表明老年组软骨细胞的黏弹性明显低于幼年组和成年组（P〈0．001），而后两组问差异无统计学意义（P〉0．05）。结论不同年龄的关节软骨细胞都表现出典型的黏弹性固体蠕变特征；老年关节软骨细胞的黏弹性特性较幼年和成年软骨细胞明显下降。
- 卫小春李春江张全有陈维毅
- 关键词：软骨细胞骨关节炎微管
- 原代和传代兔关节软骨细胞糖胺多糖合成的动态观察被引量：2
- 2009年
- 背景:软骨细胞体外培养时常发生失分化,传代软骨细胞的失分化程度是确定软骨细胞体外扩增操作时间的重要依据,对组织工程修复软骨效果有重要意义。目的:观察不同接种密度下,软骨细胞合成糖胺多糖的能力。设计、时间及地点:单一样本观察,细胞学体外实验,于2007-01/05在山西医科大学第二医院骨科实验室完成。材料:1月龄新西兰大白兔5只,雌雄不拘。方法:无菌手术切取兔双膝关节软骨,采用0.4%Pronase酶和0.25g/LⅡ型胶原酶消化分离关节软骨细胞,体外培养。待细胞融合时,换无血清培养液。于换液后12,24,36,48,60h分别抽取上清液测量糖胺多糖质量浓度。传代2次,重复上述过程。主要观察指标:①倒置显微镜观察细胞形态。②传代对软骨细胞生长的影响。③P0,P1,P2代细胞上清液糖胺多糖质量浓度的差异。结果:P2代以内,软骨细胞形态无明显变化,但P2代细胞内空泡状颗粒增多。传代后,细胞融合时间缩短,但是上清液糖胺多糖质量浓度随传代逐渐下降(P<0.001),且P0,P1,P2代之间两两比较差异有显著性意义(P<0.001)。换液60h后,P1代软骨细胞糖胺多糖质量浓度较P0代下降24%,P2代较P0代下降74%。换液后时间越长,上清液糖胺多糖质量浓度越大(P<0.001)。换液后时间与传代之间存在交互效应,时间越长,传代细胞与原代细胞上清液糖胺多糖质量浓度相差越大(P<0.001)。结论:在体外单层培养条件下,原代软骨细胞糖胺多糖合成能力最强,传代后很快大幅下降。细胞融合后连续检测上清液糖胺多糖质量浓度是研究软骨细胞分化的有效方法。
- 李凯卫小春许刚邵越峰丁娟李鹏翠杨述华
- 关键词：软骨细胞传代糖胺多糖
- 兔膝关节软骨单位微管吸吮黏弹性力学分析被引量：3
- 2011年
- 目的 探讨体外急性消化软骨单位的生物力学特性.方法 成年8月龄新西兰白兔8只,随机分为两组,各4只.无菌条件下剖取双膝关节全层软骨,一组采用常规质量浓度0.4%的pronase酶和质量浓度0.025%的Ⅱ型胶原酶依次消化为软骨细胞;另一组采用质量浓度0.3%的dispase酶和质量浓度0.2%的Ⅱ型胶原酶联合搅拌消化3 h为软骨单位.利用微管吸吮结合半无限体细胞力学模型定量分析急性消化软骨细胞及软骨单位黏弹性力学特性,包括平衡模量（E∞）、瞬间模量（E0）和表观黏性（μ）等黏弹性参数.结果 成年软骨细胞在0.2-0.4 kPa恒定微管负压下,表现为典型黏弹性固体特征,即在微管中产生瞬间微小变形,随后发生形率单调减小的蠕变过程,其到达平衡状态时间为（110±18）s.成年软骨单位在微管吸吮负压提高到1.0～1.2 kPa时,与软骨细胞发生同样的黏弹性蠕变行为,但其瞬间吸入微管内的长度明显减少,且到达平衡状态的时间缩短为（36.5±4.5）s.同时,软骨单位黏弹性参数平衡模量（E∞）、瞬间模量（E0）和表观黏性（μ）均明显高于软骨细胞.结论 与软骨细胞相比,成年软骨单位同样表现为黏弹性固体特征,但其黏弹性力学特性明显提高.
