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国家自然科学基金(81272056)

作品数：17 被引量：64H指数：5
相关作者：张海宁王英振李晓飞吕成昱王天宝更多>>
相关机构：青岛大学青岛大学医学院附属医院金华市中心医院更多>>
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文献类型

  • 17篇中文期刊文章

领域

  • 17篇医药卫生

主题

  • 8篇细胞
  • 7篇软骨
  • 6篇软骨细胞
  • 6篇骨细胞
  • 5篇关节
  • 4篇蛋白
  • 4篇基因
  • 4篇关节炎
  • 3篇蛋白酶
  • 3篇慢病毒
  • 3篇介导
  • 2篇凋亡
  • 2篇性关节炎
  • 2篇胰岛
  • 2篇胰岛素
  • 2篇胰岛素样
  • 2篇胰岛素样生长...
  • 2篇软骨细胞凋亡
  • 2篇术后
  • 2篇内质网

机构

  • 12篇青岛大学
  • 5篇青岛大学医学...
  • 1篇金华市中心医...
  • 1篇双鸭山市人民...
  • 1篇青岛市中心医...

作者

  • 12篇张海宁
  • 9篇王英振
  • 5篇吕成昱
  • 5篇李晓飞
  • 2篇徐浩
  • 2篇续宗耀
  • 2篇周峰
  • 2篇荣春
  • 2篇王天宝
  • 2篇张钊
  • 1篇施铁军
  • 1篇项金瑜
  • 1篇孟飞
  • 1篇丁昌荣
  • 1篇申成凯
  • 1篇杨骐宁
  • 1篇刘相萍
  • 1篇周勇伟
  • 1篇曹杨
  • 1篇李晓东

传媒

  • 5篇中华实验外科...
  • 3篇中国组织工程...
  • 2篇中华骨科杂志
  • 1篇临床神经病学...
  • 1篇中华创伤杂志
  • 1篇中国骨伤
  • 1篇中华风湿病学...
  • 1篇中华关节外科...
  • 1篇中国骨与关节...
  • 1篇Intern...

