河南省科技攻关计划(001170209)
- 作品数：6 被引量：27H指数：4
- 相关作者：董子明黄玉敏杜英陈绍倩赵明耀更多>>
- 相关机构：郑州大学郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省医学科技创新人才工程项目河南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脐血树突状细胞分泌外来体的特性及其增强CTL杀伤活性的研究被引量：5
- 2006年
- 目的探讨脐血树突状细胞(UBDC)及其分泌的亚细胞结构外来体(exosomes)的特性,以及他们对细胞毒性T细胞(CTL)杀伤活性的增强作用。方法分离脐血单个核细胞(UBMC),用rhSCF、rhGM-CSF及rhIL-4诱导12d,加入经反复冻融提取的肿瘤细胞膜抗原,继续培养2d。收集DC并从其培养上清中通过离心(1×105g)分离外来体。用流式细胞术、SDS-PAGE、透射电子显微镜(TEM)和MTT比色法,对DC和外来体的特性及其对CTL杀伤活性的增强作用进行分析。结果用3种细胞因子体外诱导UBMC12d,可使其扩增10倍,并出现DC典型的形态特征。负载肿瘤抗原后,细胞表面可高表达MHC-I、MHC-II、CD40、CD80、CD86、CD11c和CD54。利用超速离心法能从DC培养上清中分离出外来体。混合淋巴细胞反应(MLR)和CTL杀伤活性的分析表明,脐血DC分泌的外来体能有效地刺激T细胞增殖并增强CTL的杀伤活性。结论由UBMC可诱导出大量的DC并分泌外来体。后者可有效地向CTL细胞递呈肿瘤抗原使之活化并增强其杀伤活性。
- 杜英陈绍倩黄玉敏董子明
- 关键词：脐血树突状细胞外来体细胞毒效应
- 小鼠骨髓树突状细胞pcDNA3-hCEA转染疫苗的抗瘤作用被引量：6
- 2002年
- 目的 :将pcDNA3 -hCEA转染小鼠骨髓树突状细胞 (DCs) ,观察其诱导BALB/c小鼠对CT2 6(hCEA+ )的抗肿瘤免疫效应。方法 :采用rmGM -CSF和rmIL - 4体外诱导培养小鼠骨髓DCs;构建真核表达质粒pcDNA3 -hCEA ;并用lipofectamine将其转染DCs,制备DCs(pCDNA3 -hCEA)疫苗 ;同时制备CT2 6(hCEA+ ) ;采用RT -PCR检测DCs(pCDNA3 -hCEA)中CEAmRNA的表达 ,采用放射免疫法检测DCs(pCDNA3 -hCEA)培养上清中CEA的含量 ;使用DCs(pCDNA3 -hCEA)疫苗体外诱导小鼠同种异体T淋巴细胞靶向性杀伤。采用DCs(pcDNA3 -hCEA)疫苗预防免疫BALB/c小鼠 ,观察其对于荷临界致瘤量CT2 6(hCEA+ )小鼠的抗肿瘤效应。结果 :经G41 8筛选 ,DCs(pCDNA3 -hCEA)有 1 4 %的获得率 ;RT -PCR检测表明DCs(pCDNA3 -hCEA)内CEAmRNA呈阳性表达 ;放射免疫法检测表明DCs(pCDNA3 -hCEA)能微量表达人CEA ;DCs(pCDNA3 -hCEA)能够有效诱导CEA靶向免疫杀伤。DCs(pcDNA3 -hCEA)疫苗延长荷CT2 6(hCEA+ )瘤小鼠生存期 1周至 4周。结论 :编码肿瘤抗原基因的真核表达质粒转染的树突状细胞 。
- 黄幼田董子明赵明耀杨洪艳张义国郑智敏马俊芬汤黎明陈宁
- 关键词：小鼠骨髓树突状细胞癌胚抗原免疫效应真核表达质粒
- DC-SIGN:C型凝集素中的新成员被引量：2
- 2005年
- DC SIGN是一种树突状细胞特征性的且具有多种功能免疫新分子 ,不但可以参与树突状细胞的迁移、粘附以及对抗原的识别与内化 ,还可以参与许多病原体的免疫逃避 ,本文拟就有关内容作一综述。
- 崔自由陈晓郁
- 关键词：DC-SIGN受体免疫逃避
