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四川省教育厅重点项目(07ZA040)

作品数:2 被引量:2H指数:1
相关作者:杨艳刘智飞陈桂兰曾晓荣裴杰更多>>
相关机构:泸州医学院更多>>
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相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 2篇心房
  • 2篇心房肌
  • 2篇基因
  • 2篇基因表达
  • 1篇心房颤动
  • 1篇心房颤动患者
  • 1篇心肌
  • 1篇心肌细胞
  • 1篇质粒
  • 1篇细胞
  • 1篇慢性
  • 1篇慢性心房颤动
  • 1篇慢性心房颤动...
  • 1篇克隆
  • 1篇基因表达质粒
  • 1篇基因克隆
  • 1篇肌细胞
  • 1篇钾通道
  • 1篇房颤
  • 1篇MRNA水平

机构

  • 2篇泸州医学院

作者

  • 2篇谭晓秋
  • 2篇白志茹
  • 2篇裴杰
  • 2篇曾晓荣
  • 2篇陈桂兰
  • 2篇刘智飞
  • 2篇杨艳
  • 1篇周文

传媒

  • 1篇中华心血管病...
  • 1篇泸州医学院学...

年份

  • 2篇2009
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
慢性心房颤动患者心房肌KChIP2基因mRNA水平的定量检测被引量:2
2009年
目的心房颤动(房颤)是最为常见的快速性心律失常之一。钾通道相关蛋白2(K^+ channel interacting protein 2,KChIP2)是心肌细胞瞬时外向钾通道的重要辅助亚单位,在Ito发挥正常功能中起着重要的作用。报告采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术通过对房颤时KChIP2和Kv4.3基因mRNA水平进行定量研究,探讨KChIP2在房颤中的作用和对于瞬时外向钾通道的可能调控机制。方法(1)30例风湿性心脏病患者分为两组:窦性心律组(窦律组)13例,持续性房颤组(房颤组)17例,取其常规切除的右心耳组织作为研究对象;(2)提取心房肌组织总RNA,通过RT-PCR和TA克隆技术构建含有目的基因片段的质粒标准品;(3)以GAPDH为内参照基因,采用SYBR Green Ⅰ法实时荧光定量PCR技术检测持续性房颤和窦律患者KChIP2和Kv4.3基因mRNA水平。结果(1)标准曲线和熔解曲线:标准曲线线性关系良好,相关系数R^2〉0.99。熔解曲线呈明显单峰状,退火温度与预测值基本一致;(2)窦律组和房颤组KChIP2/GAPDH比值分别为0.2200±0.0388、0.1468±0.0452,房颤组KChIP2基因mRNA水平低于窦律组,P〈0.01;窦律组和房颤组Kv4.3/GAPDH比值分别为0.5257±0.1427、0.3946±0.1826,房颤组Kv4.3基因mRNA水平低于窦律组,P〈0.05。结论与窦律患者相比,房颤患者KChIP2基因和Kv4.3基因明显下调,KChIP2和Kv4.3基因下调是房颤时Ito电流下调的分子基础。
谭晓秋杨艳刘智飞白志茹周文裴杰陈桂兰曾晓荣
关键词:心房颤动钾通道基因表达
人心房肌KChIP2基因表达质粒pEGFP-KChIP2的构建和鉴定
2009年
目的:KChIPs作为瞬时外向钾通道(Ito)最重要的辅助亚基,在调控通道基因表达和电流特性中起重要作用。本实验拟构建人心房肌KChIP2基因表达质粒,为研究KChIP2对Ito的调控功能奠定基础。方法:①提取人心房肌总RNA,逆转录得到cDNA;②通过特异性引物进行PCR扩增得到KChIP2编码区全长序列,亚克隆到pMD18-T载体中,得到重组克隆质粒pMD18-T-KChIP2;③再设计带有酶切位点Hind Ⅲ和BamH Ⅰ的特异性引物,对重组克隆质粒pMD18-T-KChIP2进行PCR扩增,得到含有酶切位点的KChIP2编码区全长序列;④对含有酶切位点的KChIP2全长片段和pEGFP-c1进行Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切反应,然后进行电泳后胶回收,再进行连接和转化反应;⑤提取质粒,测序鉴定。结果:质粒测序结果与PubMed数据库KChIP2(AY026328)序列比对,同源性为99%。结论:成功构建人心房肌KChIP2基因表达质粒,为下一步转染实验研究KChIP2对瞬时外向钾通道的功能调控奠定了基础。
谭晓秋曾晓荣白志茹杨艳刘智飞陈桂兰裴杰
关键词:心肌细胞基因克隆
共1页<1>
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