年份

  • 1篇2022
  • 1篇2019
  • 1篇2018
  • 1篇2017
  • 5篇2016
  • 2篇2015
  • 4篇2014
  • 2篇2013
共 17 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
慢病毒介导的Aggrecanase-1 shRNA转染体外培养的类风湿关节炎患者软骨细胞的研究被引量：1
2015年
目的 探讨慢病毒介导的RNA干扰在软骨细胞的可行性,确定是否可以通过抑制软骨细胞中Aggrecanase-1的表达实现对软骨中Aggrecan的保护作用.方法 将设计并构建的shRNAAggrecanase-1慢病毒表达载体转染进RA患者关节软骨细胞.通过荧光定量PCR检测转染后不同时间点不同转染复数下Aggrecanase-1及Aggrecan mRNA水平的变化;通过免疫细胞化学方法测定各组Aggrecan蛋白水平表达量的变化,所有数据利用SPSS 19.0软件,采用配对t检验及方差分析进行统计分析.结果 由慢病毒介导的RNA干扰中,随着Aggrecanase-1 mRNA表达水平显著下降,Aggrecan mRNA 和蛋白表达也相应地增加,特别是shRNA4组变化较为显著,其中Aggrecanase-1 mRNA由开始的1.083±0.133降为0.074±0.004（t=35.71,P＜0.05）;Aggrecan mRNA由开始的1.182±0.160增加到2.922±0.169 （t=19.43,P＜0.01）;同时Aggrecan蛋白多糖由开始的507±265增加到2 270±334（t=11.43,P＜0.05）.结论 由慢病毒介导的RNA干扰可以实现对Aggrecanase-1表达的抑制,且对软骨细胞的表型和生长速度没有负面影响;慢病毒介导的RNA干扰可以通过抑制Aggrecanase-1的表达实现对Aggrecan的保护,是一种缓解软骨退化的有效途径.
杜清峰王英振张海宁刘英魁杜明程莉王永冯志强张宝安宋振王宁谭玉春王亮杜小卫
关键词：软骨细胞
血清白细胞介素-17水平对类风湿性关节炎患者骨关节损害作用及机制被引量：12
2014年
目的探讨血清白细胞介素（IL）-17水平对类风湿性关节炎（RA）患者骨关节损害作用及机制。方法我院收治的RA患者55例作为实验组，选取健康人55例作为对照组。检测两组血清IL-17和抗环瓜氨酸多肽抗体（抗CCP）水平，对比不同x线分期的RA患者血清IL-17水平，并观察患者活动期、类风湿因子和晨僵时间与患者血清IL-17水平的关系。结果实验组患者IL-17水平[（308．42±76．14）ng、L]和抗CCP水平[（1325．3±234．1）AU/mL]显著高于健康对照组[（124．38±48．65）ng/L、（24．6±11．7）AU/ml]，差异有统计学意义（P〈0．05）；实验组患者X线分期越高，m清IL-17水平越高[期的血清IL-17水平分别为（208．23±67．41）、（322．62±78．35）和（452．81±88．32）ng/L]，差异有统计学意义（P〈0．05）；处于活动期的患者血清IL-17水平[（342．61±101．41）ng/L]显著高于非活动期的患者[（228．61±101．54）ng/L]，类风湿因子阳性的患者血清IL-17水平[（318．74±98．42）ng/L]高于类风湿因子阴性的患者[（220．56±99．62）ng/L]，晨僵时间长的患者血清IL-17水平[（356．27±88．74）ng/L]显著高于晨僵时间短的患者[（201．38±78．43）ng/L]，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论血清IL-17在RA的发生发展中起重要作用，骨关节损害严重的患者血清IL-17水平高。
朱温帅王英振夏长所张海宁王昌耀
关键词：白细胞介素-17类风湿性关节炎骨关节损害
Mash-1基因过表达对脑创伤后C57BL/6成年雄性小鼠神经细胞增殖、分化及学习、记忆功能的影响
2019年
目的观察Mash-1基因过表达对脑创伤后C57BL/6成年雄性小鼠神经细胞增殖、分化及学习、记忆功能的影响。方法将160只健康成年雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、单纯创伤组、阴性对照组和过表达组。利用重组腺病毒Ad5-mMash-1进行基因转染。于脑创伤前1 d和脑创伤后1 d、3 d、7 d、14 d采取RT-PCR检测Mash-1 mRNA水平,Western blotting检测Mash-1蛋白表达,水迷宫评价学习和记忆功能。采用免疫荧光法检测脑创伤后3 d和7 d神经细胞增殖情况。结果与假手术组比较,单纯创伤组与阴性对照组脑创伤后1 d、3 d、7 d和14 d Mash-1 mRNA相对表达量显著降低(P <0. 05～0. 01),过表达组脑创伤后1 d、3 d、7 d和14 d Mash-1 mRNA相对表达量显著升高(均P <0. 01)。过表达组脑创伤后1 d、3 d、7 d和14 d的Mash-1 mRNA相对表达量显著高于单纯创伤组与阴性对照组(均P <0. 05)。