- CpG ODN对人胃癌BGC823细胞RNA转染的脐血树突状细胞诱导CTL活性影响的研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨肿瘤细胞RNA转染脐血树突状细胞对CTL特异性抗肿瘤作用的影响,以及CpG ODN对脐血DC的免疫佐剂作用。方法分离脐血单个核细胞,经SCF、GM-CSF和IL-4诱导和BGC823RNA转染形成成熟DC,加入CpG ODN,通过形态学、表面标志和DC诱导T细胞增殖和CTL杀伤活性判断CpG ODN对DC功能的影响。结果肿瘤RNA转染后DC高表达MHC-I、MHC-II和CD54、CD80和CD86,对T细胞的促增殖作用和CTL杀伤活性显著增强,P<0.01。CpG ODN能显著促进DC功能。结论从脐血中诱导出DC,经肿瘤细胞RNA转染,可使DC表达MHC分子、协同刺激分子、黏附分子以及活化T细胞能力显著增强,CpG ODN具有增强DC抗原提呈功能的作用。
- 杜英黄玉敏孙蕾董子明
- 关键词：BGC823脐血
- 树突状细胞及exosomes体外诱导抗脑胶质瘤细胞毒活性的研究被引量：8
- 2006年
- 目的探讨负载肿瘤抗原的树突状细胞(DCs)及其衍生exosomes诱导T细胞活化和特异性肿瘤杀伤的作用。方法将患者静脉血单个核细胞经GM-CSF、IL-4诱导产生DCs,收集培养上清液,超速离心法制备exosomes。流式细胞术检测DCs表面标志表达,用SDS-PAGE和western-blot检测exosomes携带MHC和共刺激分子的情况。MTT法观察DCs及exosomes对T细胞促增殖作用和CTL体外杀伤活性。结果肿瘤抗原致敏的DC高表达MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD54、CD80和CD86,与抗原致敏前相比有显著差异,P<0.05。DC衍生的exosomes表达MHC-Ⅱ、CD54和CD86,并显著引起T细胞扩增和细胞毒效应,与对照组相比有显著差异,P<0.01。结论从脑胶质瘤患者静脉血诱导出高表达MHC和共刺激分子的DCs以及exosomes,具有活化T细胞并产生特异性细胞毒活性的功能,有望成为临床治疗脑胶质瘤有效的新疫苗。
- 杜英陈绍倩黄玉敏孙蕾王鑫顾巧丽杨波董子明
- 关键词：树突状细胞EXOSOMES脑胶质瘤细胞毒活性
- 转染pcDNA3-hCEA的人树突状细胞抑制MGC803裸鼠移植瘤的生长被引量：5
- 2005年
- 目的:探讨转染癌胚抗原基因pcDNA3-hCEA的人树突状细胞(DC)对胃癌细胞MGC803裸鼠移植瘤生长的影响.方法:采用细胞因子rhIL-4和rhGM-CSF诱导培养法制备人外周血DC,并用L ipofectine向人DC转染pcDNA3-hCEA.RT-PCR检测转染人CEA真核表达质粒的表达.使用DC(pcDNA3-hCEA)疫苗体外诱导人T淋巴细胞靶向性杀伤反应,并在体内实验中观察DC(pcDNA3-hCEA)对MGC803在裸鼠上致瘤性的影响.结果:针对特定引物DC(pcDNA3-hCEA)在588 bp处有CEA片段的表达;DC(pcDNA3-hCEA)能够诱导的人T淋巴细胞靶向性杀伤活性(%),在效靶比分别为10∶1,20∶1,40∶1时的结果为19.4±3.8,24.7±3.7,38.1±5.4;DC(pcDNA3-hCEA)能显著抑制MGC803的生长,其肿瘤生成日期较对照组延长(中位数10 dvs6 d,n=5),瘤体生长速度较对照组缓慢,d 23瘤体体积明显小于对照组[(0.24±0.10)cm3vs(0.65±0.17)cm3,(1.36±0.42)cm3,n=5,P<0.05].结论:转染pcDNA3-hCEA的人DC能有效抑制MGC803在裸鼠体内的生长.
- 马俊芬黄幼田赵明耀杨洪艳郑智敏董子明
- 关键词：树突状细胞癌胚抗原转染
