福建省自然科学基金(2011J01225)
- 作品数：13 被引量：38H指数：4
- 相关作者：倪辉蔡慧农肖安风杨秋明杨哲更多>>
- 相关机构：集美大学克莱姆森大学更多>>
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- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程农业科学更多>>
- 嗜热菌EPT3硫酸酯酶基因的克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2013年
- 利用筛选培养基筛选到一株产硫酸酯酶的深海嗜热菌EPT3,通过16S rDNA分析,将该菌株归属为Geobacillus sp.EPT3.以菌株EPT3的基因组DNA为模板,使用硫酸酯酶引物进行PCR扩增,将目的基因克隆至pUCm-T载体后进行测序.测序结果表明,克隆基因的大小为1956 bp,预测编码651个氨基酸残基.对该基因编码蛋白质进行了生物信息学分析,结果表明,该蛋白质序列与其他菌株来源的硫酸酯酶具有很高的相似性,提示本研究克隆的基因编码硫酸酯酶.该硫酸酯酶的理论分子质量为75.1 ku,理论等电点为6.90.采用同源建模法建立了Geobacillus sp.EPT3硫酸酯酶的三维结构模型,为球状结构.
- 朱艳冰倪辉蔡慧农
- 关键词：嗜热菌硫酸酯酶基因克隆生物信息学
- 柚皮苷及其酶解产物的生物活性研究被引量：5
- 2014年
- 以柚皮苷及其酶解产物柚皮素为考察目标,采用抑菌圈法测定其抑菌活性,通过测定它们对Fe3+的还原能力、对1,1-二苯-2-苦基苯肼自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)的清除能力,来评价它们的体外抗氧化性能。抑菌试验结果表明,柚皮苷及柚皮素在相同的试验浓度下,两者的抑菌能力存在着较大差别,柚皮素的抑菌能力要明显强于柚皮苷,且柚皮素对革兰阳性菌的抑制作用要强于革兰阴性菌,但两者对黑曲霉菌未表现出抑制效果。而体外抗氧化试验结果表明,两者在相同浓度下的抗氧化能力也有所不同,柚皮苷、柚皮素及对照物BHT对DPPH自由基的IC50分别为7.044、1.277、0.035 mg/mL,对羟自由基的IC50分别为1.499、1.288、1.081 mg/mL。
- 于广仁蒋超肖安风蔡慧农倪辉杨秋明
- 关键词：棘孢曲霉柚苷酶柚皮苷酶法转化柚皮素
- 微生物来源α-L-鼠李糖苷酶的分子和结构生物学研究进展被引量：7
- 2015年
- α-L-鼠李糖苷酶(α-L-rhamnosidase(EC 3.2.1.40))是一种水解酶,分布在GH13、GH28、GH78和GH106家族,其中3种GH78家族的α-L-鼠李糖苷酶具有典型的(α/α)6桶状结构,它能够特异性地水解许多糖苷类物质末端的α-L-鼠李糖基,在食品饮料加工工业和医药业中具有重要的应用价值。介绍了微生物来源的α-L-鼠李糖苷酶的性质及应用,主要阐述了α-L-鼠李糖苷酶基因的克隆、表达及该酶晶体结构方面的研究进展。
- 张霞李利君倪辉蔡慧农苏文金
- 关键词：基因克隆基因表达晶体结构
- 利用柚皮高效发酵生产柚苷酶的研究被引量：1
- 2015年
- 以棘孢曲霉为菌种,以磷酸氢二铵为氮源固态发酵柚皮生产柚苷酶,结果表明,在以柚皮为碳源和磷酸氢二铵为氮源的发酵体系中,添加疏松剂和豆饼粉对柚苷酶发酵没有显著影响,而磷酸氢二铵添加量和水分质量分数对柚苷酶合成具有显著影响.当无水柚皮粉中磷酸氢二铵和水分质量分数分别为32.4%和170.0%时,有利于提高柚苷酶发酵活力.在接种量为7.1%、发酵温度为30℃的情况下发酵6 d,柚苷酶比合成速率与棘孢曲霉的生长速率符合模型Y柚苷酶=6.2677 X-0.0381,其中Y代表柚苷酶的比合成速率,X代表比生长速率.用Davis法测得柚苷酶活力为94.61 IU/g,酶发酵的培养基成本(5×10-5元/IU)远远低于其他同类研究,酶的纯度远高于用豆饼粉为氮源所获得的酶纯度.