与假手术组比较,单纯创伤组脑创伤后1 d、7 d、14 d,阴性对照组和过表达组脑创伤后1 d、3 d、7 d、14 d时Mash-1蛋白相对表达量显著升高(P <0. 05～0. 01),单纯创伤组脑创伤后3 d Mash-1蛋白相对表达量显著降低(P <0. 05)。过表达组脑创伤后1 d、3 d、7 d、14 d的Mash-1蛋白相对表达量显著高于单纯创伤组及阴性对照组(均P <0. 05)。与假手术组比较,单纯创伤组脑创伤后3 d、7 d的Brd U阳性细胞数,脑创伤后3 d DCX阳性细胞数显著减少(P <0. 05～0. 01),过表达组显著增多(均P <0. 05)。过表达组脑创伤后3 d、7 d的Brd U阳性细胞数,脑创伤后3 d DCX阳性细胞数显著高于单纯创伤组(均P <0. 05)。单纯创伤组、阴性对照组和过表达组的脑创伤后1 d、3 d、7 d、14 d的逃避潜伏期差异无统计学意义(均P> 0. 05)。与假手术组比较,单纯创伤组、阴性对照组和过表达组脑创伤后1 d、3 d、7 d、14 d的逃避潜伏期均显著延长(均P <0. 05)。结论 Mash-1基因过表达增加脑创伤后成年C57BL/6小鼠海马
姜勇刚荣春
关键词：创伤性脑损伤
Piezo1蛋白经MAPK／ERK5信号通路介导软骨细胞凋亡的机制研究被引量：15
2016年
目的探讨骨关节炎患者软骨细胞中机械敏感性离子通道Piezol蛋白经MAPK／ERK5信号通路介导软骨细胞凋亡的机制。方法体外培养骨关节炎患者软骨细胞，应用细胞牵张应力加载系统对软骨细胞分别加载0h、2h、12h、24h和48h的周期性牵张应力，在各加力组加入Piez01的特异性拮抗剂GsMTx4和ERK5的特异性抑制剂BIX02188作为抑制剂组。用免疫荧光激光共聚焦显微镜观察定位Piezol蛋白在软骨细胞中的表达位置；用RT-PCR检测细胞Piez01、ERK5、凋亡相关基因Bcl-2、Bcl-2相关x蛋白（Bcl．associatedXprotein，Bax）及Bcl-2相关促凋亡蛋白（Bcl咀ssociateddeathpromoter，BAD）的mRNA相对表达量；用AV-PI凋亡试剂盒检测细胞凋亡情况。结果激光共聚焦显微镜观察Piez01蛋白可以在细胞核和细胞质表达。RT-PCR检测PizeolmRNA在骨关节炎退变软骨中有少量表达，12h加力组Pize01、ERK5、BAD和BaxmRNA的相对表达量增加，24h达到峰值，48h表达量下降。而Bcl-2mRNA的相对表达量自2h开始下降，12h降到最低值，24h开始升高。Piezol蛋白特异性抑制剂GsMTx4组Pizeol、ERK5、BAD、BaxmRNA的相对表达量均下降，Bcl-2表达量升高。ERK5特异性抑制剂BIX02188组ERK5、BAD、BaxmRNA的相对表达量均下降，Bcl．2表达量升高，Piezol表达量不变。2h加力组细胞凋亡率于早期开始增加，晚期凋亡率无明显增加；12h加力组调亡率于晚期开始增加；24h加力组晚期细胞凋亡率最高；48h加力组晚期凋亡率较24h加力组降低。RT-PCR检测结果显示Piez01、ERK5、Bcl-2、BAD和BaxmRNA的表达量与晚期凋亡具有相似的表达趋势。结论Piezol参与骨关节炎的软骨细胞晚期凋亡过程，且通过MAPK／ERK5信号通路启动细胞凋亡。
李晓飞张钊王天宝王兰凤张海宁
关键词：离子通道软骨细胞MAP激酶信号系统细胞凋亡
环氧化酶2基因沉默不影响人骨髓间充质干细胞定向分化的能力被引量：5
2014年
背景:目前环氧化酶2基因沉默在干细胞中的研究还处在初级阶段。目的:构建携带环氧化酶2基因沉默的慢病毒载体,观察其在人骨髓间充质干细胞中的表达,以及其定向分化潜能变化情况。方法:应用重组慢病毒技术构建携带沉默环氧化酶2基因和绿色荧光蛋白的慢病毒载体,并用其转染体外培养第3代的人骨髓间充质干细胞,以无目的基因的慢病毒转染人骨髓间充质干细胞的实验组和未做处理的人骨髓间充质干细胞分别作为阴性对照组和空白组进行对比。转染后7 d分别提取各组细胞的总RNA和蛋白检测环氧化酶2表达量。对环氧化酶2基因沉默的人骨髓间充质干细胞和正常人骨髓间充质干细胞定向诱导,观察环氧化酶2基因沉默对人骨髓间充质干细胞成脂、成骨、成软骨能力的影响。结果与结论:慢病毒转染3 d后,荧光显微镜下可见人骨髓间充质干细胞发出绿色荧光,阴性对照组转染效率可达90%以上,实验组转染效率达85%以上。RT-PCR和Western blot检测结果显示,环氧化酶2基因在人骨髓间充质干细胞中的基因水平和蛋白水平均得到了明显抑制。环氧化酶2基因转染对人骨髓间充质干细胞成脂、成骨、成软骨能力无明显影响。
赫天张海宁项金瑜刘相萍邓继红王英振
关键词：人骨髓间充质干细胞环氧化酶2基因沉默细胞定向分化WESTERNBLOT
汉族人群白细胞介素-6基因多态性与骨关节炎易感性的相关性研究被引量：1
2022年
