国家自然科学基金(81272087)
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
- 相关作者：王凤君张健何雯王裴陈刚更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市第三人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 严重烫伤小鼠主要器官自噬变化的实验研究被引量：4
- 2014年
- 目的严重烧伤后常发生主要器官结构与功能损害,其发生机制尚不完全明确。文中旨在通过初步观察严重烫伤早期不同时相点小鼠主要器官的自噬变化情况,为研究自噬在严重烧伤后器官结构与功能损害中的作用奠定基础。方法选取BALB/C小鼠24只,随机分为6组,即烫伤前组(正常对照)、烫伤后1h、2h、6h、12h和24h组,烫伤各组常规制备30%总体表面积(total body surface area,TBSA)Ⅲ度烫伤小鼠模型。采集各组动物的心、肝、肺、肾组织,用免疫印迹法检测自噬相关蛋白Beclin 1、LC3蛋白表达,透射电镜观察细胞内自噬溶酶体情况。结果小鼠烫伤后1h心、肝、肺、肾组织Beclin 1较烫伤前逐渐增加[(0.70±0.19)vs(0.60±0.16)、(0.95±0.11)vs(0.65±0.20)、(0.88±0.08)vs(0.80±0.07)、(0.82±0.12)vs(0.70±0.14)],烫伤后1 h LC3蛋白表达较烫伤前逐渐增加[(3.48±1.25)vs(2.58±0.93)、(1.24±0.52)vs(0.91±0.24)、(1.12±0.27)vs(0.87±0.29)、(1.05±0.41)vs(0.68±0.21)],肝、肺、肾组织Beclin 1(1.37±0.18、1.27±0.06、1.51±0.20)及LC3蛋白表达(2.03±0.57、1.66±0.59、2.12±0.75)于伤后12 h达高峰,随后回落,但至伤后24h时仍高于正常对照。心组织Beclin 1及LC3蛋白表达则是持续性逐渐增加,至伤后24h时仍显著高于正常对照。透射电镜下烫伤小鼠心、肝、肺、肾组织细胞内自噬溶酶体较正常对照增多。结论严重烫伤后器官细胞自噬增加,可能在烫伤后器官组织结构与功能变化中起着重要作用。
- 孙春红陈刚王凤君闫柏刚
- 关键词：烫伤自噬器官BECLIN1LC3
- 缺氧条件下人肠上皮细胞丝切蛋白活化及其与带状闭合蛋白1分布的关系被引量：2
- 2015年
- 目的研究缺氧对肠上皮细胞丝切蛋白活化的影响及丝切蛋白活化与紧密连接蛋白带状闭合蛋白（ZO－1）分布变化的关系。方法建立人肠上皮细胞株Caeo－2单层细胞培养模型，取部分细胞按照随机数字表法分为对照组（不处理）、缺氧组（置于缺氧环境下）和常氧组（置于常氧环境下），取对照组细胞（样小数为9）及其他2组培养1、2、6、12、24h的细胞（各时相点样本数均为9）采用蛋白质印迹法检测丝切蛋白及磷酸化丝切蛋白的表达。另取细胞，按照随机数字表法分为缺氧组和对照组（处理同前），取对照组细胞和缺氧组缺氧1、2、6、12、24h的细胞采用激光扫描共聚焦显微镜观察纤维状肌动蛋白的形态与分布，荧光法检测纤维状肌动蛋白与球状肌动蛋白含量的比值，激光扫描共聚焦显微镜观察细胞形态及ZO－1的分布；该3个实验中对照组样本数依次为3、6、3，缺氧组各时相点样本数依次为3、6、3。对数据行重复测量方差分析、配对t检验、LSD-t检验。