- 郭小红刘艳苓姜泽东李利君朱艳冰倪辉蔡慧农
- 关键词：柚皮柚苷酶固态发酵比活力
- 溶氧状况对黑曲霉DB056产柚苷酶的影响研究被引量：4
- 2012年
- 以α-L-鼠李糖苷酶和柚苷酶的酶活为评价指标,从装液量、玻璃珠数量、氧载体这3个方面来研究黑曲霉DB056摇瓶发酵产柚苷酶的溶氧条件。通过单因素优化得到的摇瓶发酵条件为:装液量35mL、玻璃珠添加个数为3个(直径4mm)、最适氧载体为1%正己烷,在此条件下α-鼠李糖苷酶活力最大可达787.8U/mL,柚苷酶活力最大可达232.5U/mL。
- 张其标肖安风倪辉游洪燕蔡慧农
- 关键词：黑曲霉柚苷酶氧载体
- L-蛋氨酸及甲醇浓度对毕赤酵母摇瓶发酵生产S-腺苷蛋氨酸的影响被引量：2
- 2012年
- 利用甲醇传感器及高效液相色谱检测毕赤酵母摇瓶发酵过程的甲醇浓度及S-腺苷蛋氨酸(SAM)浓度,发现L-蛋氨酸浓度及甲醇浓度对毕赤酵母细胞生长及合成S-腺苷蛋氨酸具有影响,据此对摇瓶发酵过程的L-蛋氨酸浓度及甲醇浓度进行优化。优化结果表明:当L-蛋氨酸浓度为7.5 g/L时,最适于SAM积累,产量达到0.83 g/L;进而利用甲醇传感器对发酵过程的甲醇浓度进行检测及控制,考察不同甲醇浓度对SAM产量的影响,毕赤酵母产SAM的最佳甲醇浓度为15 g/L,在此浓度下SAM的产量达到1.41 g/L,比对照实验增加了21%。
- 许海琴倪辉蔡慧农杨秋明伍菱肖安风
- 关键词：毕赤酵母甲醇S-腺苷蛋氨酸摇瓶发酵
- 利用DNS法快速分析及优化柚皮苷的酶解过程被引量：1
- 2014年
- 【目的】建立采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法快速测定柚皮苷水解率的方法,并利用该方法对柚苷酶催化水解柚皮苷生成柚皮素的反应过程进行优化研究。【方法】利用棘孢曲霉JMUdb058发酵得到的柚苷酶催化水解柚皮苷,采用DNS法对柚皮苷酶解过程中还原糖的生成量进行分析,经过换算得到柚皮苷的水解率,并在此基础上通过单因素实验优化柚皮苷的酶解过程。【结果】在柚皮苷的水解过程中,还原糖的生成量与柚皮苷的水解量及柚皮素的生成量均呈现出良好的线性关系,因此可利用DNS法测定体系中还原糖的生成量,并通过换算得到柚皮素的生成量。利用该方法优化柚皮苷的酶解过程得到柚苷酶转化柚皮苷的最适温度为50°C、pH为5.0、酶用量为8 U/mL、底物浓度为0.2 g/100 mL。在此条件下,柚皮苷酶解150 min后可达到平衡,此时其水解率为85%。
- 蒋超蔡慧农倪辉朱艳冰杨秋明肖安风
- 关键词：柚皮苷柚苷酶生物转化柚皮素
- 固定化脂肪酶转酯化合成维生素A棕榈酸酯的分离纯化被引量：2
- 2017年
- 利用冷冻结晶和萃取的方法对由固定化脂肪酶催化维生素A醋酸酯和棕榈酸合成的维生素A棕榈酸酯进行分离纯化,获得纯度高的维生素A棕榈酸酯。分离纯化维生素A棕榈酸酯的工艺流程为:将反应液先在4℃放置20 h,然后在-20℃放置8 h,除去过量的棕榈酸。液-液萃取,纯化。以84%乙醇-水∶石油醚=3∶1(v/v)为萃取溶剂,萃取温度4℃,萃取级数4次,此时维生素A棕榈酸酯纯度达到98.3%,本工艺为维生素A棕榈酸酯的生产提供了技术支持。
- 董丛丛黄高凌杨远帆李利君陈昭华杜希萍
- 关键词：冷冻结晶萃取分离纯化
- 响应面优化酶法澄清琯溪蜜柚汁工艺研究被引量：4
- 2014年
- 以琯溪蜜柚为主要原料,利用响应面法对酶法澄清琯溪蜜柚汁工艺进行优化.在单因素基础上选取试验因素与水平,根据Box-Benhnken试验设计原理,采用三因素三水平的响应面分析法,对各个因素的显著性和交互作用进行分析,以透光率为响应值作响应面曲线图和等高线图,并建立了工艺数学模型.结果表明:酶法澄清蜜柚汁工艺的最佳参数为果胶酶浓度200 U/mL、酶解温度49℃、酶解时间40 min;并对结果进行验证,在此条件下,蜜柚汁透光率为97.2%,与预测值97.5%接近.说明,根据Box-Behnken模型并采用响应面分析法得到的酶法澄清蜜柚汁优化工艺准确、可靠.
- 许键蔡慧农倪辉杜希萍黄高凌
- 关键词：酶法澄清响应面
- 碳源及阻遏蛋白CreA对黑曲霉产α-L-鼠李糖苷酶的影响被引量：1
- 2016年
- 【目的】研究碳源对黑曲霉JMU-TS528发酵α-L-鼠李糖苷酶的影响,并探讨葡萄糖阻遏黑曲霉合成α-L-鼠李糖苷酶的分子机制。【方法】分别用5种单一碳源进行摇瓶发酵,高效液相色谱法测定经黑曲霉发酵后产物中的α-L-鼠李糖苷酶活性;通过在培养基中添加葡萄糖进行液态发酵,研究葡萄糖对黑曲霉JMU-TS528产α-L-鼠李糖苷酶的影响,并用实时定量PCR技术检测α-L-鼠李糖苷酶基因rha和葡萄糖抑制基因Cre A的相对表达量。【结果】黑曲霉JMU-TS528在以柚皮苷、橘皮苷、芸香苷和鼠李糖为唯一碳源时可分泌α-L-鼠李糖苷酶,以葡萄糖为唯一碳源时不能合成α-L-鼠李糖苷酶;培养基中添加葡萄糖后,黑曲霉发酵产物中α-L-鼠李糖苷酶活性降低,黑曲霉α-L-鼠李糖苷酶基因rha表达量降低,而葡萄糖抑制基因Cre A表达量上升。【结论】黑曲霉JMU-TS528菌株液态发酵条件下合成α-L-鼠李糖苷酶需要诱导物作为碳源,该菌株合成α-L-鼠李糖苷酶的能力受到葡萄糖的调节作用,此调控过程可能通过一个依赖阻遏蛋白Cre A的机制实现。
- 张霞李利君倪辉肖安风陈峰苏文金
- 关键词：黑曲霉