目的探讨汉族人群骨关节炎易感性与白细胞介素(IL)-6基因启动子区-174G/C基因多态性的相关性。方法选取青岛大学附属医院2012年3月至2013年3月收治的膝关节内外侧间隙高度差1.5 mm以上、Kellgren-Lawrance评分为3~4分的汉族原发性膝关节骨关节炎患者448例,招募汉族528例健康志愿者作为对照。采集静脉血,应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清IL-6水平,并用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测IL-6基因启动子-174G/C(rs1800796)基因位点多态性,测序验证酶切结果。采用SNPstats软件(ICO,西班牙)进行Haedy-Weinberg(H-W)遗传平衡检验,以非条件Logistic软件回归分析估算单位点基因型与骨关节炎发病风险率,计算比值比(OR)、95%置信区间(CI)。采用Logistic回归分析方法比较不同基因型与骨关节发病风险间的关系。结果骨关节炎组中CC、GC、GG基因型频率分别为35.7%、53.6%和10.7%,对照组分别为68.2%、25.0%和6.8%。G等位基因的分布频率在骨关节炎组与对照组分别为37.5%和19.3%(χ^(2)=2.010,P<0.05),C等位基因分布频率为62.5%和80.7%(χ^(2)=3.103,P<0.05),组间差异均有统计学意义。携带G等位基因(GG或GC基因型)的研究对象其骨关节炎发病风险显著高于CC基因型者:GG基因型OR=1.842,95%CI(0.531~0.965);GC基因型OR=0.842,95%CI(1.721~2.027);CC基因型OR=0.792,95%CI(0.447~0.900)。结论在汉族人群中IL-6-174G/C基因多态性与原发性膝骨关节炎易感风险相关,且阳性位点GG、GC基因型为膝骨关节炎高风险因素,CC为低风险因素。
孟飞崔林江申成凯吕成昱
关键词：骨关节炎白细胞介素-6基因多态性
人胰岛素样生长因子I基因增强组织工程修复全层半月板缺损
2013年
目的建立全层无血运区半月板缺损模型，观察人胰岛素样生长因子I（humanin—sul in—like growth factorI，hIGF—I）基因修饰骨髓间充质干细胞（bone—marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）复合可注射藻酸钙凝胶修复半月板缺损的效果。方法制造成年山羊半月板前角无血运区全层缺损模型。实验分为四组，即基因增强组织工程（gene—enhancedtissueengineer-ing，GETE）组（GETE组）：用hIGF—I基因转染的BMSCs复合可注射藻酸钙凝胶修复半月板缺损；BMSCs组：用BMSCs复合藻酸钙凝胶修复缺损；空载体组：用藻酸钙凝胶空载体修复缺损；对照组：缺损旷置，不做任何修复。术后4，8，16周时相点行大体观察；光镜、电镜观察修复组织变化；测定修复组织中蛋白聚糖含量。结果GETE组修复半月板缺损在4—16周效果逐渐改善，缺损完全被修复组织填充，色白质韧，结合紧密，与正常半月板组织相似，大体观察优于其他各组；光镜下可见细胞随凝胶纤维排列分布，载体纤维间隙大多为细胞分泌基质所充填，细胞排列密集，基质分布均匀；扫描电镜观察到纤维排列规整紧密，纤维间缝隙为致密的细胞外基质填充；修复组织中蛋白聚糖含量较高，但与正常半月板仍有差异。结论转染hIGF—I基因的BMSCs复合可注射藻酸钙凝胶可改善全层半月板缺损的修复效果。
张海宁王英振吕成昱周峰续宗耀
关键词：半月板胫骨基因胰岛素样生长因子I
超声药物透入——全膝关节置换术后镇痛的有益辅助被引量：4
2014年
目的探讨人工膝关节置换术(TKA)后应用局部超声药物透入利多卡因辅助镇痛的效果分析。方法 2013年1月至2013年9月共100例单侧人工TKA患者随机分为研究组和对照组各50例。两组患者分别给予相同基础镇痛方案,从术后24 h起研究组患者辅助局部超声透入利多卡因治疗至术后7 d,2次/d,随访两组患者至术后3个月,分别录记术前、术后24 h、48 h、72 h、96 h、7 d的静止和运动VAS评分,记录记术前、术后48 h、72 h、96 h、7 d、术后6周及术后3个月的膝关节活动度,记录术前及术后3个月末次随访的KSS膝关节功能评分,记录患者住院期间接受盐酸哌替啶肌注次数。应用SPSS 17.0进行数据分析。结果 95例(研究组48例,对照组47例)患者最后完成随访进入统计学分析:(1)两组手术前及术后24 h的静止、运动VAS结果比较无统计学差异(P>0.05);术后48、72、96 h、7 d静止、运动VAS结果比较研究组优于对照组(P<0.05);(2)术前及术后6周、术后3个月膝关节活动度两组无统计学差异,术后48 h、72 h、96 h、7 d膝关节活动度研究组优于对照组,结果有统计学差异;(3)HSS膝关节评分术前研究组、对照组(37±7)分、(36±6)分,无统计学差异(P>0.05),术后3个月分别增加至(87±11)、(81±10)分,研究组优于对照组,差别有统计学差异(P<0.05);(4)两组患者接受盐酸哌替啶肌注次数研究组少于对照组,差别有统计学意义(X2=10.46,P<0.05)。结论超声药物透入利多卡因能够有效缓解TKA术后疼痛,减少盐酸哌替啶用量,有助于膝关节术后早期功能康复,是TKA术后镇痛的有益辅助。
徐浩王磊张海宁王英振
关键词：超声导入利多卡因膝关节关节成形术镇痛