- 段王平孙振伟李琦郝永壮王立陈维毅卫小春
- 关键词：膝关节软骨生物力学
- 阿仑膦酸钠对骨质疏松大鼠关节软骨的影响被引量：3
- 2009年
- 目的评价阿仑膦酸钠对骨质疏松大鼠关节软骨的保护作用。方法选取36只6月龄的SD雌鼠随机分为3组(每组12只):假手术组(SHAM)仅手术,不切除卵巢;去卵巢+生理盐水(OVX+NS)组和OVX+阿仑膦酸钠(ALEN)组切除双侧卵巢,其中OVX+ALEN组给予阿仑膦酸钠液(3mg/ml)每周36mg/kg剂量灌胃,SHAM组和OVX+NS组给予同等剂量0.9%生理盐水灌胃,于灌胃后4、8、12周时取大鼠近端胫骨常规脱钙,苏木素-伊红(HE)染色切片测量软骨厚度,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,切片用图像分析仪测量平均灰度值。结果4周时各组的软骨厚度相近;8、12周时OVX+NS组与OVX+ALEN组及SHAM组相比软骨厚度变薄(P<0.05);12周时OVX+NS组Ⅱ型胶原免疫组织化学染色灰度值低于OVX+ALEN组和SHAM组(P<0.05)。结论骨质疏松情况下关节软骨的结构、代谢会发生改变,服用阿仑膦酸钠对关节软骨具有保护作用。
- 娄方勇卫小春
- 关键词：软骨关节骨质疏松二膦酸盐类
- 周期性张应变对重组人白细胞介素-1β诱导的一氧化氮表达作用的实验研究被引量：8
- 2009年
- 目的在P1代1月龄雄性新西兰大白兔膝关节软骨细胞水平,观察周期性张应变(CTS)对重组白细胞介素(IL)-1β诱导的一氧化氮(NO)表达的拮抗作用,从而了解力学信号在软骨修复中的活动机制。方法将体外培养的兔膝关节P1代软骨细胞随机分为5组,每组有18个样本,分为空白对照组、IL-1β作用组及IL-1β和CTS共同作用组,CTS分别作用8、16、24h,24h后收取培养细胞上清液测定NO含量,比较各组变化。结果正常兔膝关节P1代软骨细胞表达一定量的NO,IL-1β作用组NO含量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);IL-1β和CTS共同作用组NO含量明显减低,同IL-1β作用组相比,各组间差异具有统计学意义(P<0.05),CTS作用8h最佳阻止了NO的表达。结论CTS对rhIL-1β诱导的NO表达具有强大的拮抗作用,并且CTS产生的力学信号转化成强大的生物化学信号后能够持续性地以特定方式阻滞分解介质的产生。
- 邵越峰陈维毅卫小春李晓娜
- 关键词：软骨细胞白细胞介素1一氧化氮应力
- 细胞骨架破坏对体外培养兔软骨细胞基质代谢分泌的影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察微丝、微管和中间纤维3种细胞骨架（CSK）成分破坏对体外培养关节软骨细胞基质代谢的影响。方法取2个月龄新西兰大白兔10只，取双膝关节软骨行软骨细胞培养，随机分为4组，即正常对照组、微丝破坏组（加入0．01mg／L细胞松弛素一D破坏肌动蛋白）、微管破坏组（加入0．4mg／L秋水仙素破坏微管蛋白）、中间纤维破坏组（加入175mg／L丙烯酰胺破坏波形蛋白）。培养3d后，各组取部分细胞消化并爬片，行免疫荧光染色及共聚焦显微镜荧光值半定量检测，观察细胞微丝蛋白、微管蛋白和波形蛋白的形态及含量变化。并于培养第3、6、9天取细胞上清液，用酶联免疫吸附试验（ELISA）法和阿尔新蓝法检测各组上清液中Ⅱ型胶原和糖胺多糖（GAG）的含量。结果微丝、微管、中间纤维破坏组与对照组比较，荧光度值分别从83．70、82．82、77．93降至60．45、57．86、55．56（P〈0．05，n=30）。微管破坏组和中间纤维破坏组在第3、6、9天上清液中的Ⅱ型胶原和GAG含量均明显低于对照组（P〈0．05），而微丝破坏组与对照组在第3、6、9天上清液中的Ⅱ型胶原和GAG含量差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论预设浓度的CSK破坏剂可以破坏软骨细胞相应的CSK成分，且微管和中间纤维破坏组软骨细胞基质代谢水平显著下降，而微丝破坏组对软骨细胞基质代谢的水平无明显影响。
- 曹晓明杨朝晖段王平郭恒王磊卫小春
- 关键词：软骨细胞细胞骨架
- 兔骨关节炎软骨细胞骨架变化的研究被引量：4