结果与对照组比较，常氧组细胞培养1～24h丝切蛋白发磷酸化丝切蛋白表达量均无明显变化（t值分别为－0．385～1．701、0．040～1．538，P值均大于0．05）。与对照组比较，缺氧纰细胞培养1～24h丝切蛋白表达量也无明显变化（t值为1．032～2．390，P值均大于0．05）；但磷酸化丝切蛋白表达量均明显降低（t值为4．563～22．678，P值均小于0．01），其中培养24h降至最低值。常氧组、缺氧组细胞各时相点丝切蛋白表达量相近（t值为－0．904～1．433，P值均大于0．05）；缺氧组细胞培养l、2、6、12、24h时磷酸化丝切蛋白表达量分别为0．87±0．08、0．78±0．05、0．89±0．07、0．68±0．07、0．57±0．06，均低于常氧绀（0．90±0．07、0．97±0．06、1．00±0．06、1．00±0．05、0．99±0．05，t值为3．193～16．434，P值均小�
- 何雯王裴张健王凤君
- 关键词：缺氧肌动蛋白类肠上皮细胞丝切蛋白
- 缺氧人肠上皮细胞Slingshot蛋白表达变化及其与屏障功能的关系被引量：1
- 2016年
- 目的研究缺氧对人肠上皮细胞Slingshot蛋白表达的影响及其与屏障功能变化的关系。方法建立人肠上皮细胞株Caco-2单层细胞培养模型。取细胞按照随机数字表法分为6部分，分别行缺氧处理0h（即刻）及1、2、6、12、24h，采用生物电阻测定仪测定细胞的跨上皮电阻（TER）。另取细胞同前行缺氧处理，采用蛋白质印迹法检测带状闭合蛋白1（ZO-1）、咬合蛋白、闭合蛋白1及Slingshot-1、Slingshot-2、Slingshot-3的蛋白表达。另取细胞同前行缺氧处理，采用荧光法检测纤维状肌动蛋白及球状肌动蛋白含量。3项检测中，各时相点样本数分别为10、10、18。对数据行单因素方差分析、Dunnett检验。结果（1）与缺氧0h比较，缺氧1—24h细胞的TER值均明显降低（P值均小于0．01）。（2）与缺氧0h（均为1．00）比较，缺氧1～24h细胞的ZO-1、咬合蛋白及闭合蛋白1表达量普遍降低，于缺氧12h或24h达到最低值（分别为0．69±0．20、0．47±0．15、0．474-0．22，P〈0．05或P〈0．01）。与缺氧0h比较，缺氧1～24h细胞的Slingshot-1、Slingshot-3蛋白表达量无明显变化（P值均大于0．05）；缺氧1～24h，细胞的Slingshot-2蛋白表达量呈先降低后上升的趋势，其中缺氧24h（1．544-0．57）明显高于缺氧0h（1．00，P〈0．05）。（3）与缺氧0h比较，缺氧1、6、12、24h细胞的纤维状肌动蛋白含量明显减少，缺氧6～24h细胞的球状肌动蛋白含量明显增加，P〈0．05或P〈0．01；其余时相点2项指标无明显变化（P值均大于0．05）。结论缺氧通过诱导人肠上皮细胞Slingshot-2表达，引起丝切蛋白去磷酸化而活化以及纤维状肌动蛋白解聚，从而影响细胞间紧密连接，导致细胞屏障功能受损。
- 张健王裴何雯王凤君
- 关键词：缺氧肌动蛋白类肠上皮细胞
- 紧密连接蛋白Claudin-2研究进展被引量：8
- 2018年
- 紧密连接蛋白Claudin-2是构成细胞间紧密连接的重要蛋白分子,在维持细胞极性和紧密连接的屏障功能方面具有重要作用。Claudin-2在细胞旁路孔通道形成、阳离子通透、离子大小选择性及水分转运方面均有重要作用,并参与多种疾病如肿瘤、炎症、细菌或病毒感染等的发生与发展。本文对Claudin-2的相关研究进展进行综述,
- 冯燕海王凤君
- 关键词：紧密连接蛋白肿瘤炎症细胞因子信号通路
