国家农业科技成果转化资金项目(2007GB24320385)
- 作品数：4 被引量：26H指数：3
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- 锥栗叶样保存时间对DNA提取质量的影响被引量：4
- 2009年
- 以野生锥栗幼叶为对照,采用硅胶干燥法,设置不同保存时间(10 d,2、4、6、8、10、11、12、13、14、15、16、17、18个月),对保存不同时间的锥栗叶样抽提基因组总DNA,利用紫外分光光度计及琼脂糖凝胶电泳检测提取DNA的浓度、纯度、得率及质量等指标,评价不同保存时间对基因组DNA的影响。结果表明:随着保存时间的延长,基因组DNA的浓度呈逐渐降低趋势,12个月后,降解加剧,纯度很低。叶样硅胶保存时间在10 d至10个月之间为最佳DNA抽提时间,所得DNA浓度、得率高,纯度较好,电泳谱带清晰。
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- 关键词：锥栗DNA提取
- 锥栗农家品种的遗传多样性及亲缘关系分析被引量：14
- 2011年
- 采用ISSR技术对37个锥栗农家品种进行遗传多样性及亲缘关系分析。从65条通用引物中筛选出13条扩增效果较好的引物进行扩增,每条引物的扩增谱带从9(引物828)16条(引物821)不等,平均每个引物产生12个ISSR片段,共扩增出156条谱带,其中多态性条带129条,占82.69%,平均每个引物扩增的DNA多态性条带为9.9条。结果表明:锥栗农家品种具有丰富的遗传多样性水平;供试农家品种的观测等位基因数1.826 9,有效等位基因数1.509 7,Nei’s基因多样度(He)为0.292 3,Shannon信息指数为0.434 4;13条引物可区分37份农家品种及其优株。根据遗传一致度构建反映品种间亲缘关系的UPGMA聚类图,37个锥栗品种可划分为2大类群7个亚类。
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- 关键词：锥栗ISSR
- 锥栗不同组织基因组DNA的提取及ISSR-PCR验证被引量：2
- 2010年
- 为提供适宜的材料和保存时间,用于锥栗分子生物学研究,试验利用改良CTAB法,以锥栗不同保存时期下的叶片组织和锥栗的不同组织为材料提取总DNA。结果表明:随着保存时间的延长,锥栗基因组DNA浓度总体呈下降趋势,硅胶干燥法保存植物材料的最佳时期为10 d,保证较好提取效果的最长保存时间为10个月;各组织中,除坚果外,其他6种材料都能提取出DNA,尽管纯度和产量不同,OD260/OD280值都在1.8以上,电泳结果显示除坚果外其他材料中提取的DNA无降解。清晰明亮的PCR产物也表明所提取的DNA满足ISSR分析的要求,尤以锥栗嫩叶、成叶、叶芽和花序效果为佳。
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- 关键词：锥栗CTAB法ISSR
- 锥栗自然居群ISSR-PCR分析技术的建立被引量：6
- 2009年
- 提取野生锥栗的基因组DNA作为ISSR-PCR模板,对反应体系中的模板用量、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度和TaqDNA聚合酶用量5个主要影响因素进行梯度试验,并对扩增程序中的退火温度与循环次数进行了探讨,初步确立了适合野生锥栗的ISSR-PCR分析技术体系,即25μL反应体系中,模板DNA40或50ng、Mg2+2.25mmol.L-1、dNTPs0.2mmol.L-1、引物0.2μmol.L-1、TaqDNA聚合酶1.0U;PCR扩增程序为:94℃预变性3min;然后94℃变性45s,(Tm+2～4℃)退火45s,72℃延伸2min,共32个循环;最后72℃充分延伸5min;1.5%琼脂糖凝胶电泳分离扩增产物。
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- 关键词：锥栗自然居群ISSR