- 2010年
- 目的探讨软骨细胞骨架的形态及含量变化在骨关节炎(OA)发病机制中的作用。方法 3月龄雄性新西兰白兔8只,随机分为2组,每组4只,实验组行前交叉韧带切断术(ACLT),造成OA模型,对照组切开关节囊,但不行ACLT。20周后处死两组动物,取左膝做大体标本观察,行Mankin's评分及HE染色。右膝在无菌条件下取全层软骨,消化分离软骨细胞,荧光染色后用激光共聚焦扫描显微镜对软骨细胞骨架进行形态学观察及荧光强度定量检测,对数据进行两独立样本t检验和非参数检验。结果手术后20周实验组关节软骨明显退变,Mankin's评分明显高于对照组(t=7.23,P<0.05);和对照组相比,实验组波形蛋白、微管、纽蛋白形态及分布发生明显改变,荧光定量检测显示实验组中间纤维、微管和纽蛋白均低于对照组(t波形蛋白=5.40,t微管=11.86,t纽蛋白=5.21,P<0.001),微丝形态和含量两组间无统计学差异。结论 OA软骨细胞骨架中间纤维、微管和纽蛋白发生明显改变,可能与OA的发病机制有一定关系。
- 赵浩亮李亮亮段王平李昊王小虎卫小春
- 关键词：骨关节炎软骨细胞细胞骨架显微镜检查共焦
- 细胞高密度培养促进兔关节软骨细胞糖胺多糖合成作用研究
- 2009年
- 目的研究细胞密度对体外培养兔关节软骨细胞糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)合成的影响。方法1月龄新西兰兔5只,无菌手术切取双膝关节软骨,采用0.4%Pronase酶和0.025%Ⅱ型胶原酶消化分离关节软骨细胞,来源于同一只兔的软骨细胞分为两部分:一部分以密度2×104/cm2接种,传代时仍以相同密度接种;另一部分在细胞贴壁后人工降低细胞密度至2×103/cm2培养。原代(P0)和传1代(P1)细胞均在细胞融合后换液,并且于换液后12,24,36,48,60h分别抽取上清测量GAG浓度。采用重复测量资料的方差分析,比较低密度培养P0组与高密度培养P0组、P1组上清GAG浓度。结果低密度培养P0组上清GAG含量显著低于高密度培养P0组(P<0.001),且低于体外培养时间略长的高密度培养P1组软骨细胞(P<0.05)。结论高密度培养更有利于软骨细胞维持表型,是软骨平面培养的较好方式。
- 李凯卫小春徐刚邵越峰李鹏翠丁娟杨述华
- 关键词：软骨细胞糖胺多糖关节软骨
- 周期性张应变力对幼年和成年及骨关节炎软骨细胞产生糖胺多糖的影响被引量：1
- 2010年
- 目的观察周期性张应变力(cyclic tensile strain,CTS)对体外培养的幼年、成年及骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)兔软骨细胞产生糖胺多糖(Glycosaminoglycans,GAG)的影响。方法取2月龄雄性新西兰大白兔3只作为幼年组,5月龄雄性新西兰大白兔10只,随机分2组(即成年组与OA组),每组5只。OA组采用前交叉韧带切断术(ACLT)制作OA动物模型,成年组仅行双膝关节切开,但不行ACLT。成年组及OA组动物于术后20周空气栓塞处死,取左侧膝关节标本分别做大体评分及Mankin`s评分观察OA造模情况。将三组兔膝软骨细胞进行消化分离及体外培养。将每个组原代软骨细胞均分别培养于2个BioFlex6孔培养板上,随机分为对照组细胞和加载组细胞,每组6个样本,同置于培养箱内,加载组每天CTS(sin10%,0.5Hz,6h/次)作用6h,对照组不予特殊处理。加载组与对照组在首次加载后24h、48h与72h分别吸取培养细胞上清液,阿尔新蓝染色沉淀法测定上清液GAG含量,比较各组GAG分泌的变化。结果①实验组动物关节软骨明显退变,大体评分及Mankin's评分均明显高于对照组(P<0.05);②与对照各组细胞相比,幼年、成年及OA组细胞进行加载后其GAG的分泌水平随时间均升高(P<0.05);且各细胞在CTS干预前后GAG分泌随时间变化趋势存在统计学差异(P<0.05)。结论 Flexercell-4000力学加载系统可对体外培养的软骨细胞施加精确的力学负荷加载,并从刺激各类软骨细胞产生蛋白多糖。与正常细胞相比,OA软骨细胞对力学刺激的响应特点发生了较明显的变化。
- 商鹏陈维毅卫小春李晓娜
- 关键词：软骨细胞糖胺多糖
