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四川省教育厅自然科学科研项目(2006A054)

作品数：5 被引量：5H指数：1
相关作者：陈绍坤刘岚税青林曾永秋赵小平更多>>
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文献类型

  • 4篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 3篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 5篇基因
  • 5篇TRF2
  • 4篇细胞
  • 3篇基因治疗
  • 3篇RNA干扰
  • 3篇SIRNA
  • 2篇乳腺
  • 2篇乳腺癌
  • 2篇肿瘤
  • 2篇腺癌
  • 2篇基因干扰
  • 2篇HTERT
  • 1篇增殖
  • 1篇人乳
  • 1篇人乳腺癌
  • 1篇人乳腺癌MC...
  • 1篇乳腺癌MCF...
  • 1篇细胞基因
  • 1篇细胞增殖
  • 1篇腺病

机构

  • 5篇泸州医学院

作者

  • 5篇税青林
  • 5篇刘岚
  • 5篇陈绍坤
  • 4篇曾永秋
  • 3篇黄燕
  • 3篇余红
  • 3篇赵小平
  • 2篇赵娇

传媒

  • 2篇肿瘤防治研究
  • 1篇中国癌症杂志
  • 1篇中国妇幼保健

年份

  • 1篇2011
  • 1篇2010
  • 2篇2009
  • 1篇2008
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
人乳腺癌MCF-7细胞的TRF2 siRNA表达载体的构建和鉴定被引量：1
2011年
目的:构建表达端粒重复序列结合因子2(TRF2)基因小干扰RNA(siRNA-TRF2)的腺病毒表达载体(rAd-shRNA-TRF2),并检测该载体对人乳腺癌(MCF-7)细胞TRF2基因表达的沉默效应。方法:采用同源重组法构建重组腺病毒rAd-shRNA-TRF2表达载体,鉴定正确后转染MCF-7细胞,用FQ-RT-PCR和Western blot检测转染后48 h TRF2基因的表达,MTT法和克隆形成实验检测细胞生长状况。结果:重组腺病毒rAd-shRNA-TRF2包装成功,转染MCF-7细胞后,TRF2基因的表达明显被抑制,细胞生长显著抑制,细胞克隆形成能力显著下降。结论:腺病毒介导的TRF2 RNAi表达载体rAd-shRNA-TRF2构建成功,可有效抑制人乳腺癌MCF-7细胞TRF2基因的表达,抑制细胞生长。
陈绍坤余红刘岚税青林赵小平黄燕
关键词：TRF2肿瘤基因治疗
人TRF2基因有效siRNA序列的筛选被引量：3
2009年
目的设计合成干扰端粒重复序列结合因子2(telomeric repeatbinding factor 2,TRF2)基因表达的不同小型干扰RNA(siRNA),筛选出能高效抑制TRF2基因表达的siRNA。方法根据人TRF2 mRNA的序列,设计合成3对不同的针对TRF2的siRNA、应用脂质体LipofectamineTM2000转染试剂将三对siRNA转染人乳腺癌MCF-7细胞,实时荧光定量RT-PCR技术检测TRF2 mRNA表达水平、Western印迹法检测TRF2蛋白表达以确定干扰效果。结果设计合成的3对TRF2 siRNA中有2对siRNA可有效抑制TRF2基因表达。结论成功设计合成了针对TRF2基因的siRNA,并从中筛选出能特异且高效阻断TRF2表达的siRNA,为进一步应用RNAi技术抗TRF2基因进行肿瘤基因治疗研究奠定实验基础。
陈绍坤刘岚税青林曾永秋赵娇
关键词：TRF2RNA干扰SIRNA肿瘤基因治疗
siRNA-TRF2对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响
2010年
目的构建表达端粒重复序列结合因子2基因小干扰RNA的腺病毒表达载体(rAd-shR-NA-TRF2),探讨其对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响。方法根据预实验筛选出的针对人TRF2 mRNA的特异性siRNA靶序列,构建表达siRNA-TRF2的重组腺病毒载体rAd-shRNA-TRF2,转染人乳腺癌MCF-7细胞后,用MTT比色法检测MCF-7细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期分布情况。结果 rAd-shRNA-TRF2转染MCF-7细胞后,MCF-7细胞增殖抑制、细胞周期阻滞于G0/G1期、增殖指数显著下降。结论通过RNAi抑制TRF2基因表达进而抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖的方法有望成为肿瘤基因治疗的一个新策略。
陈绍坤刘岚税青林曾永秋赵小平黄燕
关键词：TRF2RNA干扰基因治疗
双基因干扰对MCF-7细胞基因表达抑制及细胞凋亡影响的研究
2009年
背景与目的:肿瘤细胞具有端粒酶高表达及端粒稳定性强两大特点。人端粒酶逆转录酶(hTERT@是端粒酶的催化亚单位,端粒重复序列结合因子2(TRF2@对维持端粒长度及端粒稳定性非常重要。本实验研究针对hTERT和TRF2的特异性RNAi腺病毒表达载体单独和联合转染乳腺癌MCF-7细胞后,对两基因的抑制效率以及对细胞凋亡的影响,探索针对端粒的多基因干扰对乳腺癌基因治疗的可行性。方法:构建RNA干扰腺病毒载体rAd-hTERT和rAd-TRF2,单独和联合转染MCF-7细胞后实时荧光定量PCR检测hTERT和TRF2基因表达情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果:①转染后48h,与PBS组相比,rAd-hTERT对hTERT基因mRNA的抑制率约86%,对TRF2基因表达无明显抑制(P>0.05@;rAd-TRF2对TRF2基因mRNA的抑制率约80%,对hTERT基因表达无明显抑制(P>0.05@;rAd-hTERT/rAd-TRF2联合干扰组对hTERT基因表达抑制率约88%,TRF2基因表达抑制率约85%,联合干扰与单基因干扰相比,对hTERT和TRF2基因的表达抑制差异无显著性(P>0.05@。②干扰组转染后1～6d均能促进细胞凋亡。单基因干扰组转染后3～5d凋亡最明显,第5天达凋亡高峰;凋亡率rAd-hTERT组为46.2%,rAd-TRF2组为43.5%。联合组转染后第1天凋亡率为46.2%,第2天为68.5%,第3～6天均维持在较高水平,第6天达77.6%。转染后1～6d,联合干扰细胞凋亡率与单基因干扰细胞凋亡率相比,差异均有显著性(P<0.05@。结论:①rAd-hTERT和rAd-TRF2转染MCF-7细胞48h后可分别显著抑制hTERT和TRF2基因mRNA表达,但rAd-hTERT和rAd-TRF2在抑制hTERT和TRF2基因mRNA表达上无相互协同或相互抑制作用。②rAd-hTERT和rAd-TRF2均能有效促进MCF-7细胞凋亡,且两者联合干扰效果具有累加效应。因此利用联合干扰技术靶向抑制端粒酶活性和端粒稳定性相关的多基因的表达能更高效地促进乳腺癌细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的增殖与生长。
刘岚陈绍坤税青林曾永秋余红
关键词：HTERTTRF2RNA干扰
hTERT和TRF2双基因干扰对MOF-7细胞基因表达抑制及细胞凋亡影响的研究
人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)是端粒酶表达的限速因子,通过调节端粒酶活性,进而调节端粒的长度,以补充细胞在分裂过程中缩短的端粒从而维持细胞的生...
刘岚陈绍坤税青林赵娇余红曾永秋赵小平黄燕
关键词：HTERTTRF2腺病毒载体
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