国家自然科学基金(30260125)
- 作品数：19 被引量：29H指数：3
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- 成年恒河猴和大鼠脊髓神经元及星型胶质细胞的特异识别被引量：1
- 2011年
- 目的研究成年恒河猴和大鼠脊髓神经元及星型胶质特异标记核蛋白(NeuN)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在两类动物脊髓的分布及其特异性.方法取成年恒河猴和大鼠脊髓组织,冰冻切片,用NeuN抗体和GFAP抗体行免疫组织化学SP法染色,观察NeuN和GFAP在大鼠和猴脊髓的免疫反应分布,探讨抗体标识特异性.结果猴和大鼠脊髓灰质神经元胞浆、突起和胞核均有NeuN阳性染色,但大鼠脊髓染色强于猴脊髓染色,特异性更高.GFAP在大鼠和猴脊髓星型胶质细胞均有分布,白质强于灰质,两者类似.结论识别鼠类的神经元核蛋白抗体NeuN和GFAP抗体可于灵长类脊髓染色,能有效标示灵长类脊髓神经元和星型胶质细胞.
- 李玉王波但齐琴王廷华
- 关键词：脊髓NEUNGFAP
- 体外培养神经干细胞CNTF、TGF-β1和IGF-1的表达被引量：1
- 2011年
- 目的研究培养神经干细胞(NSC)中CNTF,TGF-β1,IGF-1基因表达情况.方法取小鼠胎鼠海马,分离纯化培养NSC,提取总RNA,RT-PCR技术检测CNTF,TGF-β1,IGF mRNA的表达情况.结果培养NSC中各因子mRNA均有表达;CNTF,TGF-β1表达较强,IGF-1表达较弱.结论体外培养的NSC表达CNTF,TGF-β1含量较高,可能是应用其治疗神经疾病的理论基础.
- 赵楠刘俊林娜王廷华
- 关键词：CNTFTGF-Β1IGF-1RT-PCR
- 神经干细胞移植对脑挫伤大鼠神经功能恢复神经元存活和轴突再生的影响被引量：8
- 2010年
- 目的 观察神经干细胞（NSCs）移植对脑挫伤大鼠神经功能恢复影响,并探讨其机制.方法 24只SD大鼠以投币法分为3组：假手术组、手术组和NSCs移植组.采用自由落体致大鼠皮质运动区脑损伤模型,将培养纯化并鉴定的NSCs于术后当天移植入损伤位点周围;术后0d、3d、7d、14d行神经功能缺失（NSS）评分,观察动物运动和平衡功能缺损与恢复情况;14d时取脑组织用免疫荧光技术检测hochest标记的移植NSCs在体内存活、迁移;用神经元核蛋白（NeuN）、生长相关蛋白（GAP-43）抗体检测并计数宿主神经元存活和局部轴突再生.结果 与假手术组比较,脑外伤组大鼠脑挫伤后即出现不同程度抽搐,瘫痪,平衡功能缺失.神经功能缺损评分较假手术组明显升高,并随时间推移有所降低.而NSC移植组的NSS评分至第7天后与单纯手术组比较有明显减少[（4.38±0.74）分,（5.50±1.07）分,P＜0.01].Ho-chest标记的移植NSCs能在宿主脑组织存活,并向四周迁移.免疫组化染色显示宿主NeuN阳性神经元[（51.46±3.303）个,（42.83±5.401）个,P＜0.01]和GAP-43阳性纤维数量[（13.3±1.7）个,（8.7±1.1）个,P＜0.01]在NSC移植组明显增多.结论 NSCs移植能在挫伤脑组织存活、迁移,并促进宿主神经元存活、局部轴突再生和改善脑挫伤大鼠神经功能.