Prevention of peripherally inserted central catheter-related infections in very low-birthweight infants by using a central line bundle guideline with a standard checklist被引量：1
2016年
Objective:To investigate the effectiveness and feasibility of using a central line bundle(CLB)guideline with a standard checklist in the prevention of peripherally inserted central catheter(PICC)-related infections(CRIs)in very low-birth-weight infants(VLBWIs).Methods:Fifty-seven VLBWIs who underwent PICC insertion at a hospital in Qingdao,China,between November 2012 and June 2013,were monitored with the CLB guideline and a standard checklist.Fifty-three VLBWIs who underwent PICC insertion were monitored by standard hospital procedures.The incidence of CRIs was compared between the two groups.Results:The incidence of infection significantly decreased from 10.0%catheter days in the control group to 2.2%catheter days in the study group(p<0.05).The indwelling catheter time significantly increased in the study group compared to the control group(31.9±15.0days vs.24.8±7.4 days,respectively,p<0.05).Colonization infections also decreased from 6.9% catheter days in the control group to 2.2%catheter days in the study group(p<0.05).The incidence of catheter-related bloodstream infections decreased from 3.1%catheter days in the control group to 0%catheter days in the study group.Conclusion:The use of a CLB guideline with a standard checklist could be an effective and feasible protocol for preventing CRIs and prolonging indwelling catheter timein VLBWIs.
Chen YuanQing ZhaoXiaoyan SongFei Meng
关键词：CHECKLIST
人胰岛素样生长因子1基因转染脂肪源性干细胞的效应
2013年
背景:人胰岛素样生长因子1基因对脂肪源性干细胞的增殖和分化也可能会产生有效作用。目的:验证人胰岛素样生长因子1基因转染对体外培养的脂肪源性干细胞的效应。方法:构建含人胰岛素样生长因子1基因的双顺反子真核表达载体pIRES2-EGFP-hIGF-1,利用阳离子脂质体Lipofectamine2000介导转染体外培养的人脂肪源性干细胞。观察基因转染后细胞增殖及形态的变化,倒置荧光显微镜观测标记基因增强绿色荧光蛋白的表达并计算转染效率,酶联免疫吸附试验检测培养上清中人胰岛素样生长因子1的浓度,免疫组织化学染色及RT-PCR检测人胰岛素样生长因子1的表达,流式细胞仪检测转染前后细胞周期的变化。结果与结论:测序及酶切证实真核表达载体pIRES2-EGFP-hIGF-1构建正确。体外培养的脂肪源性干细胞为多种形态并存,转染后6h检测到有EGFP的表达,至60h达到高峰,转染效率为(16±3)%。细胞上清中人胰岛素样生长因子1的浓度在60h达到22.65μg/L。免疫组织化学染色及RT-PCR均检测到人胰岛素样生长因子1的表达。转染后的细胞分裂增殖加快,细胞群体倍增时间缩短,S期细胞比例增多。证实人胰岛素样生长因子1基因可有效转染脂肪源性干细胞并表达人胰岛素样生长因子1蛋白质,同时可促进细胞增殖。
张海宁丁昌荣吕成昱王英振周峰续宗耀
关键词：干细胞脂肪干细胞胰岛素样生长因子脂肪源性干细胞
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