- 段宇但齐琴王健陈珊珊王廷华章为
- 关键词：脑挫伤神经干细胞移植神经功能评价神经元存活轴突再生
- 针刺及内源性c-Fos、c-Jun对体外培养备用背根节的影响
- 2007年
- 目的探讨部分背根切除和针刺及内源性c-Fos和c-Jun对体外培养备用背根节(DRG)的作用。方法制备备用根猫模型;采用针刺备用根猫模型、细胞培养以及在部分培养液中加入抗c-Fos/c-Jun抗体的方法,将实验分为针刺组、抗c-Fos抗体组、抗c-Jun抗体组及备用DRG组;并用抗神经元特异性烯醇化酶(NSE)抗体行免疫细胞化学ABC法染色进行神经元鉴定。结果免疫组化染色可见95%以上的细胞为N SE阳性反应的细胞,且为典型的体外培养的DRG神经元。体外培养备用根组、抗c-Fos抗体组、抗c-Jun抗体组神经元突起的平均长度均比针刺组短(P<0.05);抗c-Fos/c-Jun抗体组均比备用根组长(P<0.05)。结论针刺可促进体外培养DRG神经元的突起生长作用;内源性c-Fos、c-Jun可能对体外培养DRG神经元突起生长有促进作用。
- 王特为王廷华周雪张连双徐新运
- 关键词：部分背根切断针刺C-JUNC-FOS
- 嗅鞘细胞移植促进脑损伤大鼠神经功能恢复及其作用机制研究被引量：5
- 2010年
- 目的 观察嗅鞘细胞移植对脑损伤大鼠神经功能恢复及神经元存活的影响并探讨其作用机制.方法 对经培养纯化的嗅鞘细胞作NGFRp75免疫细胞化学染色鉴定并制备移植用细胞悬液,部分细胞预作荧光标记用于移植后观察存活情况;24只SD大鼠平均分成3组：假手术无损伤组（A组）,大鼠脑皮质运动区损伤组（B组）,相同脑损伤后嗅鞘细胞移植组（C组）;术后当天及第3,7,14天分别对各组动物进行神经功能缺损严重程度（NSS）评分;术后第14天取损伤部位组织作神经元核心抗原免疫组化（NeuN）检测并计数阳性细胞数量;数据采用SPSS17.0软件进行统计学分析.结果 （1）培养的嗅鞘细胞呈NGFRp75阳性,阳性率90%;（2）移植14d后核荧光标记的嗅鞘细胞在宿主体内存活良好;（3）术后第14天B组NSS评分为[（2.00±0.53）分],C组为[（1.25±0.46）分],明显优于B组（P〈0.05）;（4）NeuN阳性细胞计数B组为[（39.2±7.1）分],C组为[（45.8±6.0）分],明显优于B组（P〈0.05）.结论 嗅鞘细胞移植可明显促进脑损伤大鼠神经功能恢复,其机制可能与嗅鞘细胞促进宿主神经元存活有关.
- 王健但齐琴段宇陈珊珊李小京王延华周雪
- 关键词：嗅鞘细胞脑损伤细胞移植神经功能恢复神经元存活
- 体外培养神经干细胞NGF、BDNF和NT-3及其受体trkA、trkB和trkC的表达被引量：2
- 2011年
- 目的检测体外培养神经干细胞(NSC)神经生长因子(NGF),脑源性深营养因子(BDNF),神经营养因子3(NT-3)及其受体trkA、trkB、trkC的表达.方法胎鼠海马神经干细胞培养并鉴定后,提取其总RNA,RT-PCR技术检测NGF、BDNF、NT-3及其受体trkA、trkB、trkC的表达情况.免疫组化染色观察三种生长因子在NSC的分布和亚细胞定位.结果 RT-PCR显示NSC表达三种生长因子及其受体mRNA.免疫组化染色显示NSC表达三种生长因子蛋白,免疫阳性产物主要分布于细胞质.结论体外培养NSC表达NGF,BDNF,NT-3及其受体,提示三种因子对NSC发育和发挥生物学功能可能有重要作用.
- 李玉王波林娜王廷华习杨彦彬
- 关键词：神经干细胞
- 神经干细胞移植对脊髓全横断大鼠运动行为和大脑运动皮质Caspase-3表达的影响被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨神经干细胞移植对脊髓全横断大鼠运动行为和大脑运动皮质Caspase-3表达的影响.方法 建立成年SD大鼠脊髓全横断（SCT,T9）模型.分假手术组、SCT组、NSC移植组,每组13只动物.其中每组8只动物于NSC移植后7d时用蛋白免疫印迹法检测MC内Caspase-3蛋白的表达变化（β-actin作内参照）.另5只动物于NSC移植后16周时进行后肢运动功能（BBB）评分,处死动物用免疫组织化学技术检测Caspase-3在MC的细胞定位分布.结果 与假手术组比较[（21±0）分],大鼠SCT 16周时后肢运动功能BBB评分为[（5.16±1.19）分];而脊髓内NSC移植组BBB评分为[（7.58±0.99）分],组间比较有统计学意义（P＜0.05）;Caspase-3蛋白在MC运动神经元表达,免疫阳性反应物分布于细胞浆.SCT导致MC区Caspsse-3蛋白表达（0.89＋0.12）较假手术组（0.61＋0.10）明显上调（P＜0.05）,而NSC移植明显降低MC区Caspase-3表达水平（0.76＋0.11）（P＜0.05）.结论 NSC脊髓内移植能有效下调皮质运动区Caspase-3表达水平,并促进SCT大鼠后肢运动功能改善.
- 李玉荣荣李云王廷华
- 关键词：神经干细胞细胞移植凋亡基因
- 环孢A处理对大鼠横断脊髓cdk4表达的影响
- 2011年
- 目的探讨环孢霉素A处理对大鼠横断脊髓cdk4表达的影响.方法成年SD大鼠分SCT组(T9横断),和SCT后给予环孢霉素A处理组.每组13只动物.动物于环孢霉素A处理7 d后处死,其中每组5只用免疫组化染色确定cdk4在脊髓的定位分布,另8只动物用RT-PCR技术确定cdk4在损伤脊髓的表达变化.结果与手术组比较(0.99±0.11),环孢霉素A处理(1.12±0.15)导致cdk4在损伤脊髓的表达明显上调(P<0.05);免疫组化染色显示cdk4主要分布在脊髓灰质神经元.结论环孢霉素A处理能有效上调损伤脊髓cdk4表达水平,提示环孢霉素A发挥免疫抑制作用可能与cdk4的调节有关.
- 李玉王波但齐琴王廷华
- 关键词：环孢霉素A脊髓全横断CDK4免疫组化
- 环孢A处理对脊髓损伤大鼠后肢骨骼肌RAF-1表达的影响
- 2011年
- 目的探讨环孢霉素A处理对脊髓损伤大鼠后肢骨骼肌RAF-1 mRNA表达的影响.方法成年SD大鼠分SCT组(T9横断),和SCT后给予环孢霉素A处理组.脊髓横断组用环孢霉素A处理(1 mg/200 g)7 d后处死动物.取后肢骨骼肌用免疫组化染色(n=5)确定RAF-1 mRNA在后肢骨骼肌的定位分布.RT-PCR技术检测RAF-1 mRNA在损伤脊髓大鼠后肢骨骼肌的表达变化(n=8).结果与手术组比较(0.95±0.13),环孢霉素A处理(0.75±0.14)导致RAF-1 mRNA在损伤脊髓大鼠后肢骨骼肌的表达明显下调(P<0.05);RAF-1蛋白产物主要分布在细胞浆.结论环孢霉素A处理能有效下调脊髓损伤大鼠后肢骨骼肌RAF-1 mRNA表达水平.
- 王波李玉但齐琴王廷华
- 关键词：环孢霉素A脊髓全横断免疫组化RT-PCR
- VEGF和NGF在人脑胶质瘤的表达变化被引量：1
- 2009年
- 目的研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)和神经生长因子(NGF)在胶质瘤内的表达,探讨它们与胶质瘤病理分级的关系及其在胶质瘤发生过程中的作用。方法通过免疫组织化学SP法和免疫印迹技术检测5例正常脑组织和20例胶质瘤中VEGF和NGF的表达。结果VEGF和NGF在胶质瘤及正常脑组织内均有表达。VEGF主要分布于胶质瘤细胞的细胞浆,而NGF在胶质瘤细胞胞核和胞浆均有表达。免疫印迹结果显示:VEGF和NGF在胶质瘤中的蛋白水平均高于正常脑组织,并且随着胶质瘤病理级别(Ⅰ～Ⅳ)的增高蛋白表达逐渐增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论VEGF和NGF在胶质瘤内的表达均高于正常脑组织,且随着病理级别的增高而增加,提示VEGF和NGF在胶质瘤的发生过程中可能起重要的作用,其水平高低与胶质瘤的恶性程度有关。
- 李劲涛严琪余化霖
- 关键词：内皮细胞生长因子神经生长因子胶质瘤免疫